主持人：杨澜、陈蓉、林海、吴大维
歌曲《打起鼓来唱起歌》
表演：湖北土苗兄妹
评弹《江南好风光》
表演：苏州评弹学校
侗族大歌《蝉之歌》
表演：贵州省黔东南苗族侗族自治州民间侗族歌手
歌曲《分享庆丰收》
领唱：高金素梅林广财庄莫俄
表演：台湾高金素梅文化团队
歌曲《世界》
演唱：刘恋熊郁菲周进华韩鹏世博志愿者
歌曲《城市让生活更美好》
演唱：李泽 雪莲斯曼组合 薛之谦 巫慧敏小松拓也关吉吉 《全家都来赛》全国冠军家庭
二、 嘉宾上场音乐
演奏：中国人民解放军军乐团
三、 序和谐欢歌
《和谐欢歌》：宋祖英，成龙
四、 上海世博会领导人主持开幕仪式
五、 升中华人民共和国国旗，唱中华人民共和国国歌
六、 升国际展览局旗，奏国际展览局曲
七、 升上海世博会旗，奏上海世博会歌
八、 参展国家和国际组织旗帜入场
九、 中国2010年上海世博会组委会领导人致辞
一十、 国际展览局领导人致辞
十一、中华人民共和国国家领导人宣布“中国2010年上海上世博会开会幕
十二、文艺表演第一章相约上海
《相约上海》：刘媛媛、毛阿敏、周华健
十三、文艺表演第二章江河情缘
圆舞曲《蓝多瑙河》：上海交响乐团及指挥余隆
钢琴协奏曲《新上海协奏曲》
钢琴独奏：郎朗
指挥：余隆
芭蕾舞：金山芭蕾舞团领舞：谭元元范晓枫季萍萍孙慎逸吴虎生余晓伟刘爽赵媛王韵吕萌焦洋郑宇张文君
十四、文艺表演第三章世界共襄 廖昌永
《Better City,Better Life》：乔纳森·巴可和席依达·盖瑞特
《勇敢的号角》：毛利歌舞团
《星》：谷村新司
《一种爱》：索韦托非洲合唱团
《今夜无人入眠》：安德烈?波切利
《致世博》：黄英、廖昌永、谭晶、孙楠
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