甲钻胺胶囊评价性抽验的含量分析与比较研究
刘飞，，孙强巴然然2，孙涛2
（1.山东省食品药品审评认证中心，山东济南250014；2.泰安市食品药品检验检测研究院，山东泰安271000）
摘要：目的通过对省内流通和生产环节甲钴胺胶囊评价性抽验的含量分析与比较，为进一步防范风险、完善其生产工艺提供参考，同时为监管部门提供技术支持。方法按照《中国药典》2015年版（二部）检验标准进行含量测定和含量均匀度检验。结果各个厂家的甲钴胺胶囊，其含量测定结果在92.4%~108.1%之间，平均值为99.8%；其含量均匀度结果A+2.20S的范围为4.4~14.0，平均数据&2。结论各厂家生产的甲钴胺胶囊检验结果均符合规定，但各厂家结果有一定差异，且同一厂家不同批次的结果也存在较大差异。
关键词：甲钴胺胶囊；含量分析；高效液相谱法；避光操作
中图分类号：R927.2文献标识码:A文章编号：2095-5375（2021）02-0091-003
doi：10.13506/jki.jpr.2021.02.006
Content analysis and comparative study of Mecobalamin Capsules for evaluation sampling
Z/U Fez",SUN Qiang'，加Kanran2,SUN Tao2
(Z.SAan/ong Center/or Foo/an/Drug Evaluation an/Certification,Jinan2500Z4,CAina;
2.Taian Institute for Foo/an/Drug inspection an/Testing,Taian277000,CAina)
Abstract:Objective Through the analysis of the content of Mecobalamin Capsules in the provincial market and pro­duction enterprises,it provides reference for further risk prevention and improvement of its production process,and also pro­vides technical support for regulatory authorities to ensure the safety and effectiveness of public medication.Methods Ac­cording to the PAarmacopoeia of tAe People's Republic of CAina2015edition of the second part of the inspection standards for content determination and content uniformity test.Results The content of mecobalamin capsules from various manufac­turers was92.4%~108.1%,with an average value of99.8%.The content uniformity result A+2.20S ranges from4.4to 14.0,with an average of8.2.Conclusion The test results of mecobalamin capsules produced by various manufacturers all conform to the regulations,but the results of various manufacturers are somewhat different,and the results of different batches of the same manufacturer are also quite different.
Key words:Mecobalamin Capsules;Content analysis;HPLC;Dark operation
甲钻胺为周围神经病变的药物，属于维生素B12类，它通过促进神经细胞内核酸和蛋白质以及神经髓鞘的合成，从而修复受损伤的周围神经，目前已广泛应用于临床。从1948年Spies等人把维生素B q作为药物研究以来，维生素B q的研究取得飞速的发展，到目前为止，作为药物的维生素B q主要有：氰钻胺、羟钻胺、腺苷钻胺和甲钻胺。前两种维生素B q
在人体内没有生物活性；后两种辅酶型维生素B12已经实现人工合成，这为周围神经病变患者的提供了有力武器。在修复受损的神经组织方面，腺苷钻胺必须先转化为甲钻胺才能作为辅酶参与一碳单位循环，从而促进核酸、蛋白质和卵磷脂的合成［|-2］。
甲钻胺见光容易分解，性质不稳定，近几年，省外抽检的甲钻胺胶囊出现多次质量不合格，不符合规定项多为有关物质，而对甲钻胺相关研究较少［3-8］，为了进一步探索各个企业之间、同企业不同批次间、同批次间的质量差异以及受储存环境的影响，本文将甲钻胺胶囊列为本次试验的研究对象。试验按照现行标准开展检验，对试验数据进行总结,
作者简介：刘飞，男，主管药师，研究方向：药物质量控制及药品质量评价,E-mail：liufei-1012@163 通信作者：孙涛，男，主管药师，研究方向：药品质量评价,Tel：************,E-mail：tayjst@tom
并进行了探索性研究，以期进一步防范风险、完善其生产工艺和质量标准提供参考。
1试验材料
1.1检品情况现在全国共有12家药企生产甲钻胺胶囊，涉及12个批准文号，本次试验在全省范围内进行甲钻胺胶囊的评价性抽样，共抽取了全省药品流通和生产环节的检品47批，涉及批准文号7个，占总批准文号数的58.3%，涉及生产企业7家，占全部生产企业数的58.3%。企业A共18批、企业B共16批、企业C共5批、企业D、E各3批、 企业F、G各1批，其中企业A和企业B市场占有率较高。
1.2试剂试药乙腈（赛默飞世尔科技中国有限公司，谱纯）；磷酸二氢钾（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）；磷酸（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）；氢氧化钠（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）；超纯水（自制）；甲钻胺（中国食品药品检定研究院，批号:100692-201805，含量：9
2.8%）。
1.3试验仪器高效液相谱仪（日本岛津LC-2030,SPD-20A紫外-可见分光检测器以及LC So­lution谱工作站）；电子分析天平（梅特勒XS205DU型，梅特勒XE104型）；pH计（梅特勒PE20型）。
2试验方法
2.1试验标准按照《中国药典》2015年版（二部）甲钻胺胶囊检验标准，进行含量测定和含量均匀度检验项目的试验。试验在避光（小于5Lx）条件下完成。
2.2谱条件及系统适用性试验Waters Sunfire C18谱柱（4.6mm X250mm,5fim）；以0.03 mol-L-1磷酸二氢钾（用0.2mol-L-1氢氧化钠溶液或磷酸调节pH值至4.5）：乙腈（84：16）为流动相；检测波长：342nm；流速：1.0mL•min-1；柱温:30°C；进样量：20iL。
取甲钻胺对照品10.08mg，置20mL量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，在自然光下放置10 min，过滤，进样201L，调节流速使甲钻胺峰保留时间约为12min，甲钻胺峰与羟钻胺峰（相对保留时间约为0.2）的分离度大于20[3]。
2.3溶液的制备对照品溶液的制备：精密称取甲钻胺对照品10.52,10.38mg，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
含量测定的供试品溶液制备：取供试品25粒，倾出内容物，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于甲钻胺5mg），精密称定，置100mL量瓶中，加流动相70mL，超声使甲钻胺溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
含量均匀度的供试品溶液制备：取供试品1粒，将内容物倾入10mL量瓶中，囊壳用流动相分3次洗涤，洗液并入量瓶中，加流动相7mL，超声使甲钻胺溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
3试验结果
3.1含量测定经检验47批次甲钻胺胶囊均符合规定。含量测定结果在92.4%~108.1%之间，平均值为99.8%。
其中，企业A共18批，其含量测定结果在92.4%~107.5%之间，平均值为99.1%，最高值和最低值相差15.5%；企业B共16批，其含量测定结果在96.4%~108.1%之间，平均值为100.6%，最高值和最低值相差11.7%；企业C共5批，其含量测定结果在93.8%~101.6%之间，平均值为96.7%；企业D共3批，其含量测定结果平均值为100.2%；企业E共3批，其含量测定结果平均值为103.0%；企业F1批，其含量测定结果为100.2%；企业G1批，其含量测定结果为102.0%。
3.2含量均匀度经检验47批次甲钻胺胶囊均符合规定。A+2.20S的范围为
4.4~14.0，平均数据&2。
其中，企业A共18批，其含量均匀度测定结果在4.4~14.0之间，平均值为7.3；企业B共16批，其含量均匀度测定结果在5.4~11.2之间，平均值为8. 5；企业C共5批，其含量均匀度测定结果在7.3~ 11.2之间，平均值为9.0；企业D共3批，其含量均匀度测定结果平均值为9.4；企业E共3批，其含量均匀度测定结果平均值为10.1；企业F1批，其含量均匀度测定结果为9.2；企业G1批，其含量均匀度测定结果为5.4。
4结果分析及讨论
按标准进行检验，合格率为100%，质量状况较好。考察同一厂家多批次含量结果，通过比较批次间的差别可以分析出该企业的工艺成熟程度，需要完善的工艺程序。考察含量均匀度主要是对该工艺所生产出的产品验证其均匀度，使含量能达到良好的均一性。企业A共18批，其含量测定结果在92.4%~ 107.5%之间，平均值为99.1%，最高值和最低值相差15.5%，最低92.4%（含量均匀度12.5）、最高107.5%（含量均匀度12.0）、次高105.1%（含量均匀度14.0），含量结果的极值相对其含量均匀度数据也是高值，说
明其工艺中混匀效果及填充质量有待进一步考察研究；企业B共16批，其含量测定结果在96.4%-108.1%之间，平均值为100.6%，最低96.4%(含量均匀度10.5)、最高108.1%(含量均匀度11.2)，该企业除去这2批次，其余批次均在100%左右，说明其工艺中混匀效果较好，但应注意个别批次的数据；企业C共5批，其含量测定结果在93.8%-101.6%之间，平均值为96.7%，该企业平均含量较低，企业应注意在生产工艺中原料投料环节；由于企业D、E、F、G检品批次较少，不能做很
好地归纳分析。由于该品种的含量均匀度普遍较高，除去该品种是小规格的因素外，应格外注意该品种生产工艺中胶囊填充环节的填充效果。试验结果表明，各厂家结果有一定差异，且同一厂家不同批次的结果也存在较大差异。在保证现有质量的前提下，需要进一步防范风险、完善该品种的生产工艺，提高产品质量。
(上接第73页)是肿瘤免疫的重要细胞因子。IL-2能增强T细胞的杀伤活性，不仅能在体外直接杀伤肿瘤细胞L7J，并可诱导T细胞分泌IFN-y、TNF、CSF等细胞因子增强抗肿瘤活性冈。本实验研究结果表明，复方丹皮酚纳米乳可有效提高裸鼠血清中的IL-2含量，从而减少体内的肿瘤细胞。TNF-a是一种由激活的巨噬细胞产生的可直接杀伤肿瘤细胞的细胞因子，也是迄今为止发现具有杀伤肿瘤细胞活性最强的细胞因子。有研究报道, TNF-a能够激活CD8+T细胞、NK细胞及LAK细胞等释放穿孔素和ifn-y，从而对肿瘤细胞发挥毒性作用，促使肿瘤的消退L9-10J o本实验结果表明，复方丹皮酚纳米乳可通过提高裸鼠血清中的TNF-a含量，增强抗肿瘤效应。
综上所述，复方丹皮酚纳米乳可抑制肿瘤细胞增殖，促进细胞因子IL-2和TNF-a表达，初步揭示了其抑瘤作用机理可能与免疫调节有关。本实验研究结果显示复方丹皮酚纳米乳的抗肿瘤作用以高剂量水平效果最佳，由于实验过程中剂量设置范围较窄，并不能确定复方丹皮酚纳米乳的最佳剂量，对其抗肿瘤作用机制也仅进行了初步探讨，所以复方丹皮酚纳米乳对人源肺癌A549裸鼠移植瘤的最佳剂量和抗肿瘤作用机制仍需进一步研究。参考文献：
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