VEGF与复发性流产的研究进展
郑 颖1，左常婷1，王国华2 (1.山东大学附属省立医院妇产科，济南 250021 2.连云港市第一人民医院)
关键词:VEGF；流产，复发性
中图分类号:R714121 文献标识码:A 文章编号:1006-9534(2008)09-0010-03
S tudy p r o g re s s i n VEGF a nd re cu rre n t spo n ta neo u s a bo rti o n.ZHEN G Ying,et al.(D epart m ent of O bstetrics&Gynecolo2 gy of Provincil Hospital,Shandong U nivercity,J inan,250021)
Ab s trac t:VEGF p lay an i m portant r oles in nor mal p regnancy,The abnor mal levels of the m will result in pathol ogic p regnancies. for exa mp le Pregnancy induced hypertensi on and m iscarriage.This article will offer theoretical basis f or studing Recurrent s pontaneous aborti on thr ough the intr oducti on of the relati onshi p bet w een VEGF and Recurrent s pontaneous aborti on.
Ke y wo rd s:VEGF;Aborti on;Spontaneous;Recurrent
血管内皮生长因子(VEGF)是一种作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子。具有促进微静脉及小静脉通透性增加，血管内皮细胞分裂和增殖，细胞钙聚集，以及诱导血管生成等作用。研究表明VEGF是生理性血管生成的主要调节剂, VEGF可能与正常妊娠胎盘的形成及滋养叶细胞的侵入, VEGF升高与降低与某些病理妊娠有关。
1.VEGF的结构及生物学功能
(1)VEGF的结构及受体
人的VEGF基因位于染体6p21.3，全长14kb。不同种属VEGF的N端氨基酸序列相似但不完全相同。VEGF的基因经过转录水平的剪切，可产生5种不同的转录因子，分别是VEGF121,VEGF145,VEGF165,VEGF189,VEGF206。大多数情况下VEGF165的表达有种优势。一般认为VEGF121, VEGF145,VEGF165属分泌性蛋白质，而VEGF189和VEGF206在很大程度上与细胞膜相关。VEGF有两种手体，分别是flt1蛋白和flk1/k DR蛋白，两者均属受体酪氨酸激酶(RTKS)家族。其基因分别定位于染体13q12和4q12。VEGF受体存在于血管内皮细胞中，在正常情况下表达水平很低，多数组织中不能检出。但某些病理条件下，常可在附近的血管内皮细胞中检测到着两种受体的高表达。
(2)VEGF的生物学功能
VEGF是一个强烈的、多功能的细胞因子，其生物学功能有以下几方面:
1)细胞质的聚Ca2+作用VEGF与受体作用后最早观察到的生物效应是Ca2+增加。培养中的内皮细胞与低于pmol/L浓度的VEGF接触几秒钟后细胞质Ca2+开始增加，可达正常浓度4倍以上，这是目前检测VEGF活性最敏感的方法[1]。
2)增加血管通透性,VEGF增加血管通透性作用十分强烈，采用m ille检测法其浓度不足n mol/L既可发挥作用，该效应将是组胺作用的5万倍。
3)促进内皮细胞增殖和血管生成VEGF除了引起血管
通讯作者：左常婷内皮细胞增殖外，还通过其它机制参与血管形成。如VEGF 能增强血浆酶原活化因子(P A)活性，提高P A和血浆酶原活化因子抑制因子1(P A I1)MRNA水平，通过P A和P A I1的活化调节，促进细胞外蛋白水解，从而促进新毛细血管生成。
4)VEGF与病理性血管生成VEGF作为一种内皮细胞的有丝分裂原和促血管生成因子，对生理血管生成过程十分重要，如胚胎发育、繁殖、伤口修复等。不仅如此,VEGF对肿瘤和低氧.缺血性疾病及视网膜病变等病理过程也有重要的调节意义。
2.VEGF与生理妊娠
胎盘微血管的生成及其网络构建，是胎儿与母体物质交换的保证。成功的妊娠要求胎盘血管网的充分发育以满足母胎之间气体和养料的交换及胎儿代谢废物的排泄。胎盘的血管生成最初发生在妊娠第19天，是妊娠早期新生血管形成的主要方式。完整的胎儿毛细血管网出现在妊娠第22天前后。因此，如果胎盘血管发育不足，将影响胎儿营养的供给，胚胎难以存活，导致流产的发生。随着胚胎的植入过程，滋养层细胞侵入子宫内膜，向内迁移，最后到达子宫内膜肌层1/3处形成物理性的连接，即胎儿-胎盘组织，滋养层细胞侵入子宫内膜的过程与肿瘤浸润，转移和扩散极为相似。而血管内皮生长因子(VEGF)在血管生成及滋养细胞浸润过程中起着十分重要的作用。
血管内皮生长因子是血管内皮细胞特异而强烈的有丝分裂原和血管发生的关键因子,VEGF的主要生理功能是促进内皮细胞和滋养细胞分化，增生，迁移，浸润，调控血管发生和维持血管内皮细胞功能。在胎盘中，整个孕期都能检测到VEGF及其受体的表达，表达强度随妊娠进展而增强，对胎盘血管的发育和功能维持起重要作用。Evans等[2]检测60例未孕育龄妇女及363例孕41-91天妇女血中VEGF水平，发现早孕组显著高于未孕妇女，并发现血清VEGF值与孕周呈正相关，而且与反映胎盘功能的激素hCG和孕酮呈显著正相关，由此推断VEGF对滋养层的发育有重要影响。Shiraishi[3]等采用免疫组化法对56例不同孕龄(6-41周)胎盘的VEGF表达情况进行了定位和定量研究，发现在妊娠
全过程中，胎盘合体滋养细胞和浸润性绒毛膜滋养细胞均有VEGF表达，其中早孕期的合体滋养细胞呈强阳性，尤其是血管芽部位，早孕期绒毛介导细胞和蜕膜细胞也见有VEGF表达，形态学分析VEGF阳性
表达区域正是绒毛血管的形成区域，随着妊娠进展，孕16周左右达高峰，之后表达逐渐下降，这与胎盘生理发育时间是吻合的，说明胎盘滋养叶细胞产生VEGF促进胎盘血管网络的发育；当妊娠晚期血管生成下降时，又发挥其调节血管通透性的作用，定位检测还发现除了滋养细胞外，绒毛基质细胞，蜕膜细胞中也有VEGF表达，这表明在胎盘发育成熟过程中VEGF在绒毛基质和基底板内血管系统的生长和功能方面也起重要作用;Ah med等[4]的进一步实验研究证明：非极性的细胞滋养细胞柱状结构中及胎盘绒毛毛细血管床都有VEGF的受体Fit-1和VEGF本身的表达，并通过自分泌或旁分泌对滋养细胞起诱导分化的作用。W hecler[5]等通过探讨孕妇血清VEGF水平与胎盘体积，胎儿大小的相关性来揭示VEGF在正常妊娠中的作用。研究表明孕妇血清VEGF水平在怀孕后的10周内显著增高。超声检查示在孕16-20周，胎盘体积与母血VEGF浓度成正相关，但胎儿大小与VEGF水平无相关关系。还发现新生儿出生体重及胎盘重量均与母血VEGF浓度成正相关。资料提示了VEGF对胎盘生长发育的重要作用并参与母体心血管系统对妊娠适应能力的调控机制。
3.VEGF的表达与血管发生及反复自然流产的关系
复发性自然流产(recurrent s pontaneous aborti on,RS A)临床上指孕龄妇女与同一性伴侣连续发生2次或2次以上的自然流产，是妊娠期最常见的并发症之一，其发生率一般约占生育年龄层妇女的0.8%～1%。随着流产的反复发生，流产病人下次妊娠时流产率还要相应的增加，一般一次流产后再次妊娠的流产率约为10%～15%，而二次流产后的第三次妊娠产率约为30%～40%，三次流产后的第四次妊娠流产率则
为40%～60%[6]。引起RS A的原因复杂，除染体、内分泌、感染、内生殖器官解剖异常外，仍有60%～70%的患者病因不明。近年来VEGF在复发性流产中的作用越来越受到重视[7]。
VEGF是体内调节血管发生的中枢物质，对血管内皮细胞有显著的特异性，它一方面能促进血管内皮细胞及滋养细胞的分裂和迁移；另一方面也是血管通透性的主要调节者，促进新生血管的形成。因此，若VEGF表达减少或不表达，则可导致绒毛血管网形成不良或滋养细胞分化、浸润异常，最终导致流产的发生。M eegdes等[8]发现绒毛血管生成障碍与死胎有关;Choi HK[9]等通过对复发性流产患者胎盘绒毛成份的研究发现，复发性流产患者较正常怀孕妇女胎盘中7种血管生成因子相关基因(包括VEGF相关基因)低表达。Girardi G[10]通过对复发性流产和I U GR患者研究发现，补体C5a的激活导致可溶性VEGF受体-1即S VEGFR-1(为强有力的抗血管生成因子)释放，从而使VEGF减少，导致怀孕胎盘功能紊乱，发生流产和I U GR。谭兵兵等[11]研究发现早期自然流产患者胎盘绒毛微血管密度(MVD)及VEGF mRNA 表达均明显低于人工流产组，并且VEGF mRNA表达量与MVD值呈显著正相关。高红军[12]等通过动物实验研究发现VEGF及其受体在恒河猴妊娠早期参与子宫内膜和胎盘发育过程中的血管新生，在胎盘绒毛的浸润及腺上皮细胞分化及其分泌过程中也发挥着重要作用；流产药物可能通过下调VEGF及其受体K DR蛋白的表达，影响了血管发生和胎盘发育，增加了流产机会。唐薇等[13]研究发现米非司酮可明显降低人早孕期绒毛滋养细胞中VEGF表达，据此推断米非司酮通过抗孕激素作用，使孕激素对局部因子平衡和相关基因表达的促进作用减弱，继而使绒毛滋养细胞中VEGF表达下降，导致孕早期绒毛血管形成
不良及胚胎生长发育受阻，使正常妊娠无法维持而终孕。由此推测，可能由于胎盘绒毛微血管生成缺陷，导致了胚胎发育不良，引起死胎，最终导致了早期自然流产的发生。另有研究显示妊娠期VEGF水平升高可能与早孕期滋养层绒毛在发育过程中处于相对缺氧状态有关。从造成兔妊娠子宫内胚胎慢性缺氧，缺血的模型中可检测到胎盘组织VEGF mRNA的表达水平明显增加，进一步证实缺氧可刺激机体增加VEGF的表达量。叶喜阳[14]研究发现反复自然流产(RS A)患者血清及绒毛中VEGF较正常早孕者升高，提示RS A的发生可能与患者血清中VEGF含量升高有关。但是因为VEGF含量升高诱发流产，还是流产后表现血清中VEGF含量升高，还有待于进一步研究。Kr okier II[15]最新研究发现在正常妊娠过程中VEGF在胎盘中的数量逐渐增加；而在自然流产患者中，前三个月VEGF 和它的受体呈相反的变化,VEGF的数量增加而它的受体逐渐下降。这个发现使早期自然流产的研究又前进了一步。
综上所述，由于VEGF及其受体表达的异常，导致早期自然流产胎盘的血管发育不良，最终影响了胎儿和/或胎盘的发育，引发了流产这一病理性妊娠。但体内血管的生成受到众多因素的影响，业已证实，转化生长因子(TGF)-α，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及肿瘤坏死因子(T NF)-α等都能促进血管的生成，胎盘生长因子(p lacental gr owth fac2 t or,P LGF)与VEGF具有协同作用。因此，进一步研究早期自然流产胎盘绒毛内这些因子的变化和调控机制，必将有助于提高对相关的妊娠并发症如反复自然流产，妊娠期高血压疾病及胎儿生长受限等发病机制的认识，并为妊娠并发症防治提供新途径。
参考文献
[1]Freqra N,S myth Td.Endocrine Rev,1997,18:425.
[2]Evans P,W hecler T,Anthony F,et al.Maternal serum vascular en2
dothelial gr owth fact or cluring early p regnancy[J].Clinical Science, 1997,92(6):567-571.
[3]Shiraishi S,Nakaga wa K,Kinuka wa N,et al.I m munohist ochem ical
l ocalizati on of vascular endothelial gr owth fact or in the human p lacen2 ta[J].Placenta,1996,17(2-3):111-121.
[4]Ahmed A,XF L i,C Dunk,M J W hittle,D I Rusht on,T Rollas op.
Cl olcalisati on of vascular endothelial gr owth fact or and its Fit-1re2 cep t or in human p lacenta[J].Gr owth Fact ors,1995,12:235-243. [5]W heeler T,Evans P W,Anthony F W.Relati onshi p bet w een maternal
serum vascular endothelial gr owth fact or concentrati on in early p reg2 nancy and fetal and p lacental gr owth[J].Human Rep r oducti on, 1999,14:1619-1623.
[6]周吉海，谭季春译.习惯性流产的最新进展[J].日本医学
介绍,1997,18(10):471-472.
(下转第7页)
(01286×age)]}-1[6]。根据该公式计算20-45岁孕妇的胎儿发生唐氏综合征风险系数和每增加一岁风险增加率(见表1)。
表1 20-45岁孕妇的胎儿发生唐氏综合征风险系数和
每增加一岁风险增加率
孕妇年龄发生胎儿唐氏综合征风险率每增加一岁风险增加率% 201:1529
211:15081136
221:14811179
231:14472134
241:14043105
251:13513194
261:12865104
271:12096139
281:11198100
291:10199186
301:91011195
311:79714121
321:68316156
331:57518191
341:47421117
351:38423125
361:30725111
371:24226172
381:18928106
391:14629117
401:11230106
411:8630176
421:6531131
431:5031174
441:3832107
451:2832132
从表1中可以看出胎儿发生唐氏综合征的风险率随着孕妇年龄的增长而增大，并且每增一岁其风险率也随之增大。30岁后每增一岁风险率明显增加,35岁后达到了25111%以上。在筛查工作中不时发现，一些妇女由于没有出生证明，为工作或生活需要故意将年龄改大或改小1-2岁，孕后做产前筛查仍填改后年龄，
造成孕妇年龄相关的风险系数计算错误，若为大龄孕妇，很容易导致假阳性或假阴性增加，为保证风险率计算的准确性，应注意认真核对孕妇年龄，尤其大龄孕妇年龄，如有误，应及时纠正。
9.体重
孕妇体重也是一个重要影响因素，它能明显地影响血清标记物水平。怀有唐氏综合征胎儿的孕妇体重越轻，血清中AFP和游离β-HCG值偏离正常Mo M越远，反之就越近。将孕妇体重作为一个调节因素，参与筛查危险度的计算，能提高筛查效率。临床医生填错体重也经常发生，特别是非专职医生，因为未经过产前筛查专门培训，他们常忽视体重是一个重要指标，估计或随意填体重是常事，因此，在看到唐氏综合征筛查阳性，又是非专职医生开的申请单时，应特别注意核对孕妇体重，如有误，应及时纠正。
10.结语
唐氏综合征的筛查的质量控制是一个复杂的体系。分析前、分析中和分析后的质量控制都认严格做好，上述提到的问题是我们实验中必须注意的问题，特别是试剂盒使用前的质量确认和标准曲线的选择尤为重要，是我们实验成功的关键。另外，孕妇孕周、年龄、体重等，一旦阳性，必须认真进行核对，应成为常识，以便及时发现错误及时纠正。唐氏综合征的筛查是近几年才开展的项目，质量控制某些方面还存在经验不足，因此，我们平时也应多与同道交流，或多看有关这方面的质控文献，认真学习别人的质量控制经验，以防唐氏综合征筛查质量控制的隐患发生。
参考文献
[1]王治国，李小平，武平原，等12003年全国产前筛查实验室质量
评价[J]1中国预防医学杂志,2004,5(6):4821
[2]陈宇1加样方式影响EL I S A检测抗HCV结果[J]1临床检验杂
志,1996,14(3)∶151.
[3]田昱，邹荣良，陆伟石1四甲基联苯胺作原的EL I S A两种波长
测定[J]1临床检验杂志,1995,13(3):1401
[4]郑杯竟，邢，主编1免疫检验与临床疾病安全输血[J]1北京
医科大中国协和医科大联合出版,1997.2651
[5]李志勇，戴淑惠，任小英1孕中期妇女血清标志物测定筛查唐氏
综合征[J]1中国医学研究杂志,2006,6(9):9861
[6]程姝娟，等1唐氏综合征筛查方法[J]1国外医学计划生育分册,
1999,18(2):231
收稿日期:2007-12-12
(上接第11页)
[7]王国华，左常婷，王立俊.I L-2、I F N-Y与复发性流产的相关性
研究[J].山东大学学报：医学版,2007,45(7):702-704.
[8]Meegdes BH,I ngenhoes R,PeetersLL,et al.Early p regnancy wast2
age:relati onshi p bet w een chori onic vascularizati on and e mbryonic de2 vel opment[J].Fertility and Sterility,1988,49(2):216-220.
[9]Choi HK,Choi BC,Lee SH,Ki m J W.Exp ressi on of angi ogensis and
apop t osis-related genes in chori onic villi derived fr om recurrent p regancy l oss patient[J].Mol Rep r od Dev.2003Sep,66(1):24. [10]Girardi G,Yarilin D,Thor man J M.Comp le ment activati on induces
dysregulati on of angi ogenic fact ors and caused fetal rejecti on and gr owth restricti on[J].J Exp Med,2006Sep4,203(9):2165-75. [11]谭兵兵，等.胎盘绒毛血管生成状况及VEGF,MMP-2和MMP
-9表达与早期自然流产的关系[J].生殖与避孕,2006,(03). [12]高红军，等.血管新生调节因子VEGF及其受体在恒河猴正常妊
娠和药物流产胎盘中的表达[J].中国计划生育学杂志,2005,
06.
[13]唐薇，等.米非司酮对人早孕期绒毛中滋养细胞血管内皮生长
因子表达的影响[J].实用医学杂志,2006,22(6):645-647. [14]叶喜阳，等.反复自然流产血清及绒毛组织中NO含量和NOS活
性和血清中VEGF含量[J].中国妇幼保健,2004,(08).
[15]Kr okier II.Pr oducti on and recep ti on of gr owth fact ors in the p lacenta
during physis ol ogical and gest osis comp licated p regnancy[J].B i omed Khi m,2007Jan-Feb,53(1):86-90Russian.
收稿日期:2008-02-10
>范玮琪怀孕
发布评论