黄浩然的老婆
·17·抗hnRNPB1抗体结合^131I靶向肺癌小鼠的实验分析
朱海振  贵州省贵阳市贵州省贵阳市人民医院　贵州贵阳　55081000
郭　熠通讯作者　贵州省贵阳市护理职业技术学院　贵州贵阳　55081000
1资料与方法
1.1…基线资料
选择近交系C57BL/6小鼠40只为研究样本，均为雄性。小鼠周龄为8周，提质量为17-18g，所有实验样本够买于北京维通利华实验动物有限公司。
1.2…方法
1.2.1…材料
本实验使用的材料为小鼠Lewis肺癌细胞、SephadexG-25层析柱、无还原剂碘化钠（Na131I）、胰蛋白酶、DMEM、氯氨-T、阱型γ闪烁探头。
1.2.2…抗hnRNPB1单克隆抗体植制备
本实验将人工合成氨基酸序列KT;ETVPLER-KKREKEQFChnRNPBz1…19肽为免疫、腹腔和皮下注射免疫BALB/c 小鼠，后取血清效价最高实验小鼠脾脏细胞和SP2/0骨髓细胞相互融合。开展HAT选择培养，将阳性细胞株接种在BALB/c小鼠腹腔之内，收集腹水，应用饱和硫酸铵法纯化取得抗hnRNPB1单克隆抗体。经ELISA法测定效价为1.80*105。
1.2.3…抗hnRNPB1单克隆抗体131I标记
本实验应用氯氨-T法完成抗hnRNPB1单克隆抗体制备。反应液通过SephadexG-25层析分离完成纯化。上形纸层析法测定放化纯度水平。
1.2.4…动物模型创建以及分组方法
将小鼠的Lewis肺癌细胞株放置浓度为5%CO2、37℃孵箱内含有10%新生小牛血清DMEM培养液完成培养。在细胞生长到80%~90%密集度以后，应用浓度水平为0.25%胰蛋白酶于37℃环境内消化处理3-5min应用倒置显微镜下查看，如果绝大部分细胞处于悬浮状态，内部加入含有10%DMEM培养液5ml终止反应。反复吹打直至细胞悬浮状态为止。后移入到离心管内，以4000r/min的速度离心处理10min。去掉上清液，后在其中加入生理盐水，制作成单细胞悬液，调节到既定浓度之后在小鼠皮下接种，每只接种2*105个活肿瘤细胞。
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在接种肿瘤细胞之后7d，将负荷肿瘤小鼠分成5组。8只/组。
I组为131I-抗hnRNPB1单克隆抗体单剂量组，11.10Mbq/只*1；
II组为131I-抗hnRNPB1单克隆抗体强化组，11.10Mbq/只*2；
III组为Na131I组，11.10Mbq/只*1；
IV组为抗hnRNPB1单克隆抗体组，50μg/只；
V组为对照组，生理盐水0.12ml/只。
经小鼠尾静脉注射给药。查看各个组小鼠的进食、活动情况，每周测定其体质量；若该项指标下降到前基线值80%时，停止实验。前后，工作人员每周测定肿瘤短径、长径值。计算出瘤体积，4周时，断颈处死小鼠。分离肿瘤，称量肿瘤质量，计算出抑瘤率。后应用浓度为10%福尔马林固定，制作病理切片，开展HE染。
1.3…统计学原理如何设置路由器密码
实验应用SPSS20.0统计学软件，对数据内计量资料开展t值检验，
组间对比应用方差分析，若P＜0.05，代表有关数据存在统计学意义。
2结果
小鼠结束时，I组~V组的小鼠肿瘤体积均值分别为（3867±196）mm3、（1988±150）mm3、（6923±533）mm3、（6963±510）mm3、（6598±522）mm3。相较于对照组，观察组肿瘤体积存在统计学差异，P＜0.05；且II组小鼠的肿瘤体积均值比I 组小，P＜0.05；III组以及IV组后肿瘤体积均值和对照组相比无明显差异，P＞0.05；
I组、II组、III组、IV组的肿瘤抑制率为68.18%、39.04%、1.37%、0.89%。I组以及II组的肿瘤抑制率比III组以及IV组高，P＜0.05；I组以及II组肿瘤抑制率组间数据存在统计学差异，P ＜0.05.
3讨论
131I为一类应用范围最广的放射性核素。这种物质容易获得、价格便宜、半衰期适宜。其标记抗体比较容易，方法也趋于成熟。131I所释放的γ以及β射线不但能够被用于放免，同时也可实现放射免疫显像。诸多研究表明：以针对肿瘤相关抗原抗体结合不同放射性核素实体肿瘤，具有一定效果。其具体的抑瘤作用，表现为量效依赖关系。
本研究证实应用hnRNPB1单克隆抗体荷瘤小鼠，发现其能够有效抑制肿瘤生长。但值得说明的是，本冯巩儿子
组内并未出现肿瘤完全缓解小鼠样本。发生这一结果的原因很可能和时肿瘤体积较大以及131I在肺癌组织浓度聚集量存在关联性。而在结束时，肿瘤组织病理学检查表明各组均无明显差别。其可能和之后观察时间长才处死小鼠、分离癌瘤组织有关。
诸多研究表明，放射性核素标记单克隆抗体抑瘤效应明显比单纯应用单克隆抗体肿瘤的效果要好。
另外本组实验研究还表明：Na131I针对于肺癌小鼠肿瘤生长不存在抑制作用。出现这一结果的原因很可能和该物质无肺癌肿瘤组织靶向集聚有关。不哭糖心
参考文献
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及预后标志物的研究进展[J]. 中国肺癌杂志, 2020, v.23(11):94-102.
作者简介
朱海振，男，博士，副主任医师，研究方向，肿瘤的诊疗
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通讯作者：郭熠，女，硕士，副教授，研究方向，肿瘤的诊疗，医学英语
摘　要：目的：分析抗hnRNPB1单克隆抗体结合^131I对肺癌小鼠靶向的实验结果。方法：本实验应用氯胺-T法全面合成131I-抗hnRNPB1单克隆抗体，在40只实验小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞1周之后，将小鼠分为5组，8组/只。经尾静脉注射相关药物，I组为131I-抗hnRNPB1单克隆抗体单剂量组、II组为131I-抗hnRNPB1单克隆抗体强化组、III组为Na131I组、IV组为抗hnRNPB1单克隆抗体组、V组为对照组。开始之后每周测定小鼠肿瘤长短经一次。1月后处死小鼠，称定瘤质量、计算抑瘤率。对于肿瘤组织实施HE 染。结果：相较于对照组，观察组肿瘤体积存在统计学差异，P＜0.05；且II组小鼠的肿瘤体积均值比I组小，P＜0.05；III组以及IV组后肿瘤体积均值和对照组相比无明显差异，P＞0.05；I组以及II组的肿瘤抑制率比III组以及IV组高，P＜0.05；I组以及I
I组肿瘤抑制率组间数据存在统计学差异，P＜0.05.结论：应用抗hnRNPB1单克隆抗体联合131I针对于肺癌小鼠的癌瘤生长有显著抑制效应，并且相关效应有着明显的量效关系。该法具有进一步推广的价值。
关键词：抗hnRNPB1单克隆抗体；131I；放射免疫靶向；肺癌小鼠靶向
基金项目：贵州省自然科学基金项目（黔科合基础[2020]1Y428）。