现代医学
Modern Medical Journal
2020，Dec；48（12）：1617-1620
［收稿日期］2020-03-12［修回日期］2020-11-02
［作者简介］强济香（1992），女，山西朔州人，在读硕士研究生。E-mail：570304061@qq．com
［通信作者］尤昕E-mail：xin_you@163．com
胎儿弯曲菌胎儿亚种菌血症一例
强济香1，金春梅1，陈丽婷2，尤昕1
（1．延边大学附属医院检验科，吉林延吉133000；2．海南省三亚市妇幼保健院检验科，海南三亚572000）
［摘要］本文报道了延边大学附属医院收治的感染胎儿弯曲菌胎儿亚种所导致的菌血症患者1例。按常规生化实验、16S rＲNA基因和ropB基因测序技术等对分离株进行了菌种鉴定，并构建了系统发育树，最终确定该菌株为胎儿弯曲菌胎儿亚种，并通过有效抗生素的对症，使该患者感染症状好转并出院。
［关键词］胎儿弯曲菌胎儿亚种；弯曲菌属；血培养；人畜共患病
［中图分类号］Ｒ535［文献标识码］B［文章编号］1671-7562（2020）12-1617-04
doi：10．3969/j．issn．1671-7562．2020．12．025
胎儿弯曲菌属是一种主要引起人肠外感染的病原
李倩资料体，主要致病菌株有胎儿弯曲菌胎儿亚种、胎儿弯曲菌
性病亚种和胎儿弯曲菌龟亚种［1］，我国胎儿弯曲菌引
起血流感染的主要菌型为胎儿弯曲菌龟亚种［2］，而胎
儿弯曲菌胎儿亚种鲜有报道。本例就血培养分离出胎
儿弯曲菌胎儿亚种报告如下。
1病例资料
患者，男，66岁，因“间断性腰下肢痛20余年，加
重4d”于2019年10月21日收入延边大学附属医院
疼痛科。该患者4d前双下肢疼痛突然加重，沿臀部
放射至小腿后侧及外侧，自行行走约100m可诱发疼
痛，就地休息后可缓解，左侧为甚。住院当天患者开始
腹痛伴体温升高，查体体温最高38．4ħ，脉搏100次·
min－1，呼吸22次·min－1，血压124/84mmHg。步态
跛行，双侧肾区有叩击痛，双侧格胫束压痛明显。辅助
检查：红细胞沉降率60．0mm·h－1，超敏C反应蛋白
243．24mg·L－1，白细胞计数17．44ˑ109L－1，中性粒
细胞百分比90．84%，Y-谷氨酰转肽酶1073U·L－1，
直接胆红素16．5μmol·L－1，天门冬氨酸氨基转移酶
58U·L－1，纤维蛋白原定量10．73g·L－1，尿微量白
蛋白＞0．15g·L－1，隐血3+，尿蛋白2+，尿胆红素
1+，尿胆原2+。腰椎磁共振示：L
5、S
1
椎间盘突出，
双侧椎间孔变窄。以临床表现和辅助检查相结合诊断为“腰椎管狭窄症”。急查血培养两套、全腹CT及泌尿系统彩超等，血培养示两套需氧瓶均检出胎儿弯曲菌胎儿亚种，考虑为胎儿弯曲菌胎儿亚种引起的菌血症，全腹CT示胆囊增大考虑为胆石症，泌尿系统彩超示肾囊肿。于当天经验性给予左氧氟沙星
每日1次静脉滴注，1周后患者体温降至36．5ħ。复查白细胞及中性粒细胞百分比均较前降低，分别为白细胞计数9．06ˑ109L－1，中性粒细胞百分比为80.60%，续当前方案抗炎对症。10月30日因手术需要转入肝胆外科，由于该患者有胆囊结石和肾囊肿，为减轻长期使用左氧氟沙星对胆道的不良反应和对肾脏的毒性作用，改用哌拉西林舒巴坦钠每日2次静脉滴注。11月1日行腹腔镜下胆囊切除术加美容缝合术，为预防感染继续给予哌拉西林舒巴坦钠静脉滴注至11月4日，患者一般状态可，无明显不良主诉，于11月5日出院。
2微生物学检查及菌株鉴定
2．1细菌培养
无菌采集静脉血分别接种于需氧瓶和厌氧瓶中，每瓶不少于5ml，用BACTEC9120系统进行血培养，阳性报警后转种于哥伦比亚血琼脂平板和中国蓝平板上，放置于5．0%CO2培养箱中，培养的单个菌落用于以下实验。
2．2细菌鉴定、16S rＲNA基因测序和ropB基因测序方法
将分离的单个菌落经VITEK MS质谱仪（购于梅里
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埃公司）进行鉴定，并从单个菌落中提取细菌基因组DNA 进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCＲ）扩增，16S rＲNA基因的扩增采用通用引物27f（5'-AGAGTTTGATCCTGGCT CA G-3'）和1492r（5'-TACGGC TACCTTGTTACGACTT-3'），PCＲ反应体系中包括10ˑbuffer5μl，2．5mmol·L－1dNTP4μl，Taq酶1U，10μmol·L－1正反向引物各1μl，模板DNA3μl，最后补ddH2O至50μl。循环参数如下［3］：先95ħ预变性5min，再按95ħ45s，54ħ30s，72ħ45s，共35个循环。rpoB基因的扩增采用引物rpoB-L（5'-CCAATTTATGGATCAAA C-3'）和rpoB-Ｒ（5'-GTTG-CATGTTNGNACCCAT-3'），PCＲ反应体系中包括10ˑbuffer5μl，2．5mmol·L－1dNTP4μl，Taq酶1U，10μmol·L－1正反向引物各1μl，模板DNA3μl，最后补ddH2O至50μl，循环参数如下：先94ħ预变性3min，再按94ħ30s，54ħ30s，72ħ30s，共35个循环［4-5］。PCＲ产物在含有溴化乙锭的1．5%琼脂糖凝胶中电泳，20min后在全自动凝胶成像系统中观察结果，出现目的条带为扩增成功。扩增产物送北京擎科新业生物技术有限公司进行测序分析，测序仪器为ABI3730xl，方法为Sanger测序法，序列结果用美国生物技术信息中心（National Center for Biotechnology In-formation，NCBI）数据库进行Blast分析。
2．3菌株的分离培养及形态特征
患者血培养两瓶需氧瓶分别于50．45h、56．00h 后报阳，后接种于哥伦比亚血琼脂平板和中国蓝平板上，48h后发现哥伦比亚血琼脂平板上出现肉眼可见的直径为1 2mm、微凸、半透明、湿润、不溶血的菌落（图1），中国蓝平板未见细菌生长。革兰氏染镜检发现革兰氏阴性杆菌，菌体细长，弯曲呈弧形、S形或海鸥展翅状（图2）。
2．4分离菌株的生化特征
分离菌株的生化特征为氧化酶阳性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，脲酶阴性，硫化氢还原试验阴性，奈啶酮酸耐药，1%甘氨酸生长试验阳性，符合胎儿弯曲菌胎儿亚种的生化特征［2］。
2．5细菌鉴定和基因测序结果
哥伦比亚血琼脂平板上的菌落鉴定结果：胎儿弯曲杆菌，置信度为99．9%，未鉴定到亚种。后经过测序，序列结果用NCBI数据库进行Blast分析比对。16S rＲNA基因序列鉴定结果为：胎儿弯曲菌胎儿亚种和胎儿弯曲菌性病亚种的鉴定度均为99．78%，无法确定是何亚种；rpoB基因序列鉴定结果为：胎儿弯曲菌胎儿亚种，鉴定度为99．61%；
通过邻接法绘制系统进图1
哥伦比亚血琼脂平板培养的菌落特征
图2弯曲菌革兰染菌体形态特征（ˑ1000）
化树（图3），结果显示分离株与胎儿弯曲菌胎儿亚种的同源可能性大。故该菌最终鉴定为胎儿弯曲菌胎儿亚种。
3讨论
弯曲菌属是一种人畜共患性的病原体，它一般寄生于牛、羊等动物的肠道内，通过粪口途径传播给人类［6］，是临床样本中比较少见的革兰氏染阴性呈海鸥展翅状或S形的弯曲杆菌。它是一种微需氧菌，最适生长条件为体积比5%O2、10%CO2、85%N2的气体环境，在普通条件下无法生长。而且其生长速度慢，一般需要48 72h才能培养出肉眼可见菌落［7］。由于该菌培养条件及检测方法的限制，国内关于该菌的报道比较少见，且多集中于胎儿弯曲菌龟亚种［2］，表1归纳了国内现已报道的关于胎儿弯曲菌胎儿亚种的感染病例。
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·现代医学（Modern Medical Journal）2020年12月，48（12）
图3分离株的16S rＲNA基因片段系统发育树
表1国内现已报道的关于胎儿弯曲菌胎儿亚种的感染病例
序号性别年龄/岁基础疾病抗菌药物时长/d报道年份预后1［8］男41脾肿大、脂肪肝磺苄青霉素31984治愈2［2］男68肺癌、发热、菌血症未报道2012未报道
3［9］男52糖尿病、高血压、慢
性乙肝病史
美罗培南、莫西沙星302016治愈
胎儿弯曲菌胎儿亚种属于弯曲菌属，人类感染该菌后多引起肠道外的感染如心内膜炎、脑炎、关节炎等，大多伴有发热和菌血症，老年人、免疫功能低下人、有基础疾病的患者是该菌的易感人。本例患者间断性腰下肢痛20余年，诊断为腰椎管狭窄症，并且伴有胆囊结石和肾囊肿，肝功能差，免疫功能低下，可能该患者感染胎儿弯曲菌胎儿亚种与其年龄和基础疾病相关。但有国外报道［10-11］指出，在免疫功能正常的情况下，长时间暴露于污染源也可能是导致菌血症发生的原因。
胎儿弯曲菌的尚无统一的标准。文献报道中所使用的抗生素包括头孢曲松、哌拉西林舒巴坦［12
］、环丙沙星、阿奇霉素［10］、亚胺培南［13］及美罗培南［1］等，目前认为碳青霉烯类及喹诺酮类抗生素对胎儿弯曲菌更为有效，且一般该菌的都需要延长时间［9］。本例患者入院后经验性予左氧氟沙星1周后，复查白细胞计数及中性粒细胞百分比均较前明显下降，之后转入肝胆外科手术并改为哌拉西林舒巴坦钠继续抗炎对症，症状无反复，一般状况良好。
临床上胎儿弯曲菌引起的感染性疾病，往往由于病原菌检测困难、诊断不明确导致延误。所以，探索胎儿弯曲菌的快速检测方法，对疾病的诊断均具有重要意义。
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强济香，等．胎儿弯曲菌胎儿亚种菌血症一例
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学Modern Medical Journal
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［修回日期］2020-10-23
［作者简介］张波（1979），女，河北秦皇岛人，副主任医师。E -mail ：bobo137********@126．com
［通信作者］袁勇贵E -mail ：yygylh2000@sina．com
［引文格式］张波，袁勇贵．健康焦虑障碍一例报告［J ］．现代医学，
2020，48（12）：1620-1621．·病例报告
·健康焦虑障碍一例报告
张波1，袁勇贵
2（1．青海省人民医院神经内科，青海西宁810007；2．东南大学附属中大医院心身医学科，江苏南京210009）
［摘要］健康焦虑是一种连续性的症状谱，从轻微的健康关注到过度的健康担忧，其关注的健康问题
集中在
对当前身体健康状况或未来健康状况的过度担心。作者报道了1例健康焦虑障碍患者的病例特点，为诊断健康焦虑障碍及提供参考依据。
［关键词］健康焦虑障碍；病例报告［中图分类号］Ｒ749．7
［文献标识码］B
［文章编号］1671-7562（2020）12-1620-02
doi ：10．3969/j．issn．1671-7562．2020．12．026
2012年Ｒachman ［1］首次提出健康焦虑障碍（health anxiety disorders ，HAD ）这一概念。常表现为一种连续性的症状谱，
其关注的健康问题集中在对当前身体健康状况或未来健康状况的过度担心［1］
。作者报道了1例HAD 患者的病例特点，
为诊断HAD 及提供参考依据。
1临床资料
患者，男，32岁，因“反复担心自己和家人健康状
况2年余”
入院。2017年夏天患者在香港乘坐地铁，·
0261·
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