微生物限度检查标准操作规程
1.目的：建立一个微生物限度检验标准操作规程。洗葡萄的方法>文儿
2.范围：本公司的药品、原辅料、器具设备、工艺流程、生产环境和操作人员。
3.职责：微生物限度检验人员对实施本程序负责。
4.规程：
4.1取样：按各《取样标准操作程序》，应随机抽取不少于检验用量（两个以上最少包装单位）的3倍量供试品。每份供试品最低应取2个以上最少包装单位，膜剂不得少于4片。
4.2 培养基的制备：按“培养基制备标准操作规程”。
刘嘉玲被绑4.3 稀释剂的制备：称取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液14.63g，置1000ml三角瓶中，加纯化水1000ml，摇匀，加热溶解,于121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。
4.4检验量：除另有规定外，每份供试品最低应取2个以上最小包装单位，  膜剂不得少于4片。
一般供试品的检验量为10g或10ml；中药膜剂为100cm2。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照试验）。
4.5 试验前的准备：
4.5.1将所有已灭菌的平皿，三角瓶、吸管、量杯、研钵、稀释剂及供试品等移至无菌室的传递窗内，打开紫外灯消毒15min，风淋10s。
4.5.2开启无菌室紫外线灭菌灯20分钟。
4.5.3关闭紫外线灭菌灯，进入缓冲一室，用肥皂洗手，换工作鞋，除外衣；进入缓冲二室，穿戴无菌衣、帽、口罩，用消毒剂消毒双手，戴上手套，进入操作间。电视机没有声音
4.5.4开启工作台，用乙醇棉球擦手及供试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌剪刀将供试品启封。
4.6操作:
4.6.1供试液的制备:
4.6.1.1固体、半固体或黏稠性供试品: 取供试品10g,置灭菌研钵中,以100ml稀释剂分次加入研磨,混匀使成1:10供试液。 
4.6.1.2液体供试品：取供试品10ml，置灭菌锥形瓶中，加入90ml稀释剂，充分摇匀，即为1:10供试液，也可取原液作为供试液。
4.6.1.3胶囊剂和空心胶囊供试品：取供试品10g，分离囊帽与囊身，同置灭菌锥形瓶中，加100ml稀释剂。振摇使溶，直至内容物完全分散或溶解，即为1:10供试液。
4.6.1.4口服固体药用高密度聚乙烯瓶：取供试品数只，加入1/2标示容量的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将盖盖紧，振摇1分钟，即得供试液。用无菌吸管吸取供试液1ml，加入9ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，即为1:10供试液。
4.6.1.5  药用PVC硬片和铝箔：取供试品用开孔面积为20cm²的无菌的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稍沾湿，在板孔范围内擦抹5次，换1支棉签再擦抹5次，每个位置用2支棉签共擦抹10次，共擦抹5个位置100cm²。每支棉签抹完后立即剪断，投入盛有30ml pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的三角瓶中。全部擦抹棉签投
入瓶中后，将瓶迅速摇晃1分钟，静置10分钟，即得供试液。用无菌吸管吸取供试液1ml，加入9ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，即为1:10供试液。
4.6.1.6需用特殊方法制备供试液的供试品：
4.6.1.6.1油脂类供试品：取供试品，加入无菌十四烷酸异丙酯使溶解，或与少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无抑菌性表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃（特殊情况下，最多不超过45℃），小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成1:10供试液，保温，混合，并在最短时间内形成乳状液。必要时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。
4.6.1.6.2膜剂供试品：取供试品10cm2,，剪碎，加稀释液100ml，浸泡，振摇，作为1:10的供试液；必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。
4.6.1.6.3具抑菌活性的供试品：当供试品有抑菌活性时，采用下列方法进行处理，以消除供试液的抑菌活性，再依法检查。
（1）增加稀释液或培养基体积。
（2)加入适宜的中和剂或灭火剂。
(3)薄膜过滤法（见本文4.8)。
4.6.2 供试品的稀释
用无菌吸管吸取1：10供试液1ml，加入9ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀。即为1:102供试液。
用无菌吸管吸取1:102法人授权委托书范本供试液1ml，加入9ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀。即为1:103供试液。
4.7供试品需氧菌、酵母菌和霉菌的检查：包括平皿法和薄膜过滤法，除纯化水、口服固体药用高密度聚乙烯瓶和药用PVC硬片和铝箔用薄膜过滤法外，其他一般都用平皿法。检查时，按已验证的计数方法进行供试品的需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数的测定（验证方法见附录1）。
4.7.1需氧菌总数的检验：
    用无菌吸管吸取各稀释级的供试液1ml，置于直径90mm的无菌平皿中，加入15~20ml温度不超过45℃已融化的胰酪大豆胨琼脂培养基，轻轻摇动混合均匀，凝固，倒置培养皿，放在生化培养箱中，30~35℃培养72~120h。各稀释级的培养基至少制备2个平板。
4.7.2霉菌和酵母菌总数的检验：
  用无菌吸管吸取各稀释级的供试液1ml，置于直径90mm的无菌平皿中，加入15~20ml温度不超过45℃已融化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，轻轻摇动混合均匀，凝固，倒置培养皿，放在霉菌培养箱中，20~25℃培养72~120h。各稀释级的培养基至少制备2个平板。
4.7.3阴性对照试验：取试验用的稀释液1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。每种计数用培养基至少制备2个平板
注：①一般情况下，固体供试品需氧菌总数检查需做101、102、103三个稀释级，液体供试品和液体塑料瓶只需做101、102两个稀释级。霉菌和酵母菌总数检查需做101、102两个稀释级。
②胰酪大豆胨琼脂培养基用于测定需氧菌总数；沙氏葡萄糖琼脂培养基用于测定霉菌和酵母菌总数；若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。
创建apple id4.7.4计数：
  除另有规定外，需氧菌培养3天，霉菌及酵母菌培养5天，逐日观察菌落生长情况；点计平板上生长的所有菌落数，计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级2个平板的菌落平均数不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。