十、常用蛋白质分子量标准参照物
高分子量标准参照 中分子量标准参物 低分子量标准参照
蛋白质 | Mr | 蛋白质 | Mr | 蛋白质 | Mr |
肌球蛋白 β－半乳糖苷酶 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 过氧化氢酶 醛缩酶 | 212 000 116 000 97 400 66 200 57 000 40 000 | 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 谷氨酸脱氢酶 卵清蛋白 醛缩酶 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶抑制剂 溶菌酶 | 97 400 66 200 55 000 42 700 40 000 31 000 21 500 14 400 | 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶制剂 马心肌球蛋白 溶菌酶 肌球蛋白（F1） 肌球蛋白（F2） 肌球蛋白（F3） | 31 000 21 500 16 900 14 400 8 100 6 200 2 500 |
十一、层析法常用数据表及性质
（一） 离子交换纤维素
目前常用的离子交换纤维素列于下表
DEAE－ 纤维素 | 形状 | 长度 （微米） | 交换当量 （毫克当量/克） | 蛋白吸附容量 （毫克/克） | 床体积（毫升/克） | ||
胰岛素（pH8.5） | 牛血清清蛋白（pH8.5） | pH6.0 | pH7.5 | ||||
DE-22 DE-23 DE-32 DE-52 CM-纤维素 CM-22 CM-23 CM-32 CM-52 | 改良纤维性 * 同上（除细粒） 微粒性（干粉） 同上（溶胀） 改良纤维性 同上（除细粒） 微粒性（干粉） 同上（溶胀） | 12~400 18~400 24~63 24~63 12~400 18~400 24~63 24~63 | 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 0.6±0.06 0.6±0.06 1.0±0.1 1.0±0.1 | 750 750 850 850 溶菌酶 (pH5.0) 600 600 1,260 1,260 | 450 450 660 660 7S－γ球蛋白（pH5.0） 150 150 400 400 | 7.7 8.3 6.0 6.0 pH5.0 7.7 9.1 6.8 6.8 | 7.7 9.1 6.3 6.3 pH7.5 7.7 9.1 6.7 6.7 |
*：英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000微米。还有DE-11，纤维性，50～250微米，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。
（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号 | 排阻的下限 （Mr） | 分级分离的范围 （Mr） | 膨胀后的床体积 （mL/g干凝胶） | 膨胀所需最少时间 （室温，小时） |
Bio-gel-P-2 Bio-gel-P-4 Bio-gel-P-6 Bio-gel-P-10 Bio-gel-P-30 Bio-gel-P-60 Bio-gel-P-100 Bio-gel-P-150 Bio-gel-P-200 Bio-gel-P-300 | 1 600 3 600 4 600 10 000 30 000 60 000 100 000 150 000 200 000 300 000 | 200~2 000 500~4 000 1 000~5 000 5 000~17 000 20 000~50 000 30 000~70 000 40 000~100 000 50 000~150 000 80 000~300 000 100 000~400 000 | 3.8 5.8 8.8 12.4 14.9 19.0 19.0 24.0 34.0 40.0 | 2~4 2~4 2~4 2~4 10~12 10~12 24 24 48 48 |
注：上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.
（三）琼脂糖凝胶的技术数据
（琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0 ~ 4℃，pH 4~9范围内是稳定的。）
名称、型号 | 凝胶内琼脂糖百分 含量（W/W） | 排阻的下限（Mr） | 分级分离的范围（Mr） | 生产厂商 |
Sagavac 10 Sagavac 8 Sagavac6 Sagavac4 Sagavac2 | 10 8 6 4 2 | 2.5×105 7×105 2×106 15×106 150×106 | 1×104~2.5×105 2.5×104~7×105 5×104~2×106 2×105~15×106 5×105~15×107 | Seravac Laboratories, Maidenhead, England |
Bio-GelA-0.5M Bio-GelA-1.5M Bio-GelA-5M Bio-GelA-15M Bio-GelA-50M Bio-GelA-150M | 10 8 6 4 2 1 | 0.5×105 1.5×106 5×10mr.bio6 15×105 50×106 150×106 | <1×104~2.5×106 <1×104~1.5×106 1×104~5×106 4×104~15×106 1×105~50×106 1×106~150×106 | Bio-Rad Laboratories, California,U.S.A. |
（四）凝胶过滤层析介质的技术数据
凝胶过滤介质名称 | 分离范围 | 颗粒 大小 （μm） | 特性/应用 | pH稳定性工作 | 耐压（Mpa） | 最 快 流 速 （cm/h） |
Superdex 30 Superdex 75 Superdex200 Superose 6 Superose 12 Sephacryl S-100 HR Sephacryl S-200 HR Sephacryl S-300 HR Sephacryl S-400 HR Sepharose 6 Fast Flow Sepharose 4 Fast Flow Sepharose 2B Sepharose 4B Sepharose 6B Sepharose CL-2B Sepharose CL-4B Sepharose CL-6B | <10000 3000~70000 3 000 10000~600000 5000~5×106 1000~300000 1000~ 100000 5000~250000 10000~1.5×106 20000~8×106 10000~4×106 60000~20×106 70000~40×106 60000~20×106 10000~4×106 70000~40×106 60000~20×105 10000~4×106 | 24~44 24~44 24~44 20~40 20~40 25~75 25~75 25~75 25~75 平均90 平均90 60~200 45~165 45~165 60~200 45~165 45~165 | 肽类、寡糖、小蛋白等 重组蛋白、细胞素 单抗、大蛋白 蛋白、肽类、多糖、核酸 蛋白、肽类、寡糖、多糖 肽类、小蛋白 蛋白，如清蛋白 蛋白、抗体 多糖、具延伸结构的大分 子如蛋白多糖、脂质体 巨大分子 巨大分子如重组乙型肝 炎表面抗原 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖） 蛋白、多糖 蛋白、多糖 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖） 蛋白、多糖 蛋白、多糖 | 3~12 3~12 3~12 3~12 3~12 3~11 3~11 3~11 3~11 2~12 2~12 4~9 4~9 4~9 3~13 3~13 | 0.3 0.3 0.3 0.4 0.7 0.2 0.2 0.2 0.2 0.1 0.1 0.004 0.008 0.02 0.005 0.012 0.02 | 100 100 100 30 30 20~39 20~39 20~39 20~39 300 250 10 11.5 14 15 26 30 |
发布评论