K9840凯氏自动定氮仪操作流程
1.化学试剂的准备
a.将蒸馏水加入到蒸馏水桶(带有蓝H2O标签)内,并将瓶盖拧紧。
b.配制30%~40%的氢氧化钠溶液,加入到碱液桶(带黄NaOH标签)内,并将桶盖拧紧。(建议用35%浓度,溶液在室温变化后不易结晶,也不易堵塞管路)
c.根据实验需要配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂溶液。
d.配制2%的硼酸溶液,然后按100:1的比例加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂,混合均匀,加入到硼酸桶(带红H3BO3标签)内,并将瓶盖拧紧。
2.各参数设定说明
2.1 液晶屏操作说明:
①语言选择:打开电源,待页面进入到如图1所示时按下“功能”键,可进行中、英文切换,选好语言后按下“确定”键。(图1停留时间比较短,注意要快,否则只有重新开机选择。)
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②工作模式选择:当语言选择结束后,系统会自动加水。液晶屏内显示“加水…请等待”。通过仪器的左侧加热杯水位观测口可以看见水位高度(需要漫过加热丝)。加水结束后,若要用手动工作模式则直接按“加酸”、“加碱”或“蒸馏”键;若选用自动模式则按“确定”键即可。
③时间调整:按下“功能”键,要对加酸时间进行调整则按“加酸”键,按下“增加”键可增加加酸时间,按下“减少”键可减少加酸
时间。然后按“确定”键。加碱、蒸馏时间调整方法同上。所有时间设定好后再按“确定”键,设定完成。
2.2计算泵流量值(此项内容在自动模式时需要操作):
工作目的:确定单位时间内泵的流量,从而可以根据所需时间来确定所需要的酸或碱的量。具体操作:首先将蒸馏水进口和酸进口、碱进口都接上橡胶管,将它们的另一端管口全部插入蒸馏水液面下。然后打开电源开关,仪器进入加水状态,此时蒸馏水自动加入加热杯中,待加水完毕后,。接着锥形瓶托盘上放上空的锥形瓶,在消化管托盘上放上空的消化炉。然后按“加酸”键,待锥形瓶内的加酸玻璃嘴有液体流出来,而且流量稳定后,再按“取消”键,此时酸泵停止加酸,取下锥形瓶倒掉液体。 (主目的是:通下管路,防止管路中存在空气导致计算不准。)接着重新放上锥形瓶,继续按“加酸”键,待一段时间后再次按“加酸”键,停止加酸后观察显示屏上的加酸时间,然后取下锥形瓶用量筒量出数值,从而可以计算出酸泵的流量(每秒钟酸泵流量)。碱泵流量测试方法和酸泵的方法相同。
测量出泵的流量以后,在自动工作模式时,只要根据时间和流量间的换算,输入所需时间即可 (根据实验需要量而定)。设定加酸、加碱时间单位都为秒。(一般碱量是消化时硫酸量2倍以上,硼酸50m1左右,具体根据实际情况而定。)蒸馏时间一般设定在5-15分钟。时间设定好后,按下“确定”键,系统自动保存当前的参数。
3.蒸馏操作过程
3.1 准备工作:
用配件中的橡胶管根据实际需要剪成不同的长短,按照上面介绍的左侧示意图连接好橡胶管(注意接紧,防止漏水,特别是几个进口)。橡胶管的另一端必须浸泡在所对应的液面以下。在消化管托盘放上空的消化管,锥形瓶托盘上放上空的锥形瓶。
3.2 通气检查:
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⑴.打开水龙头开关(冷却水),注意流量,一般在2-3L/分钟。接上电源线,打开电源总开关。显示屏先出现公司名称,然后是语言选择(默认为中文状态,可以按“功能”键进行切换)。接着仪器开始自动加水,从侧面烧杯水位观测口可以看见烧杯内的水位在上升,一段时间后会自动停止加水(由系统内水位探针自动控制,此时的水位高低对仪器没有影响)。加水完成后在显示屏上出现模式选择状
态⑵.然后根据上面介绍的泵的流量确定方法,先确定泵的流量(此时可以用蒸馏水代替酸和碱来确定泵的流量。待数值确定以后,再把相对应的橡胶管放进酸液和碱液中)。确定好后然后再按照实际需要的计算加酸、加碱和蒸馏的时间。接着按照上面介绍的显示屏操作方法设置各项内容的时间。
⑶.接着按“加酸”键,待10秒钟左右再按“取消”键,倒掉锥形瓶内液体。同样方法按“加碱”键,待10秒钟左右再按“取消”键,倒掉消化管内液体。放回锥形瓶和消化管。然后直接选择“蒸馏”键,待消化管中的硬四氟管内有气泡从中喷出起继续蒸馏大概5分钟左
右,先按“取消”键,然后直接关闭电源。整机通气通水完毕。3.3样品蒸馏:水费怎么交
在消化管托盘上换上已消化冷却好的样品,锥形瓶托盘上换上250ml 锥形瓶,调整托盘高度并使氨气回流玻璃嘴口靠近杯底。
重新打开电源,待显示屏界面到图2状态时,直接按“确定”键。即可对样品进行蒸馏。(蒸馏过程中锥形瓶可以按照溶液量的多少调节托盘高度,使保证氨气回流玻璃嘴浸在液面下,同时加酸玻璃嘴不能喷到液面。)如果是选择手动模式,则可以直接按“加酸”、“加碱”和“蒸馏”进行操作。
蒸馏完毕后,将容量瓶下移,使氨气回流玻璃嘴离开液面,用蒸馏水冲洗玻璃嘴外壁,继续按“蒸馏”键蒸馏半分钟后,取下锥形瓶待滴定用。第二个样品同上方法。
注意:更换样品蒸馏时不需关闭电源,第一个样品测试的时候,蒸馏时间可以稍微延长。
4.滴定(以下数据仅供参考,以本行业标准为主)
用0.05mol/LHCL滴定接收瓶内的溶液,滴定至(暗)灰时为止,记下消耗HCL的毫升数,按下列式子计算蛋白含量:
蛋白质%=
式中:X—样品中蛋白质的含量,%
V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度;
0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;
m—样品的质量(体积),g(ml);
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F—蛋白质系数,按16%计算乘以6.25即为蛋白质。
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(空白测定:用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定)
5.关机
先换上空的消化管和锥形瓶,把连碱进口的橡胶管另一端放入蒸馏水容器内,用手动模式按“加碱”键,用蒸馏水清洗碱泵,一般15秒钟左右。酸泵同样方法用蒸馏水清洗。
然后关闭冷却水(自来水龙头),拔掉酸进口,碱进口,蒸馏水进口,冷却水进口及出口的橡胶管,剩下蒸馏水出口橡胶管,打开蒸馏水排水开关,排完蒸馏水。再次按“加酸”键和“加碱”键,排完管内的剩余液体(需要用空的消化管和锥形瓶接收剩余液体)。最后关闭总电源,拔掉电源线。