冻干机性能验证方法的建立和应用
作者:鲁高升
来源:《科学与技术》 2019年第5期
    ■鲁高升
    摘要:文章目的主要建立真空冷冻干燥机(冻干机)性能验证方法,对LYO(SIP,CIP)型冻干机性能进行验证。方法:根据2010版药品生产和质量管理规范(GMP)指南的要求,对冻干机真空、在线清洗和灭菌系统(CIP/SIP)、板层温度均匀性等性能指标进行测试,验证其是否符合产品工艺需求。结果:冻干机抽极限真空至1Pa以下;在线清洗覆盖率100%;在线灭菌完全,各温度点F0>30min;板层均匀性温度保持在-50℃、0℃和50℃时,各板层所有测试点在同一时刻温度最大值与最小值温差≤2℃。结论:通过测试验证,所用冻干机各项性能可满足生产要求。
    关键词:冻干机;性能验证;真空;在线CIP/SIP;温度均匀性
    引言
    真空冷冻干燥是在低温低压条件下去除液体物料中绝大部分的水分,使之成为含水率极低的干品的一种
干燥方法,这种低温干燥方法由于它具有其它热干燥方法无法比拟的优越性,已经被广泛应用于现代医药,如抗生素、生物制品、高级营养品等行业的大生产中。真空冷冻干燥机(简称冻干机)就是实现这种干燥的专用设备。在国外,上世纪三、四十年代就有应用,国内的工业生产中应用冻干机则要晚几十年,起步于九十年代。这种早期的冻干机性能普通,功能也比较简单,随着科学技术的飞速发展,如今的冻干机已成为性能优越,功能齐备且能实现全过程自动控制的先进设备,完全能满足现代化大生产的需要。经几十年的发展和几代人的努力,对于提高冻干机的性能我们取得了一定的经验,在此就两个局部性问题谈一谈。
    1材料与方法
    1.1验证材料
    材料包括测试仪器和指示剂两部分。(1)测试仪器。NanoVACQ Temperature温度验证系统(法国TMI Orion公司);Sartorius Sartocheck-4型完整性测试仪(德国赛多利斯集团)。(2)指示剂。灭菌生物指示剂(ATCC7953上海福泽医药器材有限公司)。
    1.2验证方法
    1.2.1冻干机极限真空
    冻干机主要包含干燥箱、冷凝器、以及真空系统等其它的功能子系统。干燥箱的主要功能是给制品在真空冷冻干燥过程中提供密闭的环境,保证整个冻干过程的真空状态。冷凝器采用与干燥箱连体的立式圆桶形冷阱,冷阱将放置在干燥箱的后部,冷阱盘管将通过氟利昂来进行制冷,可达到的最低温度为-75℃,用于捕获水汽。干燥箱和冷凝器通过大通径的、液压驱动的主蘑菇阀进行隔离和相通。真空系统包括主真空泵、真空泵隔离阀和罗茨泵,罗茨泵作为前级泵目的是提高主真空泵的吸气压力,加快抽空速度,减少抽空时间。为了检测其工作状态,分别在干燥箱和真空系统管路上安装了真空度的传感器,对冻干机的极限真空性能进行检测。
    冻干机极限真空测试是确保干燥箱表面干燥前提下运行程序,在冷凝器温度达到-45℃时,启动真空系统对冷阱进行抽空,一定时间后打开蘑菇阀,以排除不凝性气体和捕获水汽进行抽拉真空,直至箱内达到极限真空。
    1.2.2冻干机在线清洗CIP覆盖率
    (1)在整个冻干腔体的内表面喷洒一层维生素B2水溶液,浓度为20mg/L,特别注意难以清洗部位(如管口,箱体顶部和板层下方)要喷洒完全。开启注射用水,启动CIP循环,完成CIP后,用荧光灯照射检查腔体内表面,寻是否残留有维生素B2荧光物部位,进行3次重复的测试。(2)合格标准。CIP清洗后的腔体内部表面无可见荧光物,清洗覆盖率100%(参考药用真空冷冻干燥机行业标准JB/T20032-2012)。
    1.2.3冻干机在线灭菌SIP测试
    (1)前校准方法。验证前将验证用温度探头和标准温度探头同时放入温度干井,进行前校准;设置温度为100℃、132℃及121℃,进行3点校准;校准读取偏差应≤0.5℃。(2)将校准后的温度探头通过验证口接入冻干机内,放置24支度探头,探头覆盖冻干机干燥箱箱体、各板层以及复压系统。运行冻干机的SIP程序,灭菌温度121℃,灭菌时间30min。进行3次重复测试。验证测试完成后将使用温度探头进行后校验,校验点设置为121℃,后校验读取偏差应≤0.5℃。(3)冻干机灭菌生物指示剂挑战测试。在每一个温度探头附近各放置1支生物指示剂(1~24#),探头编号与指示剂编号一致,冻干机的SIP程序结束后取出指示剂进行培养。(4)合格标准。依据国家标准GB-8599-2008“大型蒸汽灭菌器技术要求自动控制型”,灭菌阶段同一时刻温度最热点与最冷点的温度偏差≤2℃,温度最小值≥121.0℃;依据卫生部令第79号“药品生产质量管理规范(2010年修订)”,同时结合产品工艺要求,各温度点F0≥30min,灭菌生物指示剂在线灭菌后应无菌生长。
    1.2.4冻干机板层温度均一性测试
    (1)前校准方法。验证前将验证用温度探头和标准温度探头同时放入温度干井,进行前校准;设置温度为-50℃、0℃及50℃,进行3点校准;校准读取偏差应≤0.5℃。(2)干燥箱有10块有效板层和1块温度补偿板层,板层温度范围可从-55℃至+80℃,将校准后的温度探头通过验证口接入冻干机内,放置
55支度探头,每块板层四个角和中心各一个探头。运行冻干机的板层均一性验证程序,进行3次重复测试。
    2结果
    2.1冻干机抽真空测试结果
    冻干机抽真空程序,抽真空速率和极限真空均在标准要求以内。抽气速率:箱体压力下降至10Pa的时间应≤30min;极限真空:≤1Pa。
    2.2冻干机在线清洗CIP覆盖率测试结果
    对喷洒维生素B2水溶液的冻干腔体进行在线清洗CIP测试,3次重复试验观察结果显示均无可见荧光物,清洗覆盖率为100%。
    2.3冻干机在线灭菌SIP测试结果
    SIP后采用水浸入法检测呼吸器滤芯完整性,WIT或WFT值符合气体滤芯完整性标准。同时温度探头温度曲线均在121℃以上,灭菌后灭菌生物指示剂培养结果为阴性,无菌生长。
    2.4冻干机板层温度均一性测试结果
    板层均匀性温度保持在-50℃、0℃和50℃三个温度控制点时,各板层所有测试点在同一时刻温度最大值与最小值温差≤2℃。
    3讨论
    由于一体化冻干机采用冷凝器在干燥箱下方的整体结构,产品中逸出的水蒸汽能迅速地均匀地流向冷凝器表面。即使没有真空泵的导流作用,冷凝器仍然保持很高的效率,能充分捕捉制品表面逸出的水蒸汽,保持箱体内的真空度不降低。当箱内真空度达到设定值后,维持密闭箱内真空度的“泵”是高效的冷凝器而不是真空泵组,因此,一体化冻干机的真空泵组的吸气口不放置于冷凝器的底部,而位于冷凝器盘管中心的上方。并且,从真空泵组到箱体之间的抽气管路上装有气动隔膜阀,需要抽气时,隔膜阀打开,使箱内压力下降,当真空度到达设定值时,隔膜阀关闭。由于冷凝器捕水效率高,箱体真空度可在相当长的一段时间内保持稳定,正因为如此,隔膜阀也一直保持关闭状态。只有当箱内压力高于设定值时,隔膜阀才重新自动打开,真空度达到设定值时又关闭,这样,一方面可以控制箱内真空度不会太低,以维持一定的热对流,提高传热效率。同时,箱内真空度很稳定,既使在突发的情况下,也不会产生真空泵组和冷凝器中的气流返流到干燥箱的现象,大大减少了压力波动的可能性;另一方面也提高了安全性,因为,在第一次干燥阶段,不需要太低的压力。由于隔膜阀大部分时间处于关闭状态,在一定程度上,可避免在高真空条件下出现真空泵内的油蒸汽的返流现象。
    本研究通过实践一系列的测试方法,建立一套适用于公司冻干机性能验证的方法,为今后冻干机验证及生产工作的顺利开展提供依据。
    参考文献
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真空干燥箱使用方法    (作者单位:浙江昌海制药有限公司)