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张丽瑶’陈敏
(1.射洪市人民医院四川射洪629200;2.成都中医药大学附属医院四川成都610075)
摘要溃疡性结肠炎属于“炎症性肠病”范畴，为一种世界性难治性疾病，对更多安全、高效临床手段的需求，决定了动物 实验的重要性。本文整理归类了近年来溃疡性结肠炎动物模型的制备方法，以期为溃疡性结肠炎动物模型制备提供参考
关键词溃疡性结肠炎；动物模型；文献综述
中图分类号：R574.62 文献标识码：A文章编号：1006-0979( 2021 )03-0147-03
Research progress of ulcerative colitis animal model
Z H A N G Li-y a o1,C H E N M i n2.
(1. S h e h o n g f V o p l e's Hospi t a l 629200;2. Affiliated Hospital of C h e n g d u University of Traditional C h i n e s e M e d i c i n e 610075) [Abstract] Ulcerative colitis b e l o n g s to the category
of i n f l a m m a t o r y b o w e l d i s e a s e a n d is a w o r l d w i d e refractory d i s e a s e.T h e d e m a n d for m o r e safe a n d efficient clinical t r e a t m e n t m e t h o d s d e t e r m i n e s the i m p o r t a n c e of related a n i m a l e x p e r i m e n t s.T h i s article sorts out the
preparation m e t h o d s of a n i m a l m o d e l s related to ulcerative colitis in
a n i m a l m o d e l s related to ulcerative colitis.
[Keywords] U C;A n i m a l m o d e l s;R e v i e w
溃疡性结肠炎（u k e r a l i v e colitis,U C)主要表现为结肠黏膜
层及黏膜下层的持续性炎症，病变往往先发于直肠，而后逐渐
向全结肠蔓延，主要临床表现包括反复发作的腹痛、腹泻、黏液
脓血便、里急后重、形体消瘦等％本病目前临床主要选用
糖皮质激素、氨基水杨酸制剂、免疫调节剂等药物，但本病具有
张雅玫高复发率的特点，且长期用药容易导致不良反应的发生中医
药对U C的具有独特优势，体现于中药本病可显著改
善全身症状，减少并发症及复发率，关于中医药U C的研究 T.作也在不断完善，中药成分复杂、作用靶点多样的特点决定 了需要进行大量的基础实验，探索更多新的药物和方案。
中医证候动物模型的制备进行初探，分析其模型复制的方法和
表现，为模型选择提供参考=
I一般动物模型 *
A«金项目：国家f l然科学基金资助项H(编号..817743211；科研能力提升"S人计 削”<20-B05)
作者简介：张搁摇（丨993-).女，汉族.四川眉山人.医师.从V中医药防治Br肠疾病的
t t床与实验研究
*通讯作者：陈敏(1982-)，女.汉族.四川成都人.博士，副主任医师.硕士研究生导 师.从事中医药防治肛肠
疾病的临床与实验研究.rece n t y e a r s,h o p i n g to p r o v i d e a refe r e n c e for the p r e p a r a t i o n of
1.1小鼠
1.1.1D S S制备U C模型葡聚糖硫酸钠（D S S)是由蔗糖合成的 -种硫酸多糖体，可导致小鼠肠道黏膜和组织损伤，与人类U C 的炎症反应模式相似|21。S t u r g e o n C等P研究发现D S S造成结肠 组织损伤的机制可能是通过造成黏膜屏障的结构损伤而导致结肠通透性增加。郑裂等141将5g D S S溶解于100 m L d<I H20中配制成5%的溶液，予雄性C57B I76小鼠自由饮用7 d，期间禁 水，正常进食,7 d后小鼠肛门处可见血便，与正常组相比，模型 组小鼠结肠指数、湿度及长度比值均增加(P<0.05 >.血清M P0活性及丨L-1(5含量有所增加(P<0.05)，而经过美沙拉嗪的 阳性对照组结肠状况及炎性介质表达均有改善。王一帆等151予 以雄性B a l b/C小鼠3%D S S自由饮用7 d，造模后小鼠出现腹泻、黏液血便及体质最减轻，镜下观察模型组结肠腺体结构排列紊乱.杯状细胞减少，黏膜及黏膜下层出现大量炎性细胞浸润。祁燕等|6t t小鼠适应性喂养7 d后，将D S S(分子质量36000~ 40000)溶于蒸馏水配制成3%的溶液，予小鼠自由饮用7 d，并 每隔一日更换新鲜D S S溶液，造模后小鼠蜷卧懒动，体质量明 显减轻，毛发无光泽.出现明显的脓血便，镜下观察模型组小鼠 同有腺体消失，糜烂溃疡明显，炎细胞大量浸润，部分浸润至黏 膜下层及肌层，指标检测见与空白组相比，模型组小鼠结肠组
织 I L-18、I L-33、N L R P3、A S C及 C a s p a s e-l m R N A 的表达都有所 提高，而与模型组相比，经过柳氮磺吡啶(S A S P)的阳性组 大鼠的一般情况及结肠组织损伤情况都有所改善，相关指标的 表达有所下调，提示造模成功。
1.1.2 T N B S制备U C模型三硝基苯磺酸(T N B S)诱导小鼠U C 模型的机制是T N B S作为半抗原与结肠中组织蛋白结合诱导免 疫反戍和迟发超敏反应，导致肠黏膜出现单个和细胞浸润的透 壁性炎症，而乙醇作为有机溶剂，可溶解肠黏膜表面的黏液，暂 时破坏肠黏膜屏障，进一步帮助T N B S与结肠组织蛋白的结合A
董瑞娟等181将B a l b/c•小鼠以钠50m g/k g麻醉后，用 18G静脉留置针的套管经小鼠肛门轻轻插人结肠，直圭套管顶 管距离肛门约4 c m处，将连接1m L注射器的套管针内芯插人 套管，使小鼠倒立并缓缓注人1.5%T N B S50%乙醇溶液100 |x U 使小鼠保持倒立30 s。造模后动物出现竖毛、活动减少及稀便 等症状，镜下观察到小鼠结肠组织腺体扭曲及炎性细胞浸润，结肠组织检测到大量的丨L-12/23 p40及I F N-y经S A S P 的阳性对照组相关症状及指标都有所缓解和下调。徐凤等191将 小鼠禁食不禁水24 h后以10%水合氯醛麻醉，用改良的小鼠灌 胃针将T N B S(70m g/K g)溶液缓缓注入小鼠肠腔，提尾倒立1m i n 后待其自然清醒，造模后小鼠体质量减少，精神萎靡，出现明显 的稀便和血便，解剖可见模型组小鼠结肠充血增厚，出现明显 的溃疡面，结肠黏膜呈黑褐并伴随表面坏死。与正常组相比，模型组小鼠D A I评分显著升高(P<0.01 )，组织中M P0活性，血清D A0和D-L A水平均显著升高（P<0.01)
，上述情况在经S A S P的阳性组中均有所改善。
1.2大鼠
1.2.1D S S制备U C模型D S S也常应用于大鼠U C模型的制备，王倩等"<«认为，D S S的浓度是造模成功与否的关键，实验设计 D S S低浓度组和D S S高浓度组S D大鼠分别予以30、50 g/丨，的 D S S自由饮用7 d，造模后两组大鼠均出现懒动、少食、体质量 下降、血便等U C急性表现,30 g/I,D S S所致大鼠结肠损伤轻微，病变深度大多可达肌层，病变范围较小，肉眼见血便少，大 便隐血呈轻度阳性;50 g/L D S S所致大鼠结肠损伤重，且病变随 着时间的延长而加深，炎性物质的浸润由黏膜下层逐渐浸润至 肌层和浆膜层。姜小艳等|n|给予W i s t a r大鼠自由饮用5%D S S 溶液7 <1，造模后大鼠疾病活动指数D A I评分及肠黏膜病理
H P S评分升高，血清I L-丨、1丨,-6J F N-7含量均有所上升。
1.2.2 T N B S制备U C模型吴东升等丨丨2丨将S D大鼠禁食24 h后 以水合氯醛麻醉，将石蜡油润滑过的0.4 m m直径聚乙烯软管 灌人直肠，深度约8<^1，注人5%丁抓8 5〇1_1^及50%乙醇0.25 m U模型组大鼠结肠黏膜肉眼可见明显充血水肿及不同程 度的溃疡糜烂，肠腔内可见多个小溃疡及伪膜出现，与模型组 相比，经美沙拉嗪的阳性对照组结肠损伤情况有所缓解-潘伟杰等1131将W i s t a r大鼠用4%水合氯醛麻醉后，以聚丙烯管 插入肘门上段8 c m，灌人2.5 m g/m L的T N B S溶液0.8 m丨,，造模 后模型
组大鼠D A I评分、大体形态损伤评分及结肠损伤评分明 显高于空白组，镜下见肠上皮结构紊乱，腺体破坏，炎症细胞浸 润明质，血清D-乳酸及D A0水平较空白组明显上升。陈冠儒等将5%二硝基苯磺酸与50%乙醇配制成体积分数为1/3的 混悬液,S D大鼠禁食24 h后以10%水合氯醛腹腔注射麻醉，经 肠道轻缓插人输液管至距肛8 (.m处，缓慢推人灌肠液（120 m g/ k g)，将大鼠提尾倒立1m i n后放冋笼中，造模后模铟组结肠可 见大量炎性细胞浸润，固有层腺体萎缩排列蒺乱.杯状细胞形 态改变，较之空白组，模型组大鼠血清丨1.-8含量显著升高 (P<0.01)、I L-10含量显著降低(P<0.01)、结肠组织I C A M-1含 量有所升高（P<〇.〇5).
1.2.3D N C B制备U C模型二硝基氯苯(D N C B)为致敏性化学 物质，对动物致敏可产生溃疡性结肠炎病变.其造模特点是模 拟人类免疫致敏过程，导致迟发性变态反应造成肠黏膜损伤，达 到全身免疫异常与局部炎症病变的结合丁凌辉等w以W i s t a r 大鼠经水合氯醛麻醉后，将聚丙烯管插人大鼠肛门8 灌入0.25 m L U N B S/乙醇溶液（D N B S30 m g溶于 50%乙醇 0.25 m U，灌肠同时缓缓拉出聚丙烯管，提尾倒立1m i n：造模后3~5 d，模 型组大鼠相继出现倦怠喜卧，10 d后出现饮食减少，轻微竖毛，15 (1出现肛周污秽，可见血便，与空白组相比，模型组大鼠结肠 组织I L-13含量降低，丨L-23含量升高(P<0.05)。钟宇等1171以S D 大鼠背部脱毛后以20 g/L D N C B/丙酮液0.25 m L滴背14 d，第 15 d腹部涂抹D N C B/丙酮观察是否致敏，出现红肿、硬结则为 致敏，对致敏大鼠禁食24 h后钠麻醉，聚丙烯管插入 月t门上段约8 c m后注人0.04 m m o l/L D N C B乙醇（50%)溶液 0.25 m L，连续灌肠2山
第3天注人8%乙酸2 m L，准确汁时15 S 后予生理盐水5 m L冲洗后完成造模.模型组大鼠镜下观察见结肠黏膜腺体受损严®，黏膜和黏膜下层大量炎症细胞浸润，个别肌层组织变薄，失去正常结构，模型组血清和结肠组织匀 浆中M P0.P-选择素水平显著高于正常组(P<0.01 ),. 2中医证候模型
根据U C的临床特点，本病当属祖国医学“肠擗”“赤沃”“痢 疾”“下利”等病的范畴，而U C在疾病不同阶段或根据不同临床 表现有着不同病理侧車：点，如脓血便主要病机为湿热蕴结于肠 道，脂络受损；泄泻主要病机为湿热蕴结倡导或脾虚失丁-运化，湿邪阻滞；腹痛的主要病机为湿热蕴结，气机不畅，或肝脾不 和，虚风内扰等。
辨证论治是中医认识和疾病的基本准则，对T疾病表 现复杂的疾病，制备动物模型时应不止考虑病理表现，E当考 虑中医证型_.，建立病证结合的U C动物模型是开展U C中医研 究的关键，建立完善统一的U C动物证候模型标准，为U C的中 医药动物研究提供更为丰富的参考。
2.1脾虚湿困型姜小艳等"8通过“内外W+T N B S”法建立脾虚湿 闲型大鼠模型，大鼠每日予4丈冰水2 m L灌胃一次，双日供应 充足饲料并给予猪油4 m L—次，每日8〜16点强迫大鼠站立在 2 c m深的水中，连续20 d，第21日以T N B S/乙醇复合法复制
U C模型。
2.2肝郁脾虚型朱亚珍等1|91采用T N B S/乙醇溶液灌肠法+束缚 法+饮食失节法进行模型制作，每日用大鼠束缚器不定时束缚 大鼠四肢，每次约8 h，同时隔H禁食，模拟饥饱失常,2周后以 T N B S/乙醇复合法造模造模后大鼠精神萎靡，倦怠齊卧，耳尖
向背部靠拢；烦躁，警惕性高，对束缚反应剧烈；大便稀溏，旷场 实验示大鼠运动总距离、中央进人次数减少，中央区停留时间 明f i减少(P<0.01 )，高架十字迷宫示大鼠运动总距离、双侧开放 臂进人次数、停留时间及中央区进人次数明显低于正常组(/\0.0丨）：指标检测见与空白组相比，模型组大鼠血清丨L-4及 1L-10含量明显降低，丨L-17和I F N-7含量显著升高(P<0.01)
2.3湿热型朱宇珍等™将大鼠置于高湿高温环境[温度（35± 2)丈，湿度(95±2)%】中，每日予高脂高糖饲料(含猪油、蛋白粉、白砂糖等)饲养，进行湿热造模，3周后以D N C B/丙酮法制备U C
模型。较之单纯U C模型，湿热U C模型大鼠更早出现倦怠喜 卧，毛无光，小便黄浊，体质量增长缓慢，大便颜变深，粪质 稀且秽臭，出现与临床湿热证U C相似症状而湿热U C模铟大 鼠比单纯U C组大鼠结肠损伤及病理表现更为严重，体现了湿 热能促进U C的发展。
2.4睥肾阳虚型王爱华等i«i运用苦寒泻下药番泻叶制备睥阳 虚模型，再用对肾脏有毒副作用的氢化可的松制备肾阳虚模 型。具体操作为以番泻叶10 m丨7k g及氢化可的松丨5 m g/K g灌 胃，每日1次.持续21d后以T N B S/乙醇法制备U C模型。造模 后模型组大鼠自主活动减少，反应迟钝，皮毛晦暗.喜扎堆弓背
嗜卧，饮食减少J I：周污秽.大便稀溏且伴有不同程度黏液脓血 便，与临床脾肾阳虚型U C症状相似。
3结语
当今科研人员在U C模型动物的选择上多使用大鼠及小鼠，因其词养方便，模沏制作简便，a肠道结构与人有较高的相 似度，在药物的选择上多通过化学制剂造成肠道黏膜损伤制备 动物模型。
除文中所述常用模型制备途径外，u c的动物模型的复制 方式也有多种选择，但如何选择更安全、稳定，能更好地反映临 床u c症状的动物模型一直是研究重点。而对中医特的 关注，使中医u c相关动物实验模型制备的关注点由病理 损伤逐渐转向病证结合，但中医辨证论治的特殊性也i h中医动 物模型制备面临诸多挑战，如动物模型病和证的简单叠加并不 能反映人体自然发病状态，以及疾病过程中病证的变化和相互 转化也对实验结果产生极大的影响。如何制备稳定的u c中医 动物证候模型及规范的模型标准.有待探索、整合及完善。
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