植物遗传资源学报2021，22 ( 2): 380-389
汪宝根\吴新义\李素娟2，陈小央3，李艳伟\汪颖\鲁忠富、吴晓花\李国景1 (1浙江省农业科学院蔬菜研究所，杭州310021;2浙江省农业科学院公共实验室，杭州310021 ^浙江省种子管理总站，杭州310020 )
摘要：“第三次全国农作物种质资源普查与收集行动”浙江项目组从全省32个县（市/区）共收集到豇豆地方资源76份 本研究通过对76份种质43个基本农艺性状的田间调查，发现76份种艰包括30份长肛豆（的L.)Walp. ssp.
)、46份普通启工豆（W g/w L. )Walp. ssp. w f l g W c u t o a )，浙江地方i i工豆种质在生长习性、嫩荚商品性及产量相关性状均存在丰富的遗传变异利用101个在染体上均匀分布的S N P标记对该体的基因型进行鉴定，主成分分析和系统进化树分析发现这些种质可以依据荚长分为长荚和短荚2大类，长荚类以长i x豆种质为主，短荚类以普通i t 豆种质为主：本研究进一步丰富了我国豇豆遗传基础，为地方豇豆资源的高效利用和新品种选育提供了科学依据3关键词：5工豆；地方种质资源；农艺性状；遗传多样性
Evaluation of Cowpea Germplasm Accessions
Collected from Zhejiang Province
WANG Bao-gen1, WU Xin-yi1, LI Su-juan2, CHEN Xiao-yang3, LI Yan-wei1,
WANG Ying1，LU Zhong-fu1，WU Xiao-hua1，LI Guo-jing1
(^Institute o f Vegetable, Zhejiang Academy o f A gricultural Sciences, Hangzhou 310021；^Public Laboratoty ^
Zhejiang Academy o f A gricultural Sciences, Hangzhou 310021；General Station fo r Seed
Administration o f Z hejiang Province, Hangzhou 310020 )
Abstract： As a sub-project under the frame of the Third National-Wide Investigation of Crop Germplasm Resources Project in China, we conducted the survey and collection of 76 cowpea germplasms in 32 counties in Zhejiang province, followed by the morphological diversity analysis at 43 agronomic traits in the field trials. Out of 76 accessions, 30 asparagus bean accessions( Vigna unguiculata{L. ) Walp. ssp. sesquipedialis )and 46 common cowpea accessions ( Vigna unguiculatai L. )Walp. ssp. unguiculata)have been identified. The large genetic variation on the growth habits, fresh pod characters and yield-related traits in this collection have been observed. Moreover, these a有格局 昵称
ccessions were subjected for a genotyping with 101 SNP markers. PCA and phylogenetic tree analysis showed two sub-populations (long-podded short-podded ) based on the pod length. The asparagus bean accessions are often detected in the long-podded subpopulation, while common cowpea accessions were predominant in the short-podded subpopulation. Collectively, our results unlocked the genetic diversity of Chinese cowpea germplasms collected from Zhejiang province, which might be valuable resources in the exploration of local cowpea resources and in breeding for new cultivars.
Key words： cowpea； local germplasms； agronomic traits； genetic diversity
收稿日期：2020-07-06 修回日期：2020-07-丨4 网络出版日期：2020-09-02
U R L： doi.Org/l0.13430/jki.jpgr.20200706001
第一作者研究方向为虹豆遗传育种，E-mail: **************
通信作者：李国景，研究方向为虹豆遗传育种与栽培，E-mail:************
万芙伽有去看过华晨宇基金项目：第三次全国农作物种质资源普查与收集行动（111821301354052030 ); N1家重点研发计划（2016Y F D0100204-32,2017Y F E0114500 );
浙江省农业（蔬菜）新品种选育重大科技专项（20丨6C0205丨-7-3 )
Foundation projects：T h e Third National Survey and Collection Action on Crop G e n n p l a s m Resources! 111821301354052030 ),National K e y R&D Program of China ( 2016Y F D0100204-32,2017Y F E0114500 ),Special Sci-Tech K e y Project of Breeding of N e w Varieties of
Agricultural( Vegetables )Crops in Zhejiang Province! 2016C02051-7-3 )
汪宝根等：浙江省地方豇豆种质资源的鉴定与评价381 2期
豇豆（咏似w/7gw/c w t o a(L.)Walp.)隶属豆科 (Fabaceae)菜豆族（Trib.紙D C.)虹豆属 (Savi)，是热带和亚热带地区重要的豆类作 物之一。豇豆为自花授粉二倍体，基因组大小约 620 M b[l]。栽培豇豆主要包括3种类型，即主要分 布于非洲的普通虹豆（L. )Wal p. ssp.)、主要分布于东非地区的短荚虹豆（(L. )Wal /zV^'/ca)和 主要分布于亚洲的长虹豆（L.) Walp.ssp.普通虹豆和短荚§工豆主要利用其干豆籽粒做粮食或饲料，长豇豆主要以嫩荚 做菜用[M]。我国主要分布有普通豇豆和长豇豆2个 亚种，其中普通豇豆是我国重要的食用豆类，长豇豆 是我国广泛栽培的重要豆类蔬菜。近年来我国豇豆 年播种面积约37万h m2，栽培面积约占世界的1/5。
豇豆在中国栽培历史悠久，距今1000多年北 宋时期的《广韵》中即有“豇”字的记载，在明清时 代已经
广泛种植和食用。我国研究人员于1979年 在云南省西北部发现了分布广泛的野生豇豆，1979- 1989年在湖北神农架及三峡地区也收集到野生豇 豆资源，因此中国被认为是豇豆的起源中心或次级 起源中心之一。我国幅员辽阔，豇豆栽培历史久远，形成的变异类型极其丰富，截至目前我国已经收集 保存国内外豇豆种质资源3000多份，其中长豇豆资 源1700余份。为了提高豇豆种质资源的利用效率，我国多个研究单位通过农艺性状调查、分子标记鉴 定等方法分析了不同种质的遗传多样性，为育种中 亲本选择及组合选配提供理论依据，如张忠武等[41对41份豇豆品种资源15项主要农艺性状进行相关 性、主成分和聚类分析，根据遗传多样性将其分为3 类，其中第I类的品种优势明显，具有较好的应用前 景；曹岩坡等[5]调查了来自河北省的丨20份豇豆种质资源13个表型性状，通过聚类分析将这些资源划 分为4大类，其中类n可作为生产品种；徐雁 鸿等[61利用丨3对S S R标记分析了 316份栽培豇豆 的遗传多样性，发现国内外资源差异明显，国内资源 可分为与地理来源的气候生态区明显关联的组，但育种高代材料的遗传多样性狭窄；陈禅友等[7]利 用23个R A P D标记鉴定了 40份长豇豆品种，根据 系统进化树分析将之分为5个品种；刘凯等[8：使 用S R A P和S S R标记分析了中国和马来西亚的41 份种质，发现同一来源或同一地理区域的种质资源 具有相对较近的遗传基础。
收集和保存地方种质资源是支撑农业可持续发展的战略性公益活动W。浙江省位于118。01，〜123。10'E，27。02'〜31。i r N之间，地处 亚热带中部，属季风性湿润气候，平原、丘陵、盆地、山地、岛屿等地理形态丰富，自然条件优越，有利于 生物多样性的形成和保护。浙江省于2017年启动 实施“
第三次全国农作物种质资源普查与收集行 动”，在全省范围内收集到豇豆地方种质资源76份3本研究在对这76份材料进行提纯扩繁、详细调查农 艺性状的基础上，利用在染体上均匀分布的S N P 标记鉴定其基因型、评价体遗传多样性，为地方特 种质的鉴定和有效利用提供参考。
1材料与方法
1.1试验材料
浙江省种质资源调查队按照“第三次全国农作 物种质资源普查与收集行动”技术规范，完成了浙 江省内20个县（市/区）的系统调查和其他43个 县（市/区）地方种质资源的普查征集，共收集到 76份豇豆地方种质资源，来自32个县（市/区），具 体编号、名称和基本信息见表1。
表1浙江省76份豇豆地方种质资源的基本信息
Table 1Collection information of 76 cowpea germplasms collected from Zhejiang province
全国统一编号 National unified nu m b e r
D N A编号
D N A number
小学教师评语名称
N a m e
收集地点
Collecting locations
经度（°E)
Longitude
纬度（°N)
Latitude
2017331097L01八月节淳安县中洲镇樟村村毛山岗自然村118.422429.4891 2017332062L02红豇豆建德市三都镇凤凰村下塘119.666529.5007 2017333005L03八月豇宁海县力洋镇海屿村121.647929.3041 2017333077L04八月更宁海县一市镇董家村121.443929.1764 2017334040L45摘豇豆奉化区尚田镇王董村121.399429.6147 2017334041L46迟羹豆奉化区尚田镇王董村121.399429.6147 2017334055L26迟梗豆奉化区大堰镇大堰村121.301329.5046
382植物遗传资源学报22卷
表1 (续）
全国统一编号 National unified number
D N A编号
D N A number
名称
N a m e
收集地点
Collecting locations
经度（°E)
Longitude
纬度（°N)
Latitude
2017334065L73红摘豇奉化区大堰镇大燕窠村121.286129.5671 2017334094L27摘豇豆奉化K大堰镇大燕窠村121.286129.5671 2017335037L43八月豇苍南县金乡镇湖里村120.626427.4431 2017335076L05八月豇苍南县桥墩镇官南村120.311727.4573 2018331017L28八月豇豆武义县新宅镇大莱村119.703228.7342 2018331030L29万豇武义县新宅镇大莱村119.703228.7343 2018331054L61豇豆武义县柳城畲族镇祝村119.606128.6109 2018331089L62寒露豇武义县柳城畲族镇县后村119.594228.6313 2018331090L63白豇豆武义县桃溪镇锦后村119.602928.6989 2018331091L64红豇豆武义县桃溪镇锦后村119.602928.6989 2018331100L65黑豇豆武义县柳城畲族镇祝村119.606128.6109 2018331102L66八月豇武义县柳城畲族镇县后村119.594428.6272 2018331108L67白豇豆武义县柳城畲族镇云溪村119.636828.6845 2018331111L68红八月豇武义县柳城畲族镇云溪村119.636828.6845 2018332091L30八月豇景宁县大均乡李宝村119.553327.9324 2018332108L31豇豆景宁县郑坑乡吴布村吴村119.811927.9985 2018332110L32长豇豆景宁县郑坑乡吴布村吴村119.811927.9985 2018332116L52八月豇景宁县郑坑乡吴布村吴村119.811927.9985 2018332177L53豇豆景宁县沙湾镇蔡湖村119.812127.9936 2018332201L06八月豇庆元县荷地镇荷地村119.286727.5739 2018332214L33八月豇庆元县黄田镇台湖村118.914627.8175 2018332241L54长豇
豆庆元县黄田镇黄源底村118.878527.7675 2018332406L34八月豇开化县芹阳办事处龙潭村118.420229.1732 2018332420L35豇豆开化县长虹乡库坑村118.190129.3024 2018332458L36豇豆开化县杨林镇平川村118.125529.0575 2018333405L37豇豆磐安县玉山镇元里村120.651229.2073 2018333413L38八月豇（黑）磐安县盘峰乡栗树坑村120.521428.8986 2018333414L39八月豇（红）磐安县盘峰乡栗树坑村120.521428.8986 2018334118L47红豇豆奉化区大堰镇南溪口村121.126329.5431 2018334318L48八月更（白皮）仙居县朱溪镇朱家岸村120.875528.7074 2018334319L49八月更（花皮）仙居县朱溪镇朱家岸村120.875528.7074 2018334320L50八月更（红皮）仙居县朱溪镇朱家岸村120.875528.7074 2018334424L51泥鳅豇临安区於潜镇祈祥临安国家区试站120.875628.7074
阿sir是什么意思2期汪宝根等：浙江省地方豇豆种质资源的鉴定与评价383
表 1 (续）
尤怎么组词全国统一编号 National unified num b e r
D N A编号
D N A number
名称
N a m e
收集地点
Collecting locations
经度（°E)
Longitude
纬度（°N)
Latitude
2018334468L56长豇豆临安区岛石镇仁里村118.543130.1754 2018335213L40花豇豆瑞安市平阳坑镇塘岙村120.365127.5837 2018335271L75八月豇瑞安市芳庄乡山坑村120.377827.9213 2018335423L57紫豇豆嘉善县干窑镇范东村120.926630.9181 2018335424L58绿豇豆嘉善县干窑镇范东村120.926630.9181 2018335427L59八月豇嘉善县干窑镇范东村120.926630.9181 2018335503L6
0八月豇嘉善县干窑镇范东村120.926930.9337 2019333679L77八月豇台州市黄岩区宁溪镇下桧村121.224528.5415 P330182003L07乌豇豆建德市乾潭姚村119.694129.5556 P330182013L08八月豇建德市乾潭镇姚村村119.280829.4584 P330304009L69豇豆瓯海区泽雅镇五凤烊村120.379428.0592 P330324008L70梗豆永嘉县岭北村120.324428.1564 P330326008L44豇豆平阳县麻步镇麻车头村120.447427.6374 P330326009L71豇豆平阳县麻步镇麻车头村120.447427.6374 P330328010L09八月花豇文成县百丈涤镇篁庄村120.000927.5053 P330329002L10八月豇泰顺县罗阳镇坪溪村119.701327.3589 P330381018Lll八月缸豆瑞安市林川镇吴山底村120.455827.9533 P330502012L76豇豆湖州市吴兴东林镇120.003530.6714 P330624010L12迟豇豆新昌县巧英镇莒根村121.101829.2385 P330726007L13土乌豇浦江县岩头镇桐店村119.975129.4877 P330726025L14青八月荚浦江县中余乡五星村119.982329.6024 P330726026L15红八月荚浦江县中余乡五星村119.988529.6042 P330782019L16野豇豆义乌市稠江街道下柳村120.008829.2691 P330783004L72乌豇豆东阳市巍山镇上山村120.390129.4024 P330822018L17八月豇常山县芳村镇新桥村岩背118.715229.1621 P330881001L18红饭豇豆江山市双塔街道塔东村118.401228.4524 P330881019L19冷豇豆江山市廿八都镇兴墩村118.339128.1732 P331003018L41八月梗台州市黄岩区上郑乡石墩村120.897628.5926 P331022003L20秋白豇5门县亭旁镇桃山村121.324629.0012 P331022004L21秋红豇三门县亭旁镇桃山村121.324629.0012 P331022005L22秋青豇三门县亭旁镇桃山村121.324629.0012 P331022012L23红细豆'门县亭旁镇邵家村121.360929.0542 P331023008L2
4八月豇天台县赤城街道大坑里村121.024129.2008 P331102023L55八月豇莲都LX仙渡乡梅田村119.701728.5561 P331121003L25八月豇（白皮黑籽）青田县巨浦乡驮龙村120.087228.1417 P331124015L42冬豇豆（红）松阳县斋坛乡东圩蓬村119.422828.8386
384植物遗传资源学报22卷
地点 Location
图1浙江地方豇豆资源分布地点 Fig.l The distribution location of cowpea
germplasm in Zhejiang province
100种聊天幽默开场白2.2浙江地方豇豆种质形态特征
2018-2019年连续2年对收集到的76份豇豆 种质的主要形态特征进行拍照、调查和记载（图2 )。 76份种质中，除P 330726007的生长习性为半蔓生 外，其他种质均为蔓生；5份种质花为白，其余 种质的花为紫；16份材料的花序柄为紫，其 余均为绿；在叶片形状上，11份材料为卵菱形、 5份为卵圆形、4份为披针形，其余5 6份为长卵菱 形；30份为软荚，46份材料为硬荚；嫩荚和荚缝 线变异丰富，以红和绿为主，但颜深度不一; 荚面有较平、微凸和凸3种，但大部分为凸形（占比 72.4% )；商品嫩荚有黄白、黄橙、浅红、褐和紫红 等5种；荚形有弓形、圆筒形和长圆条形3种，但弓 形较少，只有3份材料；种子粒形以肾形为主（占比 75% )；种脐环有橙、褐、黑和红4种，黑 为主（占比69.7% ); 21份材料易早衰，43份材料 衰老迟，12份材料表现为中间型。
遗传多样性分析采用Tassel 5.0软件。
2结果与分析
2.1浙江地方豇豆种质的分布特点
从76份材料的收集地点分布情况来看，全省
11个地级市中，除舟山外，其余10个地级市均收集 到豇豆地方品种，其中金华市为18份，数量最多，温 州、台州、丽水也是收集种质资源较多的地级市，分 别为12份、10份、10份（图1 )。这76份材料来自 32个县（市/区），其中收集最多的县（市/区）为 金华市武义县，其次为宁波市奉化区、丽水市景宁 县，分别为10份、6份、5份，大部分县（市/区）只 收集1份。76份材料均为农民自己留种种植，无野 生种类型。从收集到的材料的地理环境来看，大部 分种质来自山区和丘陵地带，海拔相对较高，村居分 散，人口密度小。
1.2主要农艺性状调查
所有种质材料于2018-2019年连续2年在浙江 省农业科学院海宁杨渡科研创新基地种植，采用完 全随机区组设计，2次重复。起垄种植，畦宽连沟1.5 m ，畦长丨0 m 。每畦种植2行，株距40 c m ，行距 75 c m ，每份材料种植100株，田间管理采用常规管 理方法。
每份材料随机选取10株进行农艺性状调查, 对播种期、出苗期、开花期、嫩荚始收期、嫩荚末收 期、始熟期、成熟期、全生育期、生长习性、单株分 枝数、叶片长、叶片宽、叶、叶片形状、叶柄长、节 间长、茎、花、每花序花朵数、花序柄、花序 柄长、嫩荚、喙颜、荚面、嫩荚长、嫩荚宽、嫩荚 厚、荚壁纤维、背缝线颜、腹缝线颜、嫩荚重、荚 型、初荚节位、单株荚数、单花梗荚数、单荚粒数、 成熟荚、荚形、粒形、脐环、粒、衰老性、百粒 重等43个重要农艺性状
进行调查记录，取2次重 复的平均值作为年度鉴定结果，2年鉴定结果的平 均值作为最终鉴定结果。衰老性调查参照苑希蕊 等[11)1对豇豆衰老性状的描述分为0〜5级。调查嫩 荚性状时每份材料至少取10个处于商品成熟期的 鲜荚，利用50 c m 刻度直尺精确测量荚长、利用游 标卡尺测量荚宽和荚厚，称重后计算单荚重。分别 对幼苗、花、商品嫩荚、叶片、植株茎节、种子等进行 拍照。
1.3 DN A 提取和基因型检测
每份材料取生长3周的幼苗嫩叶，液氮冷冻后 研磨，采用C T A B 法提取基因组D N A .-20 1保存 备用。根据X u 等[11 ]发表的豇豆高密度遗传图谱, 从基因组上随机均勻选择101个S N P 标记转化为 竞争性等位基因特异性P C R ( K A S P , Kompetitive
allele specific P C R )标 i 己（L G C G e n o m i c s Ltd ., Hoddesdon , U K ： )。K A S P 引物设计采用 L G C 公 司的KrakenTM 软件。利用浙江省农业科学院公共
实验室的IntelliQube 高通量基因分型检测平台进 行S N P 基因型检测，单点反应体积为1.6 (i L ，其中 样品 D N A 模板 0.8 p L ，2xMaster mix 和 Primer mix 混合后的体积为0.8 n L 。P C R 扩增程序为95 T . 15 m i n , 94 T ： 20 s , 61-55 V . 60 s ( Touch-Down P C R , 0.6 T ；每个循环）丨0个循环，94 20 s ，55 T ： 60 s ,
26个循环。试验结果采用IntelliQube 平台自带软件
分析。
1.4数据统计和分析
试验数据统计分析采用Excel 2010软件，
体
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