关于G试验和GM试验不可不知的那些事⼉……作者⼁王⽣成
侵袭性真菌病(IFD)是指在宿主免疫功能低下或缺陷时,条件致病性真菌侵⼊⼈体,在组织、
香港明星黑社会>安藤政信器官或⾎液中⽣长、繁殖,并导致炎症反应及组织损伤的疾病。随着检测及诊断技术较前明显
北京机场提⾼,且因器官移植、⾎液病、恶性肿瘤、慢阻肺、⽀⽓管扩张等疾病,以及长期应⽤⼴谱抗
⽣素、糖⽪质激素、免疫抑制剂等多种因素影响,侵袭性真菌病(IFD)的患病率、发病率和病
死率较前明显增加。
因为侵袭性真菌病的临床表现缺乏特异性,确诊需要组织病理学证据,⽽组织病理学取材复杂
且风险⼤,如很多患者伴有严重的粒细胞缺乏和⾎⼩板减少,难以耐受组织活检;传统真菌检
测⽅法(如痰及⽀⽓管灌洗液的真菌涂⽚和培养)阳性率低和检出时间⽐较滞后;肺部真菌感
染影像学(胸部⾼分辨 CT)⽅⾯有相对价值的“⽉晕征”出现率只占侵袭性真菌病的33%~
60%,且这⼀特征性改变仅在感染的最初5 天内出现,⼤多数在l 周内消失。
张一山宋妍霏
所以,临床上⾮常迫切希望能有更加简便、快速、创伤性⼩、耐受性好、敏感性和特异性均较
⾼的检测⽅法,帮助临床早期诊断和及时。因此,近些年来,G试验和GM试验得到了⼤家
的关注和热门推崇,其在临床上⽤于诊断侵袭性真菌病具有⾮常重要的价值和意义,但仍有⾮
常多的⼈尚对此两项检查了解甚微,且对真菌病缺乏意识和认识,笔者也经常遇到因此问题⽽
被邀请会诊。
真菌是什么?
介绍G试验和GM试验之前,让我们⼀起来简单复习⼀下真菌是什么?真菌是⼀种真核⽣物,⾃
成⼀门,和动物、植物、细菌相区别。相较于其他三种⽣物的最⼤不同之处是,真菌细胞壁的
主要成分是⼏丁质(亦称甲壳素)、纤维素、葡聚糖、⽢露聚糖等,这些成分都是单糖的聚合
物。
G试验是什么?
G试验是⽤于检测真菌细胞壁主要成分之⼀的(1-3)-β-D葡聚糖,因为其他微⽣物、动物及⼈的细
胞成分和细胞外液均不含有此成分,且⼈体发⽣侵袭性深部真菌感染过程中,(1-3)-β-D葡聚糖
可持续释放⼊⾎及其他体液中,使其含量增⾼(浅部真菌感染⽆类似现象)。在临床表现、微
⽣物学证据及胸部⾼分辨率CT出现征象前,⾎清中(1-3)-β-D葡聚糖⽔平已经⾼于正常值(⽐发
热或其他临床症状平均早4~5天,⽐胸部⾼分辨率CT平均早9.3天),且不受机体免疫状态影
响。
因此,⾎液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据,对除了隐球菌和接合菌
之外的所有侵袭性深部真菌感染的早期诊断具有重⼤意义,即可⽤于念珠菌属、镰⼑菌属、曲
霉属、青霉/拟青霉、⽑孢⼦菌等真菌所致侵袭性感染的诊断,能很好的指导临床及早使⽤抗真
菌药物,尤其是对于念珠菌⾎症,G试验是⾸选检验。
此试验之所以叫G试验,是因为(1-3)-β-D葡聚糖可特异性激活鲎变形细胞裂解物中的G因⼦,引
起裂解物凝固,因此得名。
G试验的缺点是仅可判定是否存在真菌感染,但不能确定真菌的具体菌种,且接合菌(⽑霉、根
霉等)或隐球菌感染时,G试验为阴性。
虽然G试验不能确定具体菌种,但(1-3)-β-D葡聚糖的升⾼值可能有⼀定的鉴别意义,有研究显⽰
念珠菌感染者的⾎清(1-3)-β-D葡聚糖均值为755 pg/mL;曲霉感染均值为1103 pg/mL;镰⼑霉中国四大名酒
感染者均值为1652 pg/mL。⽽对于⼝腔和其他器官的真菌定植患者,⼀般不超过20 pg/mL。
很多试验都存在假阳性、假阴性的情况,G试验和GM试验也不例外。
⾎清G试验出现假阳性的常见情况
①静脉制剂中含有葡聚糖,如⾎液制品(如⼈⾎⽩蛋⽩、⼈⾎球蛋⽩、凝⾎因⼦等),某些抗⽣素
(如多粘菌素、厄他培能、头孢噻肟、头孢吡肟、磺胺等)、蘑菇和植物制作⽽成的药品(如
黄芪多糖、⾹菇多糖、双⿈莲、⽣脉注射液等)以及注射过脂肪乳。
②医疗材料中含有葡聚糖,如纱布、⾎透时应⽤的纤维素膜等。
③导致检测结果异常的样品(⾼溶⾎、⾼脂、⾼胆红素、脂多糖等)。
④链球菌败⾎症患者。
⑤⾼免疫球蛋⽩(多发性⾻髓瘤患者)。
⑥导致检测结果异常的样品(⾼溶⾎、⾼胆红素、⾼脂、脂多糖等)。
⑦标本污染。
⑧术后和肝硬化患者未知的类似β-葡聚糖活性物质影响。
⑨多糖类抗癌药物。
⑩放化疗造成的粘膜损伤导致⾷物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进⼊⾎液等也可能造成假阳性。
⾎清G试验出现假阴性的情况
年审营业执照①不敏感菌:某些真菌,如接合菌(⽑霉、根霉等)的细胞壁不产(1-3)-β-D葡聚糖;隐球菌细胞壁有荚膜包裹致使D-葡聚糖释放不出,所以,这些真菌的G试验呈假阴性。因此,如果患者有相应临床症状及可能存在真菌感染的其他依据,但G试验阴性时,应要注意考虑到此两种真菌感染的可能。
②局灶性真菌感染:如局灶性曲菌病时,(1-3)-β-D葡聚糖很少被释放⼊⾎。
③抗真菌药物的使⽤。
什么是GM试验?
GM试验检测的物质是真菌细胞壁的另⼀个主要成分——半乳⽢露聚糖抗原(GM)。半乳⽢露聚糖是⼴泛存在于曲霉和青霉细胞壁中的⼀类多糖成分,菌丝⽣长时,半乳⽢露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原,可通过酶联免疫吸附试验法(ELISA)进⾏检测。GM 释放量与菌量成正⽐,因此,GM试验不仅可反映感染程度,还可以连续检测其值动态变化作为疗效的评估监测。
曲霉菌感染部位主要集中在肺部,鉴别曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性⽣长,关键在于其是否合成GM.如果痰液或肺泡灌洗液标本培养到曲霉菌且GM试验检测结果为阳性,即可诊断为曲霉菌侵袭性感染,尤其是对中性粒细胞缺乏宿主的侵袭性曲霉感染的敏感性和特异性均较⾼,具有重要的辅助诊断价值。
因此,GM试验在临床上主要⽤于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断,对于深部曲霉感染患者,⾎清GM试验增⾼可⽐影像学诊断早7天左右,⽐临床症状出现早5~8天,并可对⾎清、脑脊液、肺泡或⽀⽓管灌洗液进⾏检测,因⽽往往可以使诊断提前。
⽬前国内外对⾎清GM试验阳性阈值的标准意见仍未统⼀。欧洲普遍使⽤的判断标准为0.7~1.0 ug/L,美国 FAD 推荐敏感阈值为 0.5 ug/L,国内也多以0.5 ug/L作为标准。
GM试验的敏感性和特异性可受诸多因素影响。
GM试验可出现假阳性的情况
①使⽤半合成青霉素(尤其是哌拉西林/他唑巴坦)、免疫球蛋⽩、⾎液制品、⾼剂量肾上腺⽪质激素。
②化疗导致严重黏膜炎患者。
③新⽣⼉和⼉童(双歧杆菌定值、⾷⽤制品)。
④⾎液透析。
⑤⾃⾝免疫性肝炎等。
⑥⾷⽤可能含有GM的⽜奶等⾼蛋⽩⾷物和污染的⼤⽶等。
GM试验出现假阴性的情况
①释放⼊⾎循环中的曲霉GM(包括⽢露聚糖)并不持续存在⽽是会很快清除;
②以前使⽤了抗真菌药物;