革兰氏染原理和结果:1先用结晶紫染,菌体呈紫2再加碘液媒染,菌体呈紫3然后用乙醇脱,革兰氏阳细菌成紫,阴性细菌无4最后用番红复染,革兰氏阳性细菌呈紫,革兰氏阴性细菌呈红。 革兰氏染结果与细胞壁组成有关,革兰氏阳性细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,网络结构较密,含脂量又低,当他被酒精脱时引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小,从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出,故菌体呈紫;革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄,含量低,而脂类含量高,当酒精脱时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来,故革兰氏阴性细菌呈红。
立克次体支原体衣原体病毒:立克次体是介于细菌与病毒之间,许多方面又类似于细菌专性活细胞内寄生的原核微生物类。于正 支原体是介于细菌与立克次体之间又不具细胞壁的原核微生物 衣原体是介于立克次体与病毒之间,能通过细菌滤器,专性活细胞内寄生的一类原核微生物 病毒是一类具超显微的没有细胞结构的专性活细胞内寄生的实体,它们在活细胞外具有一般化学大分子特征,一旦进入宿主细胞又具有生命特征。
细菌放线菌属原核生物,细胞壁的主要成分是肽聚糖,脂多糖,酵母菌霉菌属真核生物,酵母菌细胞壁的主要成分是葡萄糖,甘露聚糖,霉菌细胞壁的主要成分是纤维素和几丁质,另
有少量的蛋白质和脂类。 细菌菌落:一般呈现湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜一致等。 放线菌与细菌有明显差别的菌落:干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,上有一层彩的“干粉”; 酵母菌:菌落与细菌相仿,呈现湿润、较透明,表面较光滑、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜一致等特点。 霉菌:外观上很易辨认,形态较大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状或毡状;
噬菌体是侵染细菌放线菌等细胞型微生物的病毒。根据噬菌体与宿主细胞的关系可分为烈性噬菌体和温和噬菌体两类。烈性噬菌体侵入宿主后,改变宿主的性质使之成为制造噬菌体的工厂,大量产生新的噬菌体,最后导致菌体裂解死亡的噬菌体。温和噬菌体进入菌体后因生长条件不同,可具有两条截然不同的可选择的生长途径。一条是与烈性噬菌体相同的生长路线,另一条是将其核酸整合到细菌染体上,该细菌细胞继续生长繁殖,并使宿主细胞溶源化的噬菌体。烈性噬菌体的生活周期与病毒早期生活周期基本相同,主要阶段有吸附侵入复制成熟和释放。
分离用苯做碳源和能源的菌纯培养物:1查资料,从中获取分菌的经验,查苯的化学性质并
建了标准的测量方法;2采样采取被苯污染的土壤并从中分离目的菌3富集培养,将采到的土壤在富集柱上驯化,不断提高苯的浓度4取适量富集土壤在以苯为唯一的碳源和能源的无机盐中培养,设对照,生长后测富集液的降解效果。5纯种分离和性能测定。将高效富集液进行稀释涂布,从中挑取单菌落并验证功能,是以苯为唯一碳源和能源的无机盐培养液培养,并测定其降解效果,到高效降解菌6进一步验证,进行传代测试,至少30代功能不丧失。
选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。如以纤维素作唯一碳源的培养基可分散到分解纤维素的微生物。分散酵母菌和霉菌时,可添加适量的青霉素、四环素或链霉素,以抑制细菌和放线菌的生长。
鉴别性培养基是在成分中加有能与目的菌的无代谢产物发生显反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜就能方便地从近似菌落中到目的菌菌落的培养基。EMB伊红美蓝,主要用于饮用水,牛乳的大肠杆菌的细菌学检验和遗传学的研究。其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。低酸度时二者结合
形成沉淀,起产酸指示剂作用。如大肠杆菌分解乳糖产生大量混合酸,可染上酸性伊红,伊红又和美蓝结合,菌落被染成深紫,从菌落表面的发射光中还可以看到绿金属闪光。
无氧呼吸,是指有机碳化合物经彻底或者不彻底氧化,所脱下来的电子经部分电子传递链,最后传给外源的无机氧化物(个别是有机氧化物)并释放较少能量 无氧呼吸:产物是酒精,乳酸等不完全氧化产物。反应的俩个阶段都在细胞质中进行。有氧呼吸:产物是二氧化碳,水等完全氧化产物。反应的一二阶段在细胞质中进行,第三阶段在线粒体中进行。发酵是微生物氧化的一种方式。呼吸:底物按常规方式脱氢后,经完整的呼吸链递氢,最终由分子氧接受氢并产生水和释放能量(ATP)的生物氧化方式。呼吸必须在有氧条件下进行。无氧呼吸:是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(少数为有机氧化物)的生物氧化。发酵:无氧条件下,底物脱氢后产生的还原力不经呼吸链而直接传递给某一中间代谢物的低效产能反应。
次级代谢是在一定的生长时期(一般是稳定生长期),微生物以初级代谢产物为前体合成的对微生物本身的生命活动没有明确功能的物质的过程。次级代谢产物与初级代谢产物
关系密切,初级代谢产物的关键性中间产物多半是次级代谢的前提,由于初级代谢为次级代谢提供前提,所以产生前体物质的初级代谢过程受到控制时,也必然影响次级代谢的进行,因此初级代谢还具有调节次级代谢的作用。
单细胞微生物典型生长曲线分为延滞期(适应期)、指数期、稳定期和衰亡期 4 个时期。 各个时期的特点是:停滞期:(1)细胞物质开始增加;(2)有的细胞开始不适应环境而死亡;(3)细菌总数下降;(4)停滞期末期,细胞代谢活动能力强,细胞中RNA含量高,嗜碱性强。对不良环境条件较敏感,呼吸速度、核酸及蛋白质的合成速度接近对数细胞,并开始细胞分裂。对数期:(1)菌体以几何数增加,增长速度快;(2)细胞代谢能力最强(3)细菌很少死亡或不死亡。稳定期:(1)生长速率下降,死亡率上升;(2)细胞数达到最大值,新生的细菌数和死亡的细菌数相当。 衰亡期:(1)死亡率增加,细菌少繁殖或不繁殖; (2)细菌常出现多形态、畸形或衰退型,有的会产生芽孢。在工业发酵和科学研究中迟缓期会增加生产周期而产生不利影响,因此需采取必要措施来缩短迟缓期。对数期的培养物由于生活力强,因而在生产上普遍用作“种子”,对数期的培养物也常常用来进行生物化学和生理学的研究。稳定期是积累代谢产物的重要阶段,如某些放线菌抗生素的大量形成就在此时期,因此如果及时采取措施,补充营养物或去除代谢物或改善培
养条件,可以延长稳定期以获得更多的菌体或代谢产物。
菌种衰退的根本的直接的原因是基因突变的自发突变。菌种衰退有一个质变的过程,菌株在生长繁殖过程中自发突变,其后代变异株中的负变株比例总是高于正变株;因此随着繁殖代数的增加负变株在整个菌中的比例逐渐增大,致使菌株的优良性能逐渐衰退。然而基因的自发突变不是没有原因的,只不过这些原因非人工有意而已,因此凡能引起基因突变的一切环境因素都可视为菌株衰退间接原因 基因突变所造成的菌株衰退具有可遗传性;二饰变主要是环境条件导致的,不发生遗传结构改变,只是在转录与翻译水平上的一种变化,没有遗传性,在解除相关环境因子后,改变了的性能可以恢复;他与衰退有本质的区别。生产菌株的杂菌污染也可导致菌株优良性能的衰退,但一旦菌株被分离纯化,优良性能即可恢复。
能引起原核微生物基因重组的主要方式有转化,转导,结合和原生质融合。转化:是指受体菌接受供体菌的DNA片段,经过交换将它组合到自己的基因组中,从而获得了供体菌部分遗传性状的现象,转化的受体菌成为转化子。特点(1)不需受体菌株和提供菌的接触(2)供体DNA不需要媒介的介导,处于感受态的受体菌直接吸收供体菌的DNA。转导:是指以噬
菌体为媒介,把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。转导又分为普遍性转导和局限性转导两类。特点:(1)不需要受体菌株和供体菌株的接触(2)供体DNA需要噬菌体的媒介作用。细菌结合:是指通过供体菌和受体菌完整细胞间性菌毛的直接接触而传递大段DNA的过程。特点(1)需要受体菌株和供体菌株接触(2)供体DNA通过结合管导入受体细胞。原生质体融合:是指通过人为的方法使遗传性状不同的两个细胞原生质体发生融合,并产生重组子的过程。特点(1)需受体菌株和供体菌的接触(2)需要通过化学因子诱导或电场诱导进行融合二亲原生质体。
汤飞凡,中国第一代医学病毒学家。在病毒学发展的早期,他用物理方法研究阐明病毒的本质。1955年他首次分离出沙眼衣原体,是世界上发现重要病原体的第一个中国人,也是迄今为止唯一的一个中国人。他对中国的生物制品事业的发展有不可磨灭的功绩。他在抗日战争期间和抗日战争胜利后两次重建中国最早的生物制品机构——中央防疫处,并创建了中国最早的抗生素生产研究机构和第一个实验动物饲养场。中华人民共和国成立后,他主持组建了中国最早的生物制品质量管理机构——中央生物制品检定所。
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