07食品营养2 张颖芬 200730600630
槐花米为豆科槐属植物槐树（Sophora japonica L）的花蕾，自古用作止血药物。吐血，痔疮便血、子宫出血、鼻血等症，所含主要成分为芸香苷，又称芦丁（Rutin，维生素P），其含量高达12～16%，有调节毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药，如复方芦丁，也作为高血压的辅助药物。
一、目的要求
1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。
2．掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层检查等手段在苷类结构鉴定上的作用。
3．通过UV、IR、HNMR和MS图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的作用。
二、已知重要成分性质：法定婚假
1． 芦丁（芸香苷，航天员在太空喝水rutin）
江钦良淡黄针晶，水中结晶者含3分结晶水，C27H30O16·3H2O 100mmHg和110℃加热12小时后，变为无水物，无水物于25℃变棕，115～7℃软化，214～5湖北兴化℃发泡分解，1g芦丁溶于约300ml冷水，200ml沸水，7ml沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。
槲皮素-3-O-葡萄糖-O-鼠李糖
2． 槲皮素（Guereetin）
为芦丁的苷元，C15H10O7，MW302.23；含二分子结晶水为黄针晶，（稀乙醇），5～7℃失水，314℃解，1g溶于290ml无水乙醇、23ml沸乙醇，溶于冰醋一般在碱水中溶解显
黄，几不溶于水。
3． 皂苷（Saponin）
粗品为白粉末，mp 210℃～20℃（dec）。易溶于吡啶。能溶于200倍的甲醇，酸水解得下列两种苷元及糖。糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。
（1）白桦酯醇（Betulin）无针晶，mp215～2℃，能溶于醋酸，丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。
（2）槐花二醇（Sophoradiol）无针晶，mp219~20℃或224℃，溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇、难溶于水。
三、提取分离和纯化
蔡明的老公是
注2：加石灰乳既能达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中大量的粘液质和酸性树脂（形成钙盐沉淀），但pH不能过高和长时间煮沸，因为会导致芦丁的降解。
注3：pH过低会使芦丁形成锌盐而降低收率
四、芦丁的薄层层析鉴定
吸附剂：青岛硅胶G（10~400）以0.4%CMC-Na水液制板，105℃活化1小时。
展开剂： CHCL3-MeOH-HCOOH（15：5：1）
显剂：1%FeC13和1%K3[Fe（CN）6]水溶液，应用时等体积混和。
五、实验结果
1.制得芦丁的得率
制得芦丁精制品0.04g丁凯乐扮演者，计算产率，为0.2%。
2.芦丁的薄层层析鉴定结果
点板时只在薄层板的中间出现一个点，Rf值为0.357。
六、结果与讨论
1. 在本次实验中，加入硼砂，能保护邻二酚羟基，不被氧化破坏的作用，提取时加入硼砂，产品质量要好些，产率也会相对高一些。
2. 在刚开始实验时加石灰乳的作用：既能达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中大量的粘液质和酸性树脂（形成钙盐沉淀），但pH不能过高和长时间煮沸，因为会导致芦丁的降解，降低产品收率。
3. 在使用浓盐酸调节溶液pH值时，须慢慢滴加，保证pH在4左右，pH值过低会使芦丁形成锌盐而降低收率。
4. 过滤时，使用尼龙布过滤，速度会快一些，但是所得滤液仍会有少量沉淀，过滤效果不
大理想。使用布氏漏斗抽滤时，使用一层滤纸很容易穿透，使用两层滤纸则容易造成堵塞，过滤速度极慢，基本上都只能一滴一滴进行，过滤要持续两个小时，很浪费时间。特别在重结晶后，溶液不能趁热过滤，有很多产品都在滤纸上析出，大大影响了产品收率。
5. 产品过滤时的改进方法：在使用尼龙布过滤后，可再次用尼龙布再过滤一次，减少固体杂质，再用布氏漏斗，用双层滤纸过滤，这样溶液就会减少很多杂质，过滤速度也会得到提高，最后产品的收率也会提升。
6. 本次实验产品的收率很低，其原因有：在提取时，高温加热会使部分芦丁分解；酸沉淀时，静置的时间还不够长，只有两个小时（通常都要达到六个小时），导致产品析出不完全，影响收率；在趁热过滤时，过滤速度不够快，部分产品在滤纸上析出，降低产率。
7. 本次实验得到的产品，点板之后只有一个点，说明实验所得产品较纯，若需要进一步检验，可以用纯度较高的芦丁标准品与实验所得样品点板进行比较，看看是否同种物质。也可以在一块板上两边同时分别点上芦丁标准品和实验所得产品，并且在中间上同时点上两种溶液，用展开剂展开后看看是否在同一高度，并且中间的是否是同一个点，如果都在同一高度，并且中间只有一个点，基本可以判断是同一种物质。
8. 通过本次实验，基本掌握了酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法，以及影响其收率的因素，懂得了薄层层析法用来判断和鉴定物质的方法。
发布评论