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结核分枝杆菌GeneXpert核酸扩增检测操作步骤(总4页)

结核分枝杆菌GeneXpert核酸扩增检测操作步骤
一、准备工作:
1. 开机
依次开启:UBS电源、仪器电源、打印机电源、笔记本电脑电源;
等待笔记本电脑进入系统,出现四个用户图案时,选择用户Cepheid,输入密码:cphd ,等待约一分钟后系统弹出登录窗口,依次输入用户名和密码;
等待Gene-Xpert操作软件的启动与自检过程,自检过程中软件出现“数据库管理”提示窗,点选“否”;再在“存档”提示窗点选“否”,待模块进展显示“可用”。
仪器预热15分钟后再进行检测。
2. 耗材准备
标本处理液、  Cartridge反应盒、  前处理管(带有盖子的试管)、
手机查询核酸检测报告
塑料滴管(每个标本准备2支)、    待检标本。
3. 样品预处理
前处理管标号或粘贴条形码,再吸取2ml标本处理液在前处理管中,加入1ml标本;
②旋紧盖子,旋涡仪振荡10秒或剧烈摇动10-20次,室温静置10分钟,再旋涡仪振荡10秒或剧烈摇动10-20次,室温静置5分钟,观察无可见块状痰标本存在。
拆开Cartridge反应盒包装,小心取出,不要接触到正面的二维码、上面胶盖和后面有尖端区域,避免污染,可在侧面编号或粘贴条码。
小心上拔开启Cartridge反应盒蓝上盖的前部,取处理后的样品2ml,沿样品加入口的
内壁缓缓加入反应盒内(避免吸到未液化的粘液部分,吸液量可以略超过两毫升,把尖端残液保留不注入,以免产生气泡)。
二、测定操作:
1 .在GeneXpert Dx系统窗口的工具栏点击『创建测试』;
2. 在“扫描患者ID条形码”弹窗,选“手动输入患者条形码”,再输入患者的姓名
3. 在“扫描样品ID条形码”弹窗选“手动输入”,再在弹窗内输入痰检的实验室编号
4. 在“扫描检测盒条形码”弹窗内,用扫码方法(或手动)输入测试盒上的条码,成功后软件自动指定待运行板块((注意:为了保障每个模块有均等的运行机会,软件会选择运行次数最少的模块;但手工可以选择不同的模块)。此时板块顶部绿指示灯亮起并开始闪烁,点击“开始测试”。
打开指定的测定板块(顶部指示灯闪动),将Cartridge反应盒放入其中,关紧板块前门,检测开始,系统内有测定完成时间倒计时显示,等待检测结束(时间约2h)。
三、打印报告
1. 在系统窗口的工具栏点击“查看结果”,点击页面下端的“报告”,在对话框中勾选需要打印的结果,点击“生成报告文件”,点“保存”;
2. 确认打印机有纸,点“预览PFD”,再选弹出报告,点“打印”,弹出窗再选“当前页”,点OK之后打印出报告单。
四、关机
1. 取出检测完成的Cartridge反应盒
2. 退出笔记本电脑系统,选择关机按钮,关闭电脑;
3. 依次关断:检测设备电源、打印机电源;
4. 按下UPS电源OFF开关,等待电源输出关闭,之后关闭排插上的电源开关。
五、质量控制措施
(一)样本与保存
1.每份样品需收集痰液至少 1 mL 痰液,不应使用含明显的食物颗粒的样本和血痰。
2.标本保存:
原始痰标本或已处理过(去污染/浓缩)的痰标本: 2–8°C冷藏, 最长保存10天;
在必要的情况下,标本可在室温下(环境温度最高为35°C)最长保存3天,然后再置于2–8°C进行冷藏,前后累计天数最长仍为10天。
3.已加入样品处理剂的标本保存:
原始痰标本或已处理过(去污染/浓缩)的痰标本: 如果可在2-8°C冷藏, 12小时内完成处理;如果不具备该冷藏条件,需在5小时内完成处理;
已加人样品的试剂盒的保存(如:遭遇突然停电): 从加入样品后至测试开始时间在4小时之内,试剂盒可以直接上机测试; 如果超过4个小时,则需要换一个新的试剂盒重新加样再测试。
(二)试剂盒与加样
1.试剂盒保存于 2-28° C,干燥环境中,避免阳光直射。
2.开启后,始终保持试剂盒处于直立状态,避免震动、倾斜或坠落!用手取试剂盒时,仅能接触试剂盒的左右两侧,不能接触盒盖、前面的二维码,或者后面的反应管。
• 不要在盒盖上进行标记或者妨碍识别试剂盒已有的二维码
• 可以在试剂盒的左右两侧手写标记样品编号或粘贴样品编号标签
3.用移液管吸取过程中需小心操作,避免产生气溶胶和气泡,不要把制备样品中的固体颗粒加入到试剂盒里,在试剂盒操作说明建议的15分钟(10+5)处理步骤后,如果样本仍然很粘稠,那么不要直接加入试剂匣,建议额外等待10分钟直至样本完全液化,然后再使用一支新的移液管取样至试剂匣。样本的总体积需要在2-4毫升之间。
4.如果发生以下情况,试剂盒不可使用:
检测日期超过试剂盒标注的有效期;外部潮湿;
盖子有破损或者 (意外) 开启;    加入处理的样品之后,试剂盒坠落或震荡;
位于试剂盒后面的PCR反应管破损;已使用过的试剂盒,扫描之后不能重复使用;
试剂盒的包装(指10只试剂盒的袋装)打开长达6周以上。
(三)实验室环境
温度保持在 15-25℃,并确保机器处于干燥的环境中,避免阳光直射,避免灰尘。
(四)GeneXpert 仪器维护指引
项目
方法
维护频率
清洁机器表面
酒精擦拭
每月一次
清洁试剂盒仓室
酒精擦拭(注意:不要清洁I-CORE反应管插缝!
每月一次
清洁柱塞杆
酒精擦拭
每月一次
清洁风扇处空气过滤片
取下过滤片,吹掉灰尘
每月一次
更换风扇处空气过滤片
更换新的空气过滤片
每年或定期更换(必要时)