C h i n e s eH e p a t o l o g y ,A p
r ．２０２０,V o l ．２５,N o ．４ 其㊀他
N Ｇ
张宁萍㊀方颖㊀刘雪静㊀谢黎㊀吴健㊀沈锡中
㊀㊀基金项目：北京医卫健康公益基金会(YW J K J J H K Y J J ＧG １７０１４)作者单位:２０００３２㊀上海㊀复旦大学附属中山医院消化科上海市肝病研究所(张宁萍，方颖，吴健，沈锡中)；复旦大学基础医学院病原生物系(刘雪静，谢黎，吴健)
共同第一作者：方颖
通信作者：沈锡中,E m a i l :s h e n ．x i z h o n g ＠z s Ｇh o s p i t a l ．s h ．c n ；吴健,E m a i l :j
i a n ．w u ＠f u d a n ．e d u ．c n ㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀在非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠中探索N Ｇ乙酰半胱氨酸(N A C )对肝细胞线粒体自噬的影响.方法㊀C ５７B L /J ６小鼠分别给予１６周的正常饮食㊁高脂高糖(H F C D )饮食和H F C D ＋
N A C 饮食.比较H E 和M a s s o n 染㊁A L T ㊁A S T ㊁I L Ｇ１β㊁肝组织甘油三酯水平评价小鼠肝损伤.通过免疫荧光染观察线粒体自噬.比较３组小鼠肝组织内线粒体自噬标志物在m R N A 和蛋白水平的变化.结果㊀H F C D 组小鼠较对照组A L T [(２４．９ʃ２．１２)比(１７６．７ʃ４４．３２)U /L ,P ＜０．０５]㊁A S T [(７６．７ʃ９．０６)比(２９１．３ʃ３９．６６)U /L ,P ＜０．０５]㊁I L Ｇ１β[(２．９４ʃ０．０８)比(９．１２ʃ１．２１),P ＜０．０５]显著升高,H F C D ＋N A C 组较H F C D 组肝功能好转,I L Ｇ１β降低[
(９．１２ʃ１．２１)比(６．７７ʃ０．５８)n g /L ,P ＜０．０５].H F C D 组小鼠肝组织内P a r k i n ㊁P I N K １表达降低，同时L C ３BI I /I 比值降低,P ６２表达量增高.提示H F C D 组小鼠肝细胞线粒体自噬水平降低.H F C D ＋N A C 组较H F C D 组线粒体自噬水平升高，差异有统计学意义(P ＜０．０５).结论㊀N A C 可能通过改善肝细胞线粒体自噬，进而减轻肝细胞炎症进展.
ʌ关键词ɔ㊀N Ｇ
乙酰半胱氨酸；非酒精性脂肪性肝炎；线粒体自噬E f f e c t o fN Ｇa c e t y l c y s t e i n eo n m i t o p h a g y o fh e p a t o c y t e s i n m i c ew i t hn o n a l c o h o l i cs t e a t o h e p
a t i t i s ㊀㊀㊀㊀Z HA N G N i n g Ｇp i n g １,２,
∗,F A N G Y i n g １,
２,X I E L i ３,WU J i a n １,２,
３,S H E N X i Ｇz h o n g １,
２
．㊀１．D e p a r t m e n to f G a s t r o e n t e r o l o g y a
n d H e p a t o l o g y ,Z h o n g s h a n H o s p i t a lo f F u d a n U n i v e r s i t y ,S h a n g h a i ２００３２,C h i n a ;２．S h a n g h a iI n s t i t u t eo f L
i v e r D i s e a s e s ,F u d a n U n i v e r s i t y S h a n g h a i M e d i c a l C o l l e g e ,S h a n g h a i ２００３２,C h i n a ;３．D e p a r t m e n t o f M e d i c a l M i c r o b i o l o g y ,F u d a nU n i v e r s i t y S c h o o l o f B a s i cM e d i c a lS c i e n c e s ,S h a n g
h a i ２０００３２,C h i n a C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :S H E NX i ＧZ h o n g ,E m a i l :s h e n ．x i z h o n g ＠z s Ｇh o s p i t a l ．s h ．c n ;WUJ i a n ,E m a i l :j
i a n ．w u ＠f u d a n ．e d u ．c n
ʌA b s t r a c t ɔ㊀O b j
e c t i v e ㊀T o i n v e s t i g a t e t h ee
f f e c to fN Ｇa c e t y l c y s t e i n e (N A C )o n m i t o p h a
g y i n m i c ew i t hn o n a l c o
h o l
i c s t e a t o h e p a t i t i s ．M e t h o d s ㊀C ５７B L /J ６m i c ew e r e f e dw i t hc o n t r o l d i e t ,h i g h Ｇf a t a n dh i g
h Ｇc a l o r i e s (H F C D )d i e t a n daH F C D ＋N A Cd i e t f o r １６w e e k s ．H Ea n dM a s s o n s t a i n i n g w e r e u s e d t o e v a l u a t e l i v e r i n j u r y ．L i v e r f u n c t i o n ,I L Ｇ１β
,b l o o d g l u c o s e a n d t r i g l y c e r i d e l e v e l s i n l i v e r t i s s u e sw e r e d e t e c t e d ．I m m u n o f l u o r e s c e n c e s t a i n i n g o
f f r o z e ns e c t i o no f l i v e r t i s s u ew a su s e d t oo b s e r v em i t o p h a
g y ．C
h a n g e s o fm R N Aa n d p r o t e
i n l e v e l s o fm i t o p h a g y m a r k e r s i n l i v e r t i s s u e s o f ３g r o u p s o fm i c ew e r e c o m p a r e d ．R e s u l t s ㊀C o m p a r e d t oc o n t r o l g r o u p ,t h e A L T [(２４．９ʃ２．１２)v s (１７６．７ʃ４４．３２)U /L ,P ＜０．０５],A S T [(７６．７ʃ９．０６)v s (２９１．３ʃ３９．６６)U /L ,P ＜０．０５]a n d I L Ｇ１β[
(２．９４ʃ０．０８)v s (９．１２ʃ１．２１),P ＜０．０５]l e v e l s o fH F C D g r o u p w e r ei n c r e a s e d ．T h el i v e rf u n c t i o no f H F C D ＋N A C g r o u p w a si m p r o v e d ,a n dt h eI L Ｇ１βl e v e l s w e r ed e c r e a s e d [(９．１２ʃ１．２１)v s (６．７７ʃ０．５８)n g /L ,P ＜０．０５]．T h ee x p
r e s s i o no fP a r k i n ,P I N K １a n dL C ３BI I /I r a t i o i nt h e l i v e r t i s s u e s o fH F C D g r o u p d e c r e a s e d ,w h i l e t h eP ６２l e v e lw a s i n c r e a s e d ．T h e s e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t t h e l e v e l o fm i t o p h a g y i n H F C D g r o u p w a sd e c r e a s e d ．C o m p a r e d w i t ht h e H F C D g r o u p ,m i t o p h a g y o fh e p a t o c y t e si nt h e H F C D ＋N A C g r o u p
i m p r o v e d (P ＜０．０５)．C o n c l u s i o n ㊀N A C m a y r e d u c eh e p a t o c y t ei n f l a m m a t o r yp r o g r e s s i o nb y i m p r o v i n g m i t o p h a g y o f h e p a t o c y t e s i nm i c ew i t hn o n a l c o h o l i c s t e a t o h e p
a t i t i s ．ʌK e y w
o r d s ɔ㊀N Ｇa c e t y l c y s t e i n e ;N o n a l c o h o l i c s t e a t o h e p a t i t i s ;M i t o p h a g y
２８３
肝脏２０２０年４月第２５卷第４期
㊀㊀非酒精性脂肪性肝炎(N A S H)发病率日益升高，但其发病机制尚未明确.N A S H的肝细胞以线粒体异常为特征，线粒体损伤是促进单纯性脂肪肝向N A S H进展的重要因素之一[１Ｇ２].正常生理条件下，受损线粒体可以通过自噬机制(即线粒体自噬)被及时清除[３].肝细胞自噬缺陷与脂肪滴堆积㊁胰岛素抵抗㊁N L R P３炎症小体活化有关[４].NＧ乙酰半胱氨酸(N A C)是还原型谷胱甘肽的前体，有保护肝细胞作用，用于药物性肝损伤的[５].研究者的前期研究提示,N A C能改善游离脂肪酸诱导的大鼠原代肝细胞线粒体自噬功能缺陷[６]，但其体内作用尚不明确.本研究通过建立高脂高糖诱导的N A S H小鼠模型，以N A C进行干预，观察N A C对N A S H小鼠肝细胞线粒体自噬的影响.
材料与方法
一㊁实验动物
清洁级C５７B L/J６小鼠１８只,６~８周龄，雄性，由上海斯莱克实验动物有限公司提供.饲养于复旦大学上海医学院实验动物中心.
二㊁主要试剂与仪器
主要仪器：荧光分光光度计(N a n o d r o p),P C R仪(B I OＧR A D)，电泳仪(B I OＧR A D)，全自动化学发光图像分析系统(T a n o n),R e a lＧT i m e定量P C R仪(T h e r m o)，快速型血糖仪(罗氏公司)，单电子激光共聚焦显微镜(L e i c a)，倒置显微镜(N i k o n)，荧光显微镜(N i k o n).主要试剂：甘油三酯检测试剂盒(南京建成生物研究所),M a s s o n染试剂盒(武汉谷歌生物科技有限公司)，抗体:βＧa c t i n(S a n t a C r u z),C O XI V (A b c a m),L C３B(N o v u s),P a r k i n(P r o t e i n t e c h), P I N K１(S a n t aC r u z),P６２(P r o t e i n t e c h).
三㊁动物分组与模型建立
小鼠分别于耳缘打孔编号，在适应性喂养１周后随机分为３组：正常饮食对照组，高脂高糖诱导N A S H组(H F C D)，高脂高糖喂养同时添加N A C干预实验组(H F C D＋N A C)，每组６只.高脂高糖诱导N A S H给药方法参见本课题组研究论文[７],H F C D＋N A C组在高脂高糖喂养同时按照每日１５０m g/k g经饮用水给予N A C干预.N A C配制方法:１L饮用水(高糖水)中加入０．４５g N A C，调整p H值为７．０.分别于喂养１６周后对３组小鼠实施安乐死，并保留肝脏和外周血液标本.
四㊁测定指标及方法
张奀宁(一)肝脏指数及组织病理学检查㊀新鲜肝组织完整分离后称重，计算肝脏指数＝肝脏湿重/体重ˑ１００％.福尔马林固定肝组织后石蜡包埋切片,H E染及M a s s o n染后光镜下观察肝脏变化.
(二)血清生化指标检测㊀小鼠眼眶取血,３０００r p m离心１０m i n后分离血清，由全自动生化仪检测血清A L T㊁A S T㊁I LＧ１β.空腹血糖通过取小鼠尾静脉血由罗氏快速血糖仪检测.
(三)肝组织甘油三酯定量检测㊀采用南京建成生物研究所甘油三酯(T G)检测试剂盒(A１１０Ｇ２)检测.过程按照说明书进行.
(四)组织免疫荧光染㊀肝组织冰冻切片用预冷丙酮固定１０m i n,P B S洗涤３次.３％B S A室温封闭３０m i n.擦干封闭液后加一抗(C O XI V标记线粒体,L C３B标记自噬)，平放于湿盒内４ħ过夜.第二天P B S洗涤３次.加二抗后避光室温孵育１小时.P B S 洗涤３次.加D A P I染液，避光室温孵育１０m i n. P B S洗涤３次.盖玻片封片后在单电子激光共聚焦显微镜下观察并拍照.
(五)R TＧP C R检测㊀提取肝脏总R N A后经荧光分光光度计检测R N A定量.取２μg总R N A为模板，配置２０μL反应体系，按试剂盒说明进行逆转录. R TＧP C R每个目的基因或内参均配制３管.反应体系为:S Y B R g r e e n M I X１０μL，目的基因/内参正引物１．０μL，目的基因/内参正引物１．０μL,c D N A２．０μL,d d H２O６．０μL.P C R反应条件:９５ħˑ１０m i n，循环４５次,９５ħˑ１５秒,６０ħˑ１m i n，绘制熔解曲线.结果用目的基因与内参基因的相对表达量表示，计算方法采用ΔΔC T法.
(六)W e s t e r nb l o t检测㊀肝组织匀浆后,１２０００g 离心５m i n，收集上清得到总蛋白溶液.经１５％Ｇ８％浓度的S D SＧP A G E凝胶电泳分离后，转移到P V D F 膜.将P V D F膜放入５％的脱脂牛奶ＧT B S T封闭１小时.分别４ħ孵育P
a r k i n㊁P I N K１㊁L C３B㊁P６２㊁βＧa c t i n一抗过夜.T B S T洗涤后，二抗室温孵育３０m i n,T B S T洗涤３次.将E C L发光液加在P V D F 膜的蛋白面上反应１Ｇ２m i n，吸除多余发光液后放入全自动化学发光图像分析系统拍照.
五㊁统计分析
近似正态分布的计量资料采用均数ʃ标准差表示，计数资料采用n(％)进行统计描述.多组间计量资料的比较采用A N O V A进行检验，组间多重比较采用L S D法进行检验.计数资料比较采用χ２检验或
３８３
C h i n e s eH e p a t o l o g y,A p r．２０２０,V o l．２５,N o．４
F i s h e r精确卡方检验.统计分析应用S P S S１８．０或
G r a p h p a d６．０软件,P＜０．０５为差异有统计学意义.
结㊀㊀果
一㊁N A C对N A S H小鼠肝脏的影响
对照组小鼠肝脏外形正常，呈鲜红，质地柔软.
H F C D组(图１B)肝脏逐渐增大，呈黄白，表面可见颗粒样改变.H F C D＋N A C组(图１C)肝脏大体组织形态变化较H F C D组(图１A)轻.H E染对照组肝细胞形态正常，肝小叶内结构完整，肝索排列整齐有序，肝细胞未见变性㊁坏死或炎性细胞浸润.H F C D 组肝细胞逐渐出现小泡型及大泡小泡混合型的脂肪沉积及部分坏死，且范围由散在加重至广泛.汇管区周围炎症细胞浸润，炎性细胞浸润以大量单个核细胞为主，细胞核被脂滴挤压到细胞边缘(图１E).H F C D ＋N A C组肝细胞炎症及脂肪沉积情况较H F C D组轻(图１F).M a s s o n染,H F C D组及H F C D＋N A C组肝组织纤维化较对照组显著，但相对于H F C D组, H F C D＋N A C组肝组织纤维化无明显减轻(图１GＧI).
图１㊀对照组㊁H F C D㊁H F C D＋N A C组小鼠肝脏大体
及H E㊁M a s s o n染图像(ˑ２００)
与对照组相比,H F C D组及H F C D＋N A C组小鼠体质量及肝重增加，空腹血糖㊁肝脏甘油三酯及血清A L T㊁A S T㊁白细胞介素１Ｇβ(I LＧ１β)升高，其中H F C D＋N A C组较H F C D组肝脏甘油三酯及血清A L T㊁A S T㊁I LＧ１β降低，差异有统计学意义(P＜０．０５).见表１.
二㊁N A C对N A S H小鼠肝细胞线粒体自噬的影响
小鼠肝组织冰冻切片以C O XI V和L C３B双重染分别标记线粒体和自噬小体，在共聚焦纤维镜下观察比较３组小鼠肝组织内线粒体自噬的水平可见：对照组小鼠肝组织中的线粒体(C O XI V)呈点状均匀分布,H F C D组肝组织内C O XI V表
达量下降，且为团块状聚集，提示线粒体损伤逐渐加重.同时,H F C D 组L C３B表达也明显降低.相对于H F C D组,H F C D ＋N A C组C O XI V和L C３B表达量升高，提示线粒体自噬较H F C D组活跃.见图２A.
R TＧP C R法检测小鼠肝脏线粒体自噬相关基因A t g５㊁A t g７㊁P a r k i n/P A R K２㊁P I N K１表达量,H F C D 组及H F C D＋N A C组均较对照组下降，但相对于H F C D组,H F C D＋N A C组的线粒体自噬相关基因在m R N A水平上升高，差异有统计学意义(P＜０．０５).见图２D.
蛋白印迹法检测各组小鼠肝组织内P a r k i n㊁P I N K１的蛋白表达及自噬水平变化.结果显示, H F C D组小鼠较对照组肝组织内P a r k i n㊁P I N K１表达降低，同时L C３BI I/I比值降低,P６２表达量增高.提示H F C D组小鼠肝细胞线粒体自噬水平降低.
H F C D＋N A C组较H F C D组线粒体自噬水平升高，差异有统计学意义(P＜０．０５).见图２BＧC.
讨㊀㊀论
还原型谷胱甘肽是存在于肝脏中的抗氧化分子，能通过抗自由基作用抑制线粒体通透性改变㊁调控凋亡.N A C是谷胱甘肽的前体，具有抗氧化剂作用和血管舒张作用，可以减轻组织缺氧，在临床中常用于药物性肝损伤㊁急性肝衰竭等肝病的[５,８Ｇ９].
表１㊀对照组和实验组小鼠一般情况㊁血生化指标比较( xʃs)
㊀组别体质量
(g)肝质量
(g)
肝指数
(％)
空腹血糖
(m m o l/L)
肝甘油三酯
(m m o l/L)
血清A L T
(U/L)
血清A S T
(U/L)
血清I LＧ１β
(n g/L)
对照组１．２９ʃ０．１１３０．４５ʃ１．１５４．２４ʃ０．３６５．４０ʃ０．４０１．３７ʃ０．１１２４．９ʃ２．１２７６．７ʃ９．０６２．９４ʃ０．０８H F C D２．７１ʃ０．４５５１．３５ʃ１．４１５．２８ʃ０．８３９．０１ʃ１．１３４．２８ʃ０．６６１７６．７ʃ４４．３２２９１．３ʃ３９．６６９．１２ʃ１．２１H F C D＋N A C２．３６ʃ０．３４４８．４２ʃ３．５９４．９１ʃ０．８６７．２８ʃ０．７８３．６６ʃ０．５４８６．８２ʃ３６．１５１５７．３ʃ４５．３１６．７７ʃ０．５８P值＜０．０１＜０．０１０．０７＜０．０１＜０．０１＜０．０１＜０．０１＜０．０１ ４８３
肝脏２０２０年４月第２５卷第４期
㊀㊀A．小鼠肝组织冰冻切片免疫荧光双染.B．小鼠肝细胞线粒体自噬相关蛋白W e s t e r nb l o t显影结果.C．W e s t e r nb l o t相对灰度比.D．小鼠肝细胞线粒体自噬相关基因A t g５㊁A t g７㊁P a r k i n/P A R K２㊁P I N K１的m R N A相对表达量.
图２㊀N A C对N A S H小鼠肝细胞线粒体自噬的影响
㊀㊀线粒体异常是N A S H患者肝细胞病变的特征之一[１０Ｇ１３].线粒体对氧化应激损伤十分敏感.N A S H 进程中高游离脂肪酸造成的脂毒性导致肝细胞损害，刺激生成过量R O S，无法清除时蓄积的R O S会攻击线粒体造成线粒体肿胀，线粒体内呼吸链复合体酶活性下降，引起线粒体途径的内源性R O S(m t R O S)生成增多及A T P合成减少，导致线粒体损伤和功能障碍.外源性R O S和m t R O S还可以直接造成线粒体D N A (m t D N A)断裂和损伤[１３Ｇ１４].通常受损伤的线粒体通过线粒体自噬途径被清除，并减少线粒体途径的内源性R O S生成，保护线粒体功能稳定，确保应激的细胞存活[３,１５].线粒体自噬下降，细胞防卫功能缺失，过量的m t R O S累积攻击线粒体造成线粒体膜破裂，使线粒体向胞质内释放细胞素C凋亡诱导因子等凋亡相关蛋白，从而诱导细胞凋亡以及导致细胞死亡[４].
我们前期研究证实,N A S H小鼠肝细胞线粒体自噬水平下降诱导N L R P３炎症小体活化，是导致N A S H肝细胞炎症进展的因素之一.同时，体外细胞实验提示,N A C可以通过抑制细胞R O S和m t R O S 形成，部分恢复线粒体自噬水平，从而抑制N L R P３炎症小体活化[６].本研究通过N A S H模型小鼠进一步证实，添加N A C减轻了高脂高糖诱导的N A S H小鼠肝脏细胞脂肪沉积和炎症.相对于H F C D组,H C F D ＋N A C组小鼠肝细胞受损的线粒体自噬水平升高，且部分线粒体功能恢复.提示N A C可能通过改善肝细胞线粒体自噬，进而减轻肝细胞炎症进展.
参㊀考㊀文㊀献
[１]㊀B e n e d i c t M,Z h a n g X．N o nＧa l c o h o l i cf a t t y l i v e rd i s e a s e:A n
e x p a n d e d r e v i e w．W o r l d JH e p a t o l,２０１７,９(１６):７１５Ｇ７３２．[２]㊀C a r r i c oC,M e y e r J G,H eW,e t a l．T h em i t o c h o n d r i a l a c y l o m e
e m e r g e s:p r o t e o m i c s,r e g u l a t i o nb y s i r t u i n s,a n dm e t a b o l i c a n d
d i s
e a s e i m p l i c a t i o n s．C e l lM e t a b,２０１８,２７(３):４９７Ｇ５１２．[３]㊀S e d l a c k o v aL,K o r o l c h u kVI．M i t o c h o n d r i a l q u a l i t y c o n t r o l a s a k e y d e t e r m i n a n t o
f c e l l s u r v i v a l．B i o c h i mB i o p h y sA c t aM o l C e l l R e s,２０１９,１８６６(４):５７５Ｇ５８７．
[４]㊀T i a nZ,C h e nY,Y a oN,e t a l．R o l e o fm i t o p h a g y r e g u l a t i o nb y R O S i nh e p a t i cs t e l l a t ec e l l sd u r i n g a c u t el i v e rf a i l u r e．A m J P h y s i o lG a s t r o i n t e s tL i v e rP h y s i o l,２０１８,３１５(３):G３７４ＧG３８４．[５]㊀S a l e s I,D z i e r b a A L,S m i t h b u r g e r P L,e t a l．U s e o f
a c e t y l c y s t e i n e f o r n o nＧa c e t a m i n o p h e nＧi n d u c e d a c u t e l i v e r f a i l u r e．
A n nH e p a t o l,２０１３,１２(１):６Ｇ１０．
[６]㊀Z h a n g N P,L i uX J,X i eL,e t a l．I m p a i r e d m i t o p h a g y t r i g g e r s N L R P３i n f l a m m a s o m ea c t i v a t i o n d u r i n g t h e p r o g r e s s i o nf r o m
n o n a l c o h o l i cf a t t y l i v e r t o n o n a l c o h o l i c s t e a t o h e p a t i t i s．L a b
I n v e s t,２０１９,９９(６):７４９Ｇ７６３．
[７]㊀L i uX J,D u a n N N,L i uC,e ta l．C h a r a c t e r i z a t i o no fa m u r i n e n o n a l c o h o l i cs t e a t o h e p a t i t i s m o d e li n d u c e d b y h i g h f a t h i g h
c a l o r i e
d i
e t p l u s
f r u c t o s ea n d
g l u c o s ei n d r i n k i n g w a t e r．L a b
I n v e s t,２０１８,９８(９):１１８４Ｇ１１９９．
[８]㊀W a n g D W,Y i nYM,Y a oYM．A d v a n c e s i n t h em a n a g e m e n t o f
a c u t e l i v e r f a i l u r e．W o r l d JG a s t r o e n t e r o l,２０１３,１９(４１):７０６９Ｇ
７０７７．
５８３
C h i n e s eH e p a t o l o g y,A p r．２０２０,V o l．２５,N o．４
[９]㊀D a r w e e s h S K,I b r a h i m M F,E lＧT a h a w y MA．E f f e c t o f NＧ
A c e t y l c y s t e i n eo nm o r t a l i t y a n d l i v e r t r a n s p l a n t a t i o n r a t e i n n o nＧ
a c e t a m i n o p h e nＧi n d u c e da c u t e l i v e r f a i l u r e:am u l t i c e n t e rs t u d y．
C l i n
D r u g I n v e s t i g,２０１７,３７(５):４７３Ｇ４８２．
[１０]㊀H a r d y T,O a k l e y F,A n s t e eQM,e t a l．N o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e r
d i s
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(收稿日期:２０２０Ｇ０４Ｇ０５)
(本文编辑：钱燕)
(上接第３８１页)
对难治性A I H，临床建议二线用药首选吗替麦考酚酯或英夫利昔单抗等.本研究中，仅３例属难治性A I H，由于患儿
病情进展迅速，故尚未采用二线药物.
综上，儿童A I H临床表现复杂,A I HＧ１型多见，病情进展迅速，临床多行激素单用或联合硫唑嘌呤，但往往需长期，且易复发.本文属回顾性分析，样本量偏小，未探讨儿童A I H易感基因及自身抗体，今后需深入研究.
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(收稿日期:２０１９Ｇ１０Ｇ２７)
(本文编辑：钱燕)
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