i mv ic与硫化氢试验实验结果报告的结果
一、买验目的
了解IMVIC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。
吉他指法二、实验原理
IMVIC是I--吲哚(INDOL test)、M一甲基红(methyl red test)、V-伏普(VOGES -PROLAUERTEST)和C-柠檬酸盐(CITRA TE test)4个实验的缩写。这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一定指标，则表示水质受粪便污染。产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将两者分开。硫化氢(H2S)实验也是检查肠道细菌的生化实验。
(一)吲哚试验(INDOL test)
吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的氨酸生成吲哚(靛基质)，经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红。氨酸+H2O氨酸酶、吲哚+NH3+丙酮酸、哚+对二甲基氨基苯甲醛、玫瑰吲哚(红)。
吲只有部分细菌能产生氨酸酶，从而具有分解氨酸产生吲哚的能力，因此吲哚实验可以作为一个生化检测指标。大肠杆菌产氨酸酶实验结果为阳性(红)，产气肠杆菌不产氨酸酶实验结果为阴性(无)。
北京t3
(二)M-甲基红试验(methyl red test)
用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。细菌代谢糖产生酸使培养基变酸(pH下降)，使甲基红指示剂变：橘黄(pH6.3L_红(pH4.2)，尽管，所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸，但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别：两者在培养早期产生有机酸，但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4，而产气肠杆菌则将有机酸转化为非酸性产物，使pH上升至6左右。因此，大肠杆菌为阳性(红)，产气肠杆菌阴性(黄)。
(三)伏一普实验(VOGE SPROL AUES test)
测定细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物(如丙酮酸)的能力。丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基醇，此化合物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋白胨中的精氨酸的胍基作用，生成红化合物，及伏-普反应阳性，不产生红化合物者为反应阴性。碱性条件、加入少量含胍基的化合物可使反应更明显。
刘德华 杨丽娟大肠杆菌不产丙酮酸实验结果为阴性(无)，产气肠杆菌产丙酮酸实验结果为阳性(红)。
葡萄糖+丙酮酸-CO2缩合乙酰乳酸-CO2脱羧乙酰甲基甲醇+OH-2H胍基+二乙>红化合物
(四)柠檬酸盐试验(CITRA TE test)用来检测柠檬酸盐是否被利用，有些细菌以柠檬酸钠为碳源，培养基中的柠檬酸和磷酸铵被分解后，产生碱性化合物，使pH升高，当加入1%溴麝香草酚蓝指示剂时，培养基就会有绿转变为深蓝，溴麝香草酚蓝指示范围：pH<6黄，pH6-7绿，pH>7蓝。大肠杆菌不能利用柠檬酸盐实验结果为阴性(绿)，产气肠杆菌能利用柠檬酸盐实验结果为阳性(蓝)。
(五)硫化氢实验
用来检测硫化氢的产生，也是用于肠道细菌检查的常用生化实验。含硫有机物(如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸)能被部分细菌分解产生H2S，H2S和培养基中的铅盐或铁盐反应，形成黑的硫化铅或硫化铁沉淀。大肠杆菌不能分解含硫有机物实验结果为阴性(无沉淀)，产气肠杆菌能分解含硫有机物实验结果为阳性(黑沉淀)。
来龙去脉造句
三、实验器材：
1、菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌斜面各一支。
2、培养基：蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、柠檬酸盐培养基、硝酸盐还原培养基、醋酸铅培养基
3、溶液和试剂：甲基红指示剂，40%KOH，5%-蔡酚溶液，乙醚，吲哚试剂。
4、仪器或其他用具：试管架，接种环等。
四、操作步骤
电子表格的使用（一）实验准备。唐嫣exo
1.葡萄糖蛋白胨水培养基配制：蛋白胨3g，葡萄糖3g，磷酸氢二钾1.2g，水600ml，溶解，调节Ph7.，0-7.2，分装于70支试管中，112C灭菌30min。
2.柠檬酸盐培养基配制：NH4H2PO40.2g，K2HPO40.2g，NACLLG，MgSO440mg，柠檬酸钠0.4g，琼脂4g，调节pH6.8，1%溴香草酚蓝乙醇液2ml，水200ml，溶解，分装于20支试管中，121C灭菌20min。(pH不宜偏高，以淡绿为宜)。
3.硝酸盐还原培养基配制：蛋白胨1.25g，氯化钠0.625g，硝酸钾0.25g，水125ml，溶解，调节pH7.4左右，分装于16支试管中，121C灭菌20min。
4.硫化氢试验养基配制：蛋白胨5g，氯化钠1.25g，柠檬酸铁铵125mg，硫代硫酸钠125mg，琼脂5g，水250ml。先将琼脂、蛋白胨融化，冷至60C时加入其他成分，调pH7.2左右，分装于35支试管中，112C灭菌20min。
（二）接种与培养
1.穿刺法分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支醋酸铅培养基(H2S)，37"C培养48h。
2.分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支蛋白胨水培养基(I)、2支葡萄糖蛋白胨水培养基(M&V)，37C培养2d。
3.划S曲线法分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支柠檬酸盐斜面培养基(C)，37°C培养2d。
（三）结果观察
1.H2S实验：观察是否有黑硫化铅沉淀产生。
2.吲哚实验：2d后的培养物内加3~4滴乙醚，摇动数次，静至1~3min，待乙醚上升后，沿管壁徐徐滴加2滴吲哚试剂，在乙醚和培养物之间产生红环状物者为阳性反应。
3.甲基红实验：2d后的培养物内加2滴甲基红试剂，培养物变为红者为阳性，黄者为阴性(注意甲基红不要过量，以免出现假阳性)。
4.伏一普实验：2d后的培养物内加5-10滴40%KOH，然后加入等量的5%一萘酚溶液，用力振荡，红为阳性。
5.柠檬酸盐实验：观察2d后的培养物上有无细菌产生及其颜，蓝为阳性，绿为阴。