第 49 卷第 12 期2021 年 6 月
广州化工
Guangzhou Chemical Industry Vol. 49 No. 12Jun. 2021
*基金项目：2019年大学生创新创业项目(201910162047)。
第一作者：杨宇(1999-)，女，本科学生，制药专业。
通讯作者：陈晓霞(1980-)，女，博士，副教授，主要从事药物分析工作。
杨 宇，宋孟霜，陈 婕，王姝萱，刘 畅，李欣然，陈晓霞
李菲儿公布baby短信截图(辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600)
摘 要：采用紫外-可见分光光度法对不同浓度白鲜皮水提物及醇提物抑制酪氨酸酶活性进行研究，结果显示白鲜皮醇提物
与水提物相比，具有更强的抑制酪氨酸酶活性的作用，且存在剂量依赖性。当含生药浓度达到16mg/mL 时，其抑制率可到到 76%o 以白鲜皮醇提物为主要美白成分，制备了外观显透明，呈弱酸性，清凉无刺激感，粘稠度适中，易于贴敷的美白面膜, 期望进行更进一步的开发，实现规模化生产。
关键词：白鲜皮；酪氨酸酶；抑制；美白面膜
中图分类号：TQ685. 2
文献标志码：B 文章编号：1001-9677(2021)012-0088-03
Study on Inhibitation of Cortex Dictam on Tyrosinase and
Whitening Mask Preparing *
YANG Yu , SONG Meng -shuang , CHEN Jie , WANG Shu -xuan , LIU Chang , LI Xin -ran , CHEN Xiao -xia (College of Pharmacy , Liaoning University of Traditional Chinese Medicine , Liaoning Dalian 116600 , China)
Abstract : Inhibitation of different concentrations of water extract and alcohol extract from cortex dictam ontyrosinase
activity was detected with UV-Vis spectrophotometry , results showed that alcohol extract from cortex dictam had stronger inhibitory effect on tyrosinase activity than water extract , and there was a dose-dependent. When the concentration of raw drug reached 16 mg/mL, its inhibition rate can reach 76%. The whitening maskwas prepared with alcohol extract form cortex dictam as the main whitening ingredient. It showed transparent color , weak acid , cool no irritation , moderate viscosity , easy to apply.
Key words : cortex dictam ； tyrosinase ； inhibitation ； whitening mask
随着人民生活水平的提高，越来越多的女性朋友关注皮肤 保养。面膜作为女性朋友必备的基础护肤品市场应用前景广 阔，尤其是美白面膜。纯中药面膜因其药效显著、作用温和、 副作用小等优点，赢得了广大女性消费者的青睐[l]o 然而市场 上中药美白面膜种类并不多，有待开发。白鲜皮为芸香科白鲜 属植物白鲜的干燥根皮，味苦，性寒，具有清热解毒、祛风止 痒等功效[2]o 其药理作用包括抗菌、抗炎、抗过敏、止血、杀 虫、抗肿瘤以及神经保护[3]o 其主要化学成分有黄酮类、柠檬 苦素类、生物碱类等[4]o 《本草纲目》记载白鲜皮具有润肤白 面功效，《备急千金药方》记载白鲜皮可治黑面不净。酪氨酸 酶能催化左旋多巴生成酪氨酸，进一步催化酪氨酸生成黑素 的作用[5]，现代研究中也发现高浓度白鲜皮石油醚提取物具有 抑制酪氨酸酶作用[6]，表明白鲜皮具有美白功效。本实验对不 同浓度的白鲜皮水提物及醇提物抑制酪氨酸酶作用进行研究, 并且制备了美白功效好，无不良反应的纯中药美白
面膜。
1实验新一线城市排名
1.1材料和设备
白鲜皮(产地辽宁)购自毫州市中药材市场，经辽宁中医药 大学鉴定教研室王添敏教授鉴定为芸香科白鲜属多年生草本植 物白鲜的根皮。酪氨酸酶，Sigma 公司；L-酪氨酸，Sigma 公 司；磷酸二氢钾；氢氧化钠；磷酸；磷酸氢二钠；浓盐酸；赛 比克；卡波姆；冰片；维生素E ；二甲基硅油均为市售分析 纯，购与大连辰玉试剂公司。
T500型电子天平，常熟市双杰测试仪器厂；SHZ-D(m)循 环水式真空泵，巩义市予华仪器责任有限公司；DZKW-S-4电 热恒温水浴锅，苏州江东精密仪器有限公司；RE52旋转蒸发 仪，上海亚荣生化仪器厂；U3010紫外-可见分光光度计，日本 日立公司。
1.2实验方法
1.2. 1白鲜皮提取物的制备
取白鲜皮10. 00 g，精密称定，置250 mL 的锥形瓶中，精 密加水或75%乙醇100 mL，密塞，称定重
量，静置1h 后，连 接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸回流提取1 h，共提 取三次。合并三次提取液后进行真空抽滤，减压浓缩干燥得白 鲜皮水提物及醇提物，水提物以PBS 溶解分别配置成含生药浓
第49卷第12期杨宇，等：白鲜皮抑制酪氨酸酶作用研究及其美白面膜制备89
度为1,2,4,8,16mg/mL溶液；醇提物以适量的DMSO溶解后，以PBS溶解分别配置成含生药浓度为1,2,4,8, 16mg/mL溶液。
1.2.2酪氨酸酶的抑制活性测定⑺
分别配制pH=6.8的PBS（磷酸盐缓冲液）、1.0mg/mL的L-酪氨酸溶液和70pg/mL的酪氨酸酶溶液。按照以下配比加样。
测试样1： 2.0mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液+0.5mL L-酪氨酸溶液；测试样2： 2.5mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液；
测试样3：0.5mL样品溶液+1.5mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液+0.5mL L-酪氨酸溶液；
测试样4：0.5mL样品溶液+2.0mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液。
将各测试样混匀，将每个样品的1〜4种测试样混匀，置37t水浴中30min，立即取出在475nm处测吸光度（A1〜A4）o按下式计算酪氨酸酶抑制率：
（A3—A4）
I=[1-34]x100%
A1-A2
1.2.3美白面膜制备
取赛比克和卡波姆各1g溶于100mL蒸馏水中，制成A 液，另取50mL蒸馏水，加入0.5g冰片、少量维生素E、15g 二甲基硅油和120mg白鲜皮醇提物，搅拌溶解成B，将A和B同时加入烧杯中，并水浴加热20min，温度保持在37t，混匀制得面膜。
1.2.4面膜的性能测定
1.2.4.1pH测定
取5.0g面膜试样放入烧杯中，加入50mL新煮沸防冷的去离子水，边加热边搅拌至37t，冷却到室温后，用酸度计进行测定。本兮微博
1.2.4.2高、低温实验
将面膜试样两份置于密闭容器中，将一份置于-20t的冰箱中，另一份入37t的恒温保温箱中，24h后取出恢复到室温后观察外形。
1.2.4.3黏度的测定
取足量的面膜试样于烧杯中，在25t的恒温状态下，选择合适的转子与转速测定黏度。
1.2.4.4离心力测定
将面膜试样置入试管中，至于离心机中，在3000r/min，离心10min，观察其是否分层。
1.2.4.5感官性能评价
随机选择20名自愿者，男女各10名，先在手背上涂抹面膜制品，大约3到8cm2，待20min后揭下观察皮肤现象，待确定无刺激性反应后将面膜均匀涂抹在脸部三角区，待20min 后揭下观察皮肤现象并对面膜制品进行评价。
2结果与讨论
2.1白鲜皮提取物对络氨酸酶活性抑制作用
以L-酪氨酸为底物，研究不同浓度白鲜皮水提物及醇提物对酪氨酸酶活性抑制作用，结果如图1所示。结果表明白鲜皮水提物及醇提物去对L-酪氨酸的酶促氧化进程均表现出抑制作用，且呈现浓度依赖性抑制。其中各浓度醇提物较水提物对酪氨酸酶的抑制作用更为显著，在实验浓度范围内，16mg/mL 白鲜皮醇提物对酪氨酸酶的抑制率高达76%，因此有望开发成美白产品。
80
40
20
60
—*
*
二
5.0010.0015.00刘湛秋
浓度/(mg/mL)
0.0020.00
图1白鲜皮提取物对酪氨酸酶活性抑制作用Fig.1Inhibition of tyrosinase by water extracts andfrom
various parts of Kapok
2.2美白面膜性能评价结果
本实验制备的美白面膜性能评价指标见表2，可见制备的面膜外观显透明，呈弱酸性，清凉无刺激感，粘稠度适中，易于贴敷。常温下面膜的pH值稳定符合《中华人民共和国轻工行业标准》规定。
表1理化检测指标、感官及稳定性实验结果Table1Results of physicochemical testing indexes,sensory
and stability
检测项目检测结果检测效果外观无油状液体适宜
任嘉伦老婆大闹锦衣剧组粘稠度3000MPa•s适宜
pH 6.2适宜有无刺激性温和无刺激适宜耐热性无浑浊、沉淀、分层现象耐热较强
耐冷性无浑浊、沉淀、分层现象耐寒较强离心力测试没有分层现象无分层现象2.3感官性能评价结果
20名自愿者使用面膜进行后无不适感，并对面膜进行了评分，如表3。
表2面膜成品的感官性能评价表
Table2Sensory performance evaluation Form of Face Mask
项目清爽感贴合度撕扯力度成膜速度
评分III IV IV III
注：评分要求：IV为优、III为良、II为差、I为不合格。
3结论
酪氨酸酶是皮肤黑素生物合成的关键酶⑻，不仅决定黑素合成的速率，还是黑素细胞分化成熟的特征性标志[9]，临床上可以通过抑制酪氨酸酶活性来美白皮肤、雀班、褐斑、黑斑病等黑素过度沉淀的疾病。由实验结果可知，同浓度的白鲜皮醇提取物较水提物对酪氨酸酶抑制率高，且两种
提取物的抑制作用均存在计量依赖性，浓度越高，抑制作用越强。醇提物在浓度为16mg/mL时，其抑制率可高达76%o查阅文献，白鲜皮主要活性成分黄柏酮、梣酮和白鲜碱均在醇提物中，由此白鲜皮抑制酪氨酸酶的主要成分可能是其主要活性成分，有待进一步研究。以白鲜皮醇提物为美白活性成分，制备了pH值符合《中华人民共和国轻工行业标准》规定，外观
（下转第124页）
124广州化工2021年6月
2.2.7样品测定
取3批样品，按“1.3.3”项下供试品溶液制备方法制备
供试品溶液，进样测定，记录峰面积并按外标法计算样品中3
种人参皂苷的含量，3批药材制备的复方参蛭胶囊样品中人参
皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量见表3o
表3三批样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、
人参皂苷Rb1的含量
Table3Content ofGinsenoside Rg〔,ginsenoside Re and
ginsenoside Rb〔in three batches of samples
批次
Rg#Re/Rb〔/
(mg/g)(mg/粒)(mg/g)(mg/粒)(mg/g)(mg/粒)
20200601 1.46790.75 1.26440.64 1.78600.91 20200602 1.45160.74 1.24530.64 1.76280.90 20200603 1.47670.75 1.27780.65 1.80320.92
平均含量 1.46540.75 1.26250.64 1.78400.91
3结论
在人参含量测定的方法学考察试验中，前期采用药典《中国药典》2020版一部人参药材项下含量测定提取方法，发现方中其他成分带来的杂质对人参皂苷Rb1分离的影响较大，因此选择用氨溶液洗涤水
饱和正丁醇提取液，除去部分酸性杂质，人参皂苷Rb1得到较好分离，达到含量测定的要求。同时本研究还考察了人参含量测定谱条件的耐用性，发现温度(25、30、35t)和流速(0.8、1、1.2mL/min)的改变对3种人参皂苷的分离度均无显著影响，因此本研究建立的制剂中人参皂苷Rg-Re和Rb1含量测定方法的耐用性好，可行度高。
本研究前期优选了复方参蛭胶囊的制备工艺，得到胶囊剂成品，以此为基础建立了质量标准，有效的控制药品质量。本研究依据《中国药典》2020版一部药材项下相关方法结合文献方法，建立了鉴别制剂中人参、黄芪、红曲、陈皮的薄层方法，得到的薄层谱图斑点清晰，专属性强，无阴性干扰，能较好的对复方参蛭胶囊制剂进行定性鉴别。本研究依据《中国药典》2020版一部人参药材项下含量测定的方法及相关文献，建立了制剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的HPLC含量测定方法，操作简便，结果准确可靠，可以对复方参蛭胶囊制剂进行有效定量控制。
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(上接第89页)
显透明，清凉无刺激感，粘稠度适中，易于贴敷，受到受试者好评的美白面膜，渴望开发成产品，创造更大的经济空间。
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