时间：45分钟　满分：100分
一、选择题(7小题，每小题2分，共14分)
1．下列关于灭菌和消毒的说法不正确的是(  )
A．灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B．消毒和灭菌的条件、结果、方法是相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等
答案　B
解析　灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能杀死部分微生物，不能杀死芽孢和孢子。
2．大多数微生物的扩大培养，利用的都是牛肉膏蛋白胨固体培养基。下表所示牛肉膏蛋白胨培养基的成分及含量。相关叙述错误的是(  )
夏如芝图片
成分
牛肉膏
蛋白胨
氯化钠
琼脂
蒸馏水
含量
5 g
10 g
5 g
20 g
1000 mL
(定容体积)
A.该培养基为微生物提供维生素的有牛肉膏、蛋白胨
B．该培养基为微生物提供氮源的有牛肉膏、蛋白胨
C．该培养基为微生物提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨
D．该培养基能为微生物提供无机盐的只有NaCl
答案　D
解析　牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、维生素以及磷酸盐等，其中磷酸盐属于无机盐。
3．能够测定样品活菌数的方法是(  )
A．稀释涂布平板法    　baby和跑男里的都睡过吧    B．直接计数法
C．质量法      D．比浊法
答案　A
解析　直接计数法是利用特定的计数板，在显微镜下计算一定容积量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定范围内，悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。
4．使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的目的是(  )
①用液体选择培养基可获得大量纤维素分解菌　②用液体培养基便于稀释涂布平板　③纤维素分解菌只能在液体培养基中生长　④用液体培养基可鉴别纤维素分解菌
A．①②      B．①③
C．②④      D．③④
答案　A
解析　使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长；鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基。
5．[2016·苏州质检]分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(  )
选项
尿素
琼脂糖
葡萄糖
硝酸盐
三天能去哪旅游A
＋
＋
＋
＋
B
－
－
－
－
C
＋
＋
＋
－
房地产策划师培训D
＋
－
－
＋
[注]　“＋”表示加入，“－”表示不加。
答案　C
解析　分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，不能添加硝酸盐。
6．下列关于微生物培养基的叙述，错误的是(  )
A．制备固体培养基，可以在液体培养基中加入凝固剂琼脂
B．微生物在固体培养基表面生长形成的菌落，可以用肉眼观察到
C．所有培养基都含有相同的水、碳源、氮源和无机盐等四类物质
D．培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
答案　C
解析　微生物在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落；培养不同的微生物，所需
配方存在差异；培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素。
7.研究者从冰川土样中分离获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株，为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株，最可行的做法是(  )
A．用紫外线照射青霉菌菌株，再进行筛选
B．将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培养，再进行筛选
C．将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株，再进行筛选
D．设置培养基中各种营养成分的浓度梯度，对青霉菌菌株分别培养，再进行筛选
答案　A
解析　基因突变是不定向的，紫外线处理后再进行筛选有可能获得脂肪酶活性更高的菌株。
二、非选择题(8小题，共86分)
8．(13分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：
(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
蒸馏水
5.0 g
10.0 g
5.0 g
20.0 g
定容至1000 mL
其中提供氮源的是________；提供碳源的主要物质是________。
(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止__________________。
(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________中灭菌，压力100 kPa，温度________，时间________。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应________。
南诏国
(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入________。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。
(5)河南省旅游景点从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯________(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环________后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入________℃冰箱中保藏。
答案　(1)牛肉膏、蛋白胨　牛肉膏
(2)比例　用玻棒搅拌　琼脂糊底引起烧杯破裂
(3)高压蒸汽灭菌锅　121 ℃　15～30 min　废弃
(4)适量水
(5)外　冷却　4
解析　凡能提供所需氮元素的物质为氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止
琼脂糊底而导致烧杯破裂。玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121 ℃条件下，灭菌15～30 min。酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。灼烧冷却后再蘸取菌种，否则会烫死菌种，造成实验失败。
9. [2016·江苏南京质检](12分)烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。