一、    手和皮肤黏膜消毒效果监测
1华晨宇邓紫棋恋情采样时间：在消毒后立即采样。
2、    采样方法
(1)手的采样:被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双 手指屈面从指根到指端往返涂擦 2次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采 样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 10ml含相应中和剂的无菌洗 脱液试管内，立即送检。
(2)皮肤粘膜采样：用5cm >5cm的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相
应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5次，并 随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入    10ml含相应中和剂的无菌
洗脱液的试管内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。
3、    检测方法
刘恺威档案(1)细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸 取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 2个平皿，内加入已溶化的 45C〜48kG是多少斤C的营养琼脂15ml〜18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 36C±C 温箱培养48h，计数菌落数。
采样结果计算方法：
平板上菌落数 >稀释倍数
细菌总数(cfu/cm2)=   
米样面积(cm2)
(2)致病菌检测:致病菌的检测依据污染情况进行相应指标检测的原则执行。
4、    结果判定
(1)消毒洗手
I、U类区域工作人员：细菌总数 <5cfu/cm2并未检出金黄葡萄球菌、大肠杆 菌、铜绿假单抱菌为消毒合格。
m类区域工作人员：细菌总数 < 10cfu/cm2并未检出金黄葡萄球菌、大肠杆菌 为消毒合格。
W类区域工作人员：细菌总数 < 15cfu/cm2并未检出金黄葡萄球菌、大肠杆菌 为消毒合格。
母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门菌、大 肠杆菌、溶血性链球菌、金黄葡萄球菌为消毒合格。
(2)皮肤黏膜：参照手的卫生学标准执行。
5、    ^注意事项
皮肤粘膜采样处，若表面不足 5cm >5cm可用相应面积的规格板采样。
二、    物品和环境表面消毒效果的监测
1、    采样时间：在消毒处理后进行采样。
2、    采样方法：用5cm ＞5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积
＞ 100cm2连续采样4个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子    1支，在
规格板内横竖往返均匀涂擦各 5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉 拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
3、    检测方法
⑴细菌总数检测：检测方法将采样管在混匀器上振荡    20s或用力振打80次，用
无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 2个平皿，内加入 已溶化的45 C〜48 r的营养琼脂15ml〜18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 36C±C温箱培养48h,计数菌落数。。小型物体表面的结果计算，用    cfu/件表
示。
(2)致病菌检测：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标检测的原则执行。
4、    结果判定
细菌总数＜ 5cfu/cm2并未检出致病菌为消毒合格。 总数＜ 10cfu/cm2并未检出致病菌为消毒合格。 总数＜ 15cfu/cm2并未检出致病菌为消毒合格。
新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门
I、U类区域： m类区域细菌： W类区域细菌：
母婴同室、早产儿室、婴儿室、 菌。
5、    注意事项
(1)采样时间:在灭菌处理后，存放有效期内采样。
(2)样本量及处理:按消毒技术规范3.17.5.2 (1)执行。
三、空气消毒效果的监测
1、    采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。
2、    采样方法：平板暴露法
(1)布点方法:室内面积W 30m2设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距 墙壁1M处；室内面积＞ 30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m 处。
(2)采样方法：将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度
为距地面1.5m采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露    5mi n，盖好立即送
检。
3、    检测方法：按照消毒技术规范 2.1.3要求进行。 平板暴露法结果计算公式：
细菌总数(cfu/m3) =50000N/ (A XT)
cm2）; T为平板暴露时间（min） ; N为平均菌落数
式中A为平板面积（
张家豪黑社会
（cfu ）。
< 10cfu/m3或0.2cfu/平板），未检出金黄葡萄球菌、溶血性
< 200cfu/m3或 4cfu/平板），未检出金黄葡萄球菌、溶血性
<500cfu/m3或 10cfu/平板）,未检出金黄葡萄球菌、溶血性
4、    结果判定 I类区域：细菌总数 链球菌为消毒合格； n类区域：细菌总数 链球菌为消毒合格； m类区域：细菌总数 链球菌为消毒合格。
5、    注意事项
采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止    10min进行采样。
四、医疗器械灭菌效果的监测
1、    采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。
2、    无菌检验
无菌检验是指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及 适合于无菌间查的其它品种是否无菌的一种方法。
无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避 免微生物
污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。
（1）    无菌检验前准备
和平之舟电视剧1）    洗脱液与培养基无菌性试验：无菌试验前3d，于需-厌养培养基与霉菌培养基内 各接种1ml洗脱液，分别置30C〜会计证怎么考35r与20C〜25E培养72h,应无菌生长。
2）    阳性对照管菌液制备：
1在试验前一天取金黄葡萄球菌［CMCC（B）26003］的普通琼脂斜面新鲜培养
物，接种1环至需-厌氧培养基内，在30C〜35r培养16h〜18h后，用0.9%无菌 氯化钠溶液稀释至10 cfu/ml〜100cfu/ml;
2取生抱梭菌［CMCC（B）64941］的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物    1接种环种于
相同培养基内，于30r〜35r培养18h〜24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至
10 cfu/ml 〜100cfu/ml;
3取白念珠菌［CMCC （F） 98001］真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1接种环种 于相同培养基内，于20r〜25r培养24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至 10cfu/ml 〜100cfu/ml。
（2） 无菌操作：取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械 5件直接浸入6管需-厌氧 培养管（其中一管作阳性对照）与4管霉菌培养管。培养基用量为15ml/管。
1）取5付注射器，在5ml洗脱液中反复抽吸5次，洗下管内细菌，混和后接种需- 厌养菌培养管（共6管，其中1管作阳性对照）与霉菌培养管（共4管）。接种量：
1ml注射器为0.5ml, 2ml注射器为1ml, 5ml〜10ml注射器为2ml, 20ml〜50ml 注射器为5ml，培养基用量：接种量为2ml以下为15ml/管，接种量5ml为40ml/ 管。
2)手术钳、镊子等大件医疗器械取2件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采 样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需-厌氧培养管(共 6管，其中1管作阳性对照)与霉菌培养基(共4管)。接种量为1ml/管，培养基用 量为15ml/管。
(3)培养:在待检样品的需-厌氧培养管中，接种预先准备的金黄葡萄球菌阳性 对照管液1:1000稀释1ml，将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于 30C〜 35C培养5d,霉菌培
养管与阴性对照管于 20C〜25C培养7d,培养期间逐日检 查是否有菌生长，如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观
上判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养 48h〜72h后，观察是否再现混浊或在斜面上有无菌落生长，并在转种的同 时，取培养液少量，涂片染，用显微镜观察是否有菌生长。
(4)
2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判
结果判定:阳性对照在24h内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生 长，如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长，判 为灭菌合格；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显混浊并证实有菌生长，应重 新取样，分别同法复试 为灭菌不合格。
3、注意事项
(1)
6h,若样品保存于0C〜4C,则不得超过24h。
100cm2取全部表面；被采样本表面积 > 100cm2取
送检时间不得超过
(2)被采样本表面积V
100cm2。
(3)若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。