温华
图1 对照品黄芩苷
2.3 供试品溶液的制备
取5支供试品混匀，精密量取1.0ml置于100ml容量瓶中加70%乙醇适量，超声振荡5min，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀备为供试品溶液。用0.45μm微孔滤膜过滤后注入液相谱仪；见图2。
图2 供试品黄芩苷
2.4 阴性供试品溶液的制备
取处方比例除黄芩外的其他药材，按供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液，用0.45μm微孔滤膜过滤后注入液相谱仪；见图3。
图3 阴性样品
2.5 线性关系
2.7样品测定
将选取的①、②、③、④号供试品分别测定，结果分别为：1.80、6.08、1.29、1.04(mg/ml)。
3.讨论
中药复方制剂成分较复杂，测定过程中易产生干扰，用HPLC能对特定组分进行有效分离。黄芩是小儿清热止咳口服液中较为重要的组分，而黄芩苷是黄芩中含量最高的成分，也是黄芩发挥药效的物质基础[2]。从本实验中也可看出各厂家生产的产品黄芩苷的含量参差不齐，
摘要】 目的：建立高效液相谱法（HPLC）测定小儿清热止咳口服液中黄芩苷含量的方法。方法：Hypersil C18谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液（47:53），流速1.0ml/min，检测波长：280nm，柱温：30℃。结果：黄芩苷的线性范围分别为：0.04ug～1.6ug，平均回收率99.45%，RSD值为0.93%。结论：本方法可行、重现性好，能有效的控制小儿清热止咳口服液的质量。
【关键词】高效液相谱法； 小儿清热止咳口服液； 黄芩苷
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）30-0357-02
小儿清热止咳口服液是由麻黄、黄芩、板蓝根等七味药制成的复方制剂，收载于《中国药典》2010年版一部，具有清热宣肺、平喘、利咽的功效，用于小儿外感风热所致的感冒，标准中含量测定是对麻黄中麻黄碱进行检测。笔者认为该制剂中起主要作用的是麻黄和黄芩，因此除了对麻黄碱进行质量控制外，应将黄芩苷的含量作为控制质量的另一个重要手段。本实验参照《中国药典》[1]黄芩药材中测定黄芩苷的方法，采用HPLC对其所含黄芩苷进行了测定。结果表明，该方法简便可行，重现性好，能全面有效地控制小儿清热止咳口服液的质量以供临床
【关键词】高效液相谱法； 小儿清热止咳口服液； 黄芩苷
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）30-0357-02
小儿清热止咳口服液是由麻黄、黄芩、板蓝根等七味药制成的复方制剂，收载于《中国药典》2010年版一部，具有清热宣肺、平喘、利咽的功效，用于小儿外感风热所致的感冒，标准中含量测定是对麻黄中麻黄碱进行检测。笔者认为该制剂中起主要作用的是麻黄和黄芩，因此除了对麻黄碱进行质量控制外，应将黄芩苷的含量作为控制质量的另一个重要手段。本实验参照《中国药典》[1]黄芩药材中测定黄芩苷的方法，采用HPLC对其所含黄芩苷进行了测定。结果表明，该方法简便可行，重现性好，能全面有效地控制小儿清热止咳口服液的质量以供临床
合理用药之需。
1.仪器与试药
高效液相谱仪：waters e2695-2998（二极管阵列检测器）（美国waters公司）；分析天平：CP225D电子天平（Sartorius），BSA-124S电子天平（北京赛多利斯）；DTC-8超声振荡仪（湖北鼎泰生化科技公司）。供试品：小儿清热止咳口服液（①号样吉林吉春制药公司批号150101、②号样浙江康恩贝制药公司批号140402、北京亚东生物制药公司③号样批号20140305 和④号样20140623）均为市场上随机抽取的样品；对照品：黄芩苷（中国药品生物制品检定所，批号110715-200514）。甲醇为谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1 谱条件
Hypersil C18 谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液（47:53），流速1.0ml/min，检测波长280nm；柱温30℃，进样量10μl。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品8.06mg用甲醇溶解并定容至20ml，作为对照品储备液。分别取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、4.0ml置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；见图1。
1.仪器与试药
高效液相谱仪：waters e2695-2998（二极管阵列检测器）（美国waters公司）；分析天平：CP225D电子天平（Sartorius），BSA-124S电子天平（北京赛多利斯）；DTC-8超声振荡仪（湖北鼎泰生化科技公司）。供试品：小儿清热止咳口服液（①号样吉林吉春制药公司批号150101、②号样浙江康恩贝制药公司批号140402、北京亚东生物制药公司③号样批号20140305 和④号样20140623）均为市场上随机抽取的样品；对照品：黄芩苷（中国药品生物制品检定所，批号110715-200514）。甲醇为谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1 谱条件
Hypersil C18 谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液（47:53），流速1.0ml/min，检测波长280nm；柱温30℃，进样量10μl。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品8.06mg用甲醇溶解并定容至20ml，作为对照品储备液。分别取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、4.0ml置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；见图1。
图1 对照品黄芩苷
2.3 供试品溶液的制备
取5支供试品混匀，精密量取1.0ml置于100ml容量瓶中加70%乙醇适量，超声振荡5min，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀备为供试品溶液。用0.45μm微孔滤膜过滤后注入液相谱仪；见图2。
图2 供试品黄芩苷
2.4 阴性供试品溶液的制备
取处方比例除黄芩外的其他药材，按供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液，用0.45μm微孔滤膜过滤后注入液相谱仪；见图3。
图3 阴性样品
2.5 线性关系
分别取对照品溶液10μl注入液相谱仪，测定峰面积。以峰面积及进样质量进行线性回归，得到回归方程y=6×106x-19130，r=0.9997。结果表明，在此谱条件下，黄芩苷进样量在0.04μg～1.6μg范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.6 回收率试验
取①号样含黄芩苷（1.80mg/ml）5份，分别加入黄芩苷对照品储备液（0.4mg/ml）1ml，用70%乙醇稀释至50ml，注入液相谱仪，计算回收率，结果见表1。
表1 回收率试验结果表（n=5）
2.6 回收率试验
取①号样含黄芩苷（1.80mg/ml）5份，分别加入黄芩苷对照品储备液（0.4mg/ml）1ml，用70%乙醇稀释至50ml，注入液相谱仪，计算回收率，结果见表1。
表1 回收率试验结果表（n=5）
2.7样品测定
将选取的①、②、③、④号供试品分别测定，结果分别为：1.80、6.08、1.29、1.04(mg/ml)。
3.讨论
中药复方制剂成分较复杂，测定过程中易产生干扰，用HPLC能对特定组分进行有效分离。黄芩是小儿清热止咳口服液中较为重要的组分，而黄芩苷是黄芩中含量最高的成分，也是黄芩发挥药效的物质基础[2]。从本实验中也可看出各厂家生产的产品黄芩苷的含量参差不齐，
故笔者认为可将黄芩苷的含量测定作为控制小儿清热止咳口服液质量的一个手段。 本实验参照有关文献[3]报道中流动相，可以看出该方法准确、灵敏、快速、重复性好，本方法可为该制剂的质量控制提供参考。
【参考文献】
[1] 中国药典.一部[S].2010:282.
[2] 温华珍，肖盛元，王义明等.HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量[J].中草药，2005，36（4）：600.
[3] 唐慧慧，蔡清宇，张丽娟.HPLC测定小儿清肺化痰颗粒中黄芩苷的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（21）：112.
【参考文献】
[1] 中国药典.一部[S].2010:282.
[2] 温华珍，肖盛元，王义明等.HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量[J].中草药，2005，36（4）：600.
[3] 唐慧慧，蔡清宇，张丽娟.HPLC测定小儿清肺化痰颗粒中黄芩苷的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（21）：112.
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