尖锐湿疣组织中ＶＥＧＦ、Ｆｌｔ一１水平
检测及意义
姚亚琼，尹光文‘。张恒坡，金芳草，靳彬
（郑州大学第一附属医院，郑州４５００５２）
摘要：目的探讨血管内皮生长因子（ｒＥｅＦ）和ｆｉｎｓ样酪氨酸激酶（ｎｔ－１）在尖锐湿疣（ＣＡ）发生、发展中的作用。方法采用免疫组化ＳＰ法检测４０例ＣＡ组织（观察组）和２０例正常上皮组织（对照组）中ＶＥＧＦ和Ｆｉｔ－１表达情况，并分析两者的相关性。结果观察组与对照组ＶＥＧＦ阳性表达率分别为１００，００％（４０／４０）、１００．００％（２０／２０），Ｆｉｔ．Ｉ阳性表达率分别为１００．ｏｏ％（４０／４０）、１００．００％（２０／２０），两两比较Ｐ均＞０．０５。其中观察组ＶＥＧＦ表达（＋）４例，（＋＋）１６例，（＋＋＋）２０例，强阳性表达率为５０％；对照组分别为６、１２、２例和１０％，两组强阳性表达率比较Ｐ＜０．０５。观察组Ｆｉｔ．１表达（＋）０例，（＋＋）９例，（＋＋＋）３１例，强阳性表达率为６０．９％；对照组分别为３、１２、５例和２５％，两组强阳性表达率比较Ｐ＜Ｏ，０５。结论ＶＥＧＦ和Ｆｋ－Ｉ参与了ＣＡ的发病过程，并可能在促进ＣＡ血管生成及发生、发展中发挥重要作用。
关键词：尖锐湿疣；血管内皮生长因子；ｆｒａｓ样酪氨酸激酶；血管生成
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中图分类号：Ｒ７５２．５３文献标志码：Ａ文章编号：１００２－２６６Ｘ（２００９）５１－００１６－０３
ＤｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ一１ＩｅｖｅＩ．ｎｌｅｓｉｏｎｓｏｆｃｏｎｄｙｌｏｍａａｃｕｍｉｎａｔｕｍ
ＹＡＯＹａ—ｑｉｏｎｇ。ＹｌＮＧｕａｎｇ－ｌｏｅｎ．ＺＨＡＮＧＨｅｎｇ－ｐｏ。ＪｌＮＦ８ｎｇ—ｃａｏ，Ｊ１ＮＢｉｎ
（‰ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ
Ｕｎｉｖｅｒｓ渺，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００５２，Ｐ．尼Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ－１ｉｎｔｈｅｏｅｃｌｌｌＴｅｎｏｅａｎｄｄ钾ｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｃｏｎｄｙｌｏｍａａｃｕｍｉ－ｎａｔｕｍ（ＣＡ）．ＭｅｔｈｏｄｓＳＰｉｍｍｕｎｏｈｌｓｔｏｃｈｅｍｌｓｔｒｙｍｅｔｈｏｄ硼ｓｕｓｅｄｔｏｍｅ￥匮ｔｌｒｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ．１ｉｎ４０ｃａ．Ｂｅ８ｏｆＣＡ（ｏｂｓｅｒｖｅｄｇｒｏｕｐ）ａｎｄ２０ｎｏｒｍ
ａｌｓｋｉｎｃｏｎｔｒｏｌｓ（ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ），ａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｉｎｄｅｘｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌｍＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ－１ｉｎｔｈｅｏｂｓｅｒｖｅｄｇｒｏｕｐ
ａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｂｏｔｈ１００．ＯＯ％．Ｎｏｓｉｇｎ击ｅａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅＷａｇｆｏｕｎｄｉｎｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅ
ｍｔ瞄ｏｆＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ－１ｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．ＩｎｏｂｓｅｒｖｅｄｇｒｏｕｐｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＥＧＦ
ｗｅｒｅ（＋）４ｃａｓ∞，（＋＋）１６ｃａ８ｅ８，（＋＋＋）２０ｃ坦ｔｓｅ８，ａｎｄｓｔｒｏｎｇｐｏｓｉｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅＷ８８５０％．Ｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅ６，１２，２∞８档ａｎｄ１０％．ＳｔｒｏｎｇｐｏｓｉｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅｏｆＶＥＧＦｉｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ惴ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔ（Ｐ＜０．０５）．Ｉｎｏｂｓｅｒｖｅｄｇｒｏｕｐｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｔ一１ｗｅｒｅ（＋）０ｃａｓｅｓ，（４－＋）９ｃａ８船，（＋＋＋）３１伽ｓ∞。ａｎｄｓｔｒｏｎｇｐｏｓｉｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅｗ鲢６０．９％，Ｔｈｅｃｏｎｔ
ｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅ３，１２，５ｃａ８∞ａｎｄ２５％．Ｓｔｒｏｎｇｐｏｓｉ－ｆｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅｏｆＦｉｔ－１ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）．ＣｏｎｄｕｓｉｏｎＶＥＧＦａｎｄＦｉｔ－１ｔａｋｅｐａｒｔｉｎｔｈｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＣＡ。ａｎｄｐｌａｙ觚ｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＣＡ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｎｄｙｌｏｍａａｃｕｍｉｎａｔｕｍ；ｖａｓｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ；ｈｎｓ—ｌｉｋｅｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ；ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ
血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是目前所知作用最强、特异性最高的促血管生成因子，主要通过作用于血管内皮细胞的特异性受体而促进新生血管的形成。ｆｍｓ样酪氨酸激酶（Ｆｉｔ－１）是ＶＥＧＦ受体家族中酪氨酸激酶受体的一个成员，与ＶＥＧＦ结合并激活后可调节内皮细胞间及内皮细胞与基底膜间的相互作用，促进管腔形成。尖锐湿疣（ＣＡ）临床上增生快、易复发，与ＣＡ组织中ＶＥＧＦ和Ｆｈ－１表达异常及
基金项目：河南省科技创新杰出青年基金项目（０９４１００５１０００８）；河南省重点科技公关项目（０８２１０２３１０００９）。
’通讯作者
１６新生血管形成可能密切相关。近年来，我们采用免疫组化ＳＰ法检测了ＶＥＧＦ和ｎｔ—ｌ在ＣＡ组织中的表达，旨在进一步探讨ＣＡ的发生机制。
１材料与方法
１．１材料选择我院皮肤性病科手术切除的ＣＡ标本４０例（观察组），所有患者均经病理确诊，经原位杂交证实为ＨＰＶ感染。其中男２４例，女１６例；年龄１８－５８岁，平均２９，７５岁；病程２ｌ～１１０ｄ，平均５８．９ｄ。所有病例取材前均未接受任何免疫，且无其他系统疾病。另取２０例外科手术切除的正常成年男性包皮组织作为对照组。两组一般资料
万方数据
具有可比性。即用型兔抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体和Ｆｉｔ．１多克隆抗体、通用型ＳＰ检测试剂盒、ＤＡＢ酶底物显剂均购于福建迈新生物工程有限公司。
１．２ＶＥＧＦ和ｎｔ．１表达检测所有标本取材后均经４％多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋，连续切片４岬后置于多聚赖氨酸处理过的玻片上，６０℃烤箱烤片４ｈ以上，备用。采用免疫组化ＳＰ法。操作步骤按过氧化物酶标记的链霉亲和素（ＳＰ）染试剂盒所示进行。所有切片染条件相同，每批染均设阴性对照和阳性对照。以ＰＢＳ代替一抗作阴性对照，用已知染阳性的组织切片作阳性
对照。结果判定：ＶＥＧＦ以胞质出现黄、棕黄颗粒为阳性细胞。Ｆｉｔ．１阳性显多为棕黄颗粒，主要为胞质着，部分胞膜轻度染。参照文献…评分方法，根据阳性细胞占总细胞数百分比和着强度进行半定量分级评分。阳性细胞百分数≤１０％为Ｏ分，ｌｌ％一２５％为１分，２６％一５０％为２分，５ｌ％一７５％为３’分，ｔ＞７６％为４分。着强度：不着为０分，浅黄为１分，黄为２分，棕黄为３分。上述两项分值乘积为最后得分：Ｏ分为阴性（一），１—４分为弱阳性（＋），６—８分为阳性（＋＋），９一１２分为强阳性（＋＋＋）。
１．３统计学方法采用ＳＰＳＳ１１．０统计软件，阳性率的比较采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ符号秩和检验，两指标间的相关性用Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关分析法。检验水准仅＝０．０５。
２结果
２．１ＶＥＧＦ和ｎｔ．１表达观察组与对照组ＶＥＧＦ阳性表达率分别为１００．００％（４０／４０）、１００．００％（２０／２０），Ｆｉｔ．１阳性表达率分别为１００．００％（４０／４０）、１００．００％（２０／２０），两两比较Ｐ均＞０．０５。其中观察组ＶＥＧＦ表达（＋）４例，（＋＋）１６例，（＋＋＋）２０例，强阳性表达率为５０％；对照组分别为６、１２、２例和１０％，两组强阳性表达率比较Ｐ＜０．０５。观察组ｎｔ一１表达（＋）０例，（＋＋）９例，（＋＋＋）３ｌ例，强阳性表达率为６０．９％；对照组分别为３、１２、５例和２５％，两组强阳
性表达率比较Ｐ＜０．０５。２．２ＣＡ组织中ＶＥＧＦ、Ｆｉｔ．１表达的相关性经Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关分析发现，４０例ＣＡ组织中ＶＥＧＦ与Ｆｌｔ．１表达呈正相关（ｒ＝０．４１５，Ｐ＜０．０５）。３讨论
ＶＥＧＦ又称血管渗透性因子，由两条亚基间及其亚基内二硫键连接而形成同源性二聚体糖蛋白化合物，基因全长１４ｋｂ，相对分子质量３４—４５ｋＤ，定位于染体６ｐ１２上。研究表明，ＶＥＧＦ是促血管生成的关键性调控因子，是血管内皮细胞特异的有丝分裂原，可直接作用于血管内皮细胞，促进内皮细胞有丝分裂，诱导内皮细胞增殖、迁移，并可增加血管通透性，改变细胞外基质，降解基膜，促进新生血管形成心】。ＶＥＧＦ的表达受多种因素调节，其中缺氧是主要刺激因素。缺氧诱导因子一１（ＨＩＦ一１）是缺氧状态下促血管生成的核心调控因子，不仅可促进ＶＥＧＦ基因转录，还可增加ＶＥＧＦｍＲＮＡ稳定性，增强ＶＥＧＦ生物学效应ＨＪ。研究证实，ＶＥＧＦ的促血管生成作用主要通过与其特异性受体结合而实现。ＶＥＧＦ与受体有高度的亲和性，二者结合后受体构象发生改变，产生二聚体化，其胞内段酪氨酸位点发生自磷酸化，继而激活下游信号传导通路发挥其生物学作用。
今年重阳节Ｆｉｔ－ｌ是最早发现的ＶＥＧＦ受体，相对分子质量１５０ｋＤ，基因定位于５号染体的ｑ３３一ｑｔｅｒ，表达于机体的多种组织细胞中。ｎｔ—ｌ的生物学功能尚有争议，有学者认为在不同的生理病理条件下其功能有所不同：胚胎时期主要抑制血管形成，但在成人时期则有促血管生成作用【kara韩胜妍
４Ｊ。研究发现，Ｆｉｔ一１可诱导内皮细胞的分化、迁移，但无促进内皮细胞分裂增殖作用瞪Ｊ，与其介导的信号传导中缺乏分裂原活化蛋白激酶相关途径有关。Ｌｉｎ等∞’发现，ｎｔ—ｌ激活后可通过调节内皮细胞之间以及内皮细胞与基底膜间的相互作用而促进管腔形成。研究表明，Ｆｉｔ—ｌ表达同样受到ＨＩＦ—ｌ的调控，ＨＩＦ－ｌ除可上调ＶＥＧＦ表达外，还可促进ｎｔ—ｌ的转录，ｎｔ一１大量表达，又可加强ＶＥＧＦ的生物学功能一ｊ。此外，有研究显示，ｎｔ—ｌ的表达还受到ＶＥＧＦ的调节，ｎｔ—ｌ的量随ＶＥＧＦ浓度的增大而增加¨Ｊ。
本研究发现，观察组ＶＥＧＦ和ｎｔ一１的阳性表达率与对照组比较无统计学差异，表明二者在体内分布及作用广泛，参与了机体的多种生理病理过程；但ＣＡ组织中ＶＥＧＦ和Ｆｉｔ．１的表达强度明显高于对照组，推测ＣＡ组织生长迅速，局部存在相对缺氧环境，大量ＨＩＦ—ｌ产生，上调ＶＥＧＦ和Ｆｉｔ－１表达，诱导ＣＡ新生血管形成，继而促进ＣＡ组织生成。本研究还发现，ＣＡ组织中ＶＥＧＦ和Ｆｉｔ一１表达呈正相关，提示ＶＥＧＦ通过与Ｆｉｔ．１结合在ＣＡ新生血管形成中起协同作用，促进ＣＡ发生、发展。
综上所述，ＶＥＧＦ和Ｆｉｔ一１在ＣＡ组织生成过程中可能发挥重要作用，且两者存在协同性。探索恰当的手段，抑制ＶＥＧＦ及其受体的表达，阻断其介导的信号转导路径，可能对ＣＡ的及预防复发有重要意义。
１７
车晓整容
万方数据
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ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ
ａｎｄｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓａｆｔｅｒＶＥＧＦａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｉｎｆｅｔａｌｒａｔＣＮＳｅｘｐｌａｎｔｓ［Ｊｊ．ＪＣｅｒｅｂｒａｌＢｌｏｏｄＨｏｗ＆Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ。
２００３，２３（１２）：１４２０－１４２９．
（收稿日期：２００９－０９－１７）
小儿先天性后外侧膈疝２４例体会
钱程，陈宏坤
（枣庄市立医院，山东枣庄２７７１０２）
ｄ，ＪＬ先天性后外侧膈疝（ＣＤＨ）是一种临床少见疾病，又称Ｂｏｃｈｄａｌｅ孔疝。１９９５—２００７年，我们共收治２４例ＣＤＨ患儿，现分析其情况。
临床资料：ＣＤＨ患儿２４例（新生儿１５例），男１０例，女１４例；年龄３ｄ一２岁，中位年龄１岁；左侧２０例，右侧４例。临床表现：新生儿期表现为呼吸窘迫，青紫；婴幼儿期表现为呼吸道感染和呕吐。查体：腹平软，重者呈舟状腹。听诊：患侧胸腔呼吸音低，心尖搏动向健侧移位。ｘ线及ＣＴ片可见患侧胸腔肠襻充气影，肺压缩，横膈消失或上移，心脏纵膈向对侧移位。
方法：明确诊断后均于２４ｈ内手术。禁饮食、持续胃肠减压，鼻导管吸氧，备成分血（浓缩红细胞或血浆）。右侧４例行经胸腔脏器还纳，横膈褥式折叠缝合，置引流管。左侧２０例中，１８例行经腹切口（肋缘下），将肠管、胃或脾轻柔复位后，检查肺舒缩功能良好，切除疝囊并修补，缺损处７号线褥式加间断双重缝合修补，结扎最后一针前，由麻醉师膨胀肺部，从预置的硅胶管排出胸腔内气体后再拔管；２例因疝人肠管较多，疝环紧，复位困难，行胸腹联合切口（左第６肋间切口加左上腹横切口），依次还纳后。于胸腔内褥式折叠缝合膈肌。置胸腔引流管。其中５例合并有先天性肠旋转不良，加做Ｌａｄｄ’８手术；３例新生儿还纳脏器后，腹部膨隆，切口予单纯缝合，术后ｌ周行二期缝合。
结果：本组２２例术后经Ｘ线片检查示肺膨胀良好，无呕吐，排便正常，均治愈出院。余２例因死亡，均为新生儿。随访１５例，均发育良好，ｘ线片元异常。
妩媚意思al rocco１８
讨论：根据患儿的症状体征并结合ｘ线片，本病不难确诊。确诊后应行手术。术前准备不提倡行钡餐造影检查，为明确患侧肺压缩情况及疝环最大径，可行胸部ＣＴ检查。
在手术入路的选择上，右侧疝宜用经胸切口，左侧疝采用经腹切口，复位困难者宜采用胸腹联合切口。ｃＴ片显示疝环最大径新生儿期＜３ｃｍ、婴幼儿期＜５ｃｍ宜采用胸腹联合切口。术中应注意
还纳时切忌过分牵拉，如复位困难可适当剪开膈肌；复位后应仔细检查肠管、胃、脾有无撕裂、血肿或活动性出血等情况。经胸手术应在观察肺叶膨胀良好后行胸腔闭式引流术。相比较而言，经腹手术术后恢复快，但膈肌修补因腹内脏器的阻挡而相对困难；经胸手术创伤大，术后应注意肺部并发症的处理，必要时入ＩＣＵ。对于皮肤行单纯缝合的新生儿应禁饮食，应用抗生素及静脉营养，待术后Ｉ周一般情况改善后行刀口二期缝合术。对于经胸手术，且术中见肺压缩重、肺发育不良者，术后应人ＩＣＵ予气管插管，机械辅助呼吸，一般采用同步间歇指令通气，但考虑到肺压缩，各项指标宜用低限：氧浓度为０．４，潮气量为１５ｍｌ／ｋｇ，呼吸为２０一２５次／ｎｆｉｎ，气道峰值压力为２０ｃｍＪ｛２０。行血气分析并根据结果作调整，Ｐａ０２为８０一１００ｍｍＨｇ，Ｐｃ０２为３０—３５ｍｍＨｇ，ｐＨ为７．３５—７．４５，碱剩余（ＢＥ）：４－２．５ｍｍｏｌ／Ｌ。对躁动或呼吸机与自主呼吸不同步者可给予镇静剂，一般术后２４ｈ即可拔管。
（收稿日期：２００９－０９－２２）
万方数据