[收稿日期]2016-11-21 [收稿日期]2017-08-07
[基金项目]上海市黄浦区科委课题(HKW201301)；上海市黄浦区卫生系统优秀青年人才培养计划配套课题
[作者单位]1.上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院呼吸
科，上海200020;2.上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科，上海200025;3.上海交通大学生命科学技术学
院微生物科学系，上海200240
[作者简介]李 镛(1978-)，男，硕士，副主任医师.
[文章编号]1000⁃2200(2018)03⁃0288⁃05
㊃基础医学㊃
泛耐药铜绿假单胞菌体行为
与体密度感应系统基因的相关性分析
李 镛1，刘嘉琳2，周 莲3
[摘要]目的：探讨泛耐药铜绿假单胞菌(PA)体行为与体感应系统(QS)基因的相关性㊂方法：检测PA 体行为包括弹性蛋白酶㊁绿脓菌素和生物被膜(BF)等和QS 基因表达量，分别在泛耐药PA 组和全敏感PA 组观察PA 体行为与QS 基因表达量的相关性㊂结果：收集泛耐药PA 和全敏感PA 各5例病例，各10株PA㊂泛耐药PA 组弹性蛋白酶和绿脓菌素与LasI 呈正相关关系(P <0.05),BF 与RhlR 呈正相关关系(P <0.05)；全敏感PA 组体行为与QS 基因无相关关系(P >0.05)㊂泛耐药PA 组与全敏感PA 组第1天收集RhlI 和第14天收集LasI㊁LasR 表达量差异有统计学意义(P <0.05)，弹性蛋白酶㊁BF 和LasI㊁LasR 前后表达量变化差异有统计学意义(P <0.05)㊂1株泛耐药PA 发生氨基酸突变㊂结论：泛耐药PA 体行为与QS 基因相关，且弹性蛋白酶㊁BF 和LasI,LasR 表达过高，提示QS 基因在PA 耐药机制中起重要作用㊂[关键词]铜绿假单胞菌；耐药；细菌体行为；体密度感应系统
[中图法分类号]R 563.1 [文献标志码]A DOI :10.13898/jki.issn.1000⁃2200.2018.03.003
Correlation between bacterial group behavior and quorum⁃sensing system genes
in pan drug resistance Pseudomonas aeruginosa
LI Yong 1,LIU Jia⁃lin 2,ZHOU Lian 3
(1.Department of Respiratory Medicine ,Ruijin Hospital Luwan Branch ,Shanghai Jiao Tong University School of Medicine ,
Shanghai 200020;2.Department of Respiratory Medicine ,Ruijin Hospital ,Shanghai Jiao Tong University School of Medicine ,Shanghai 200025;3.School of Life Sciences and Biotechnology ,Shanghai Jiao Tong University ,Shanghai 200240,China )[Abstract ]Objective :To investigate the correlation between bacterial group behavior and expressions of quorum⁃sensing system(QS)genes in pan drug resistance Pseudomonas aeruginosa (PA).Methods :The bacterial group behaviors(including elastase,pyocyanin and biofilm)and expression of QS genes were measured.The correlation between PA group behavior and QS gene expression in pan drug resistant PA group and fully sensitive PA group was analyzed.Results :Five cases of pan drug resistance PA and 5cases of all sensitive PA were collected.In pan drug resistance PA group,the elastase and pyocyanin were positive correlation with expression of LasI(P <
0.05),and the biofilm was positively associated with RhlR(P <0.05).There was not correlation between bacterial group behavior and QS gene in all sensitive PA group(P >0.05).The differences of the Rhll level on the first day and LasI and LasR levels on the fourteenth day between two groups were statistically significant(P <0.05).The differences of the elastase,biofilm,and LasI and LasR levels between before and after treatment were statistically significant(P <0.05).The amino acid mutation in 1strain PA was found.Conclusions :The pan drug resistance PA group behavior is correlation with QS g
ene.The elastase and biofilm,and more expression levels of LasI and LasR hint that the QS gene plays a key role in the drug resistance mechanism of PA.[Key words ]Pseudomonas aeruginosa ;drug resistance;bacterial group behavior;quorum⁃sensing system
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginoisa ,PA)是医院获得性肺炎中重要的机会致病菌之一，近年很多研究者关注细菌作为一个体而非单个细菌所表现出的行为，包括弹性蛋白酶㊁绿脓菌素和生物被膜
(biofilm,BF)等㊂而PA 的体行为是通过体密度感应系统(quorum⁃sensing system,QS)来实现的,
PA 的QS 系统包括Las 系统和Rhl 系统[1],Las 系统由LasI 基因和LasR 基因组成[2],Rhl 系统由RhlI 基因和RhlR 基因组成㊂LasI 和RhlI 基因调控信号分子合成,LasR 和RhlR 基因调控信号分子配体合成，信号分子与配体形成的复合物激活下游基因，进而调控PA 体行为[3]㊂本研究旨在通过检测泛耐药与全敏感PA 弹性蛋白酶㊁绿脓菌素㊁BF 和QS 基
因表达量，分析PA 体行为与QS 基因的相关性，探讨QS 基因在PA 耐药机制中的作用㊂
8
82J Bengbu Med Coll ,March 2018,Vol.43,No.3
1 材料与方法
1.1 菌株来源 收集2013年6月至2014年3月瑞金医院呼吸重症监护病房(RICU)及瑞金医院卢湾分院呼吸科病房新诊断PA肺炎病人34例，男22例，女12例，年龄(71.59±13.10)岁，临床诊断标准为入院48h后影像学提示新出现或渐进性肺部渗出性病灶及符合下列3项临床表现中的2项：体温>38℃，外周血白细胞>10×109/L或<4×109/ L，脓痰㊂自诊断PA之日起第1天和第14天收集病人痰液㊂按常规方法分离㊁鉴定PA，挑取单个菌落接种在甘油肉汤中,-80℃保存，以收集时间顺序编号㊂自留取第1天标本后即开始抗PA㊂1.2 材料 LB培养基[4]:1%胰蛋白胨,0.5%酵母提物,1%氯化钠,pH7.5；刚果红磷酸缓冲液(含8mg弹性蛋白,Sigma公司)；细菌DNA㊁RNA和cDNA提取试剂盒(上海生工生物工程公司)㊂1.3 PA培养 解冻菌株，接种在LB培养基，再挑取单个菌落接种在5mL LB液中备用㊂
1.4 体外药敏试验 根据美国临床实验室标准化协会标准，用稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)值, ATCC27853作为对照㊂根据药敏试验结果筛选出泛耐药及全敏感PA各5例病例，各10株PA，并设立相应的研究组别，进行后续的实验研究㊂1.5 弹性蛋白酶活力检测[5-6] PA的过夜培养物稀释OD600值为0.05，取
2.0mL菌液37℃㊁200r/ min振荡,21h后16000r/min离心5min，吸取上清液60μL，加入800μL10mmol/L刚果红磷酸缓冲液,37℃振荡培养18h后16000r/min离心5min，吸取上清液，测定其在OD495值㊂实验重复3次取平均值㊂
1.6 绿脓菌素分泌量检测[7] PA的过夜培养物稀释OD600值为0.6，取
2.0mL菌液加入24孔平板, 37℃㊁130r/min振荡,24h后16000r/min离心5min，吸取上清液，加入2.0mL，充分振荡后溶液分上下两层，取下层溶液加入0.5mL 0.2mol/L氯化氢，测OD520值㊂实验重复3次取平均值㊂
1.7 BF生成量检测[8] PA的过夜培养物稀释OD600值为0.02，取10μL菌液加入96孔平板(每孔含200μL1∶50稀释的LB液)，每株PA作6个复孔，空白对照孔只加LB液㊂37℃静止培养，每48h 换LB液,72h后用0.9%氯化钠溶液洗涤3次，加入150μL0.25g/L结晶紫染液，室温染20min;0.9%氯化钠溶液冲洗后晾干；再加入150μL95%乙醇，室温脱10min；测OD570值㊂OD570值=3个复孔OD570平均值-3个空白对照OD570平均值㊂1.8 嵌合荧光法测定QS基因相对表达量[4] 提取细菌RNA，反转录成cDNA,QS基因上下游引物序列(Takara公司提供)见表1㊂RT⁃PCR反应体系: cDNA
2.0μL，上㊁下游引物各1.0μL,SYBR Premix Ex TaqⅡ(TliRNaseH Plus)(2×)12.5μL,DEPC 8.5μL，共25μL㊂反应条件:(1)95℃30s,(2) 95℃5s,(3)60℃30s,(1)(2)步进行40个循环㊂采用相对定量法测定QS基因表达量，以16sRNA为管家基因，目的基因相对表达量=2-△△Ct,△△Ct=△Ct(目的基因)-△Ct(管家基因)㊂
表1 QS基因PCR引物
扩增基因引物序列
LasI F5′⁃GCC CCT ACA TGC TGA AGA ACA⁃3′
R5′⁃GTC CAG AGT TGA TGG CGA AA⁃3′LasR F5′⁃ACG CTC AAG TGG AAA ATT GGA⁃3′
R5′⁃GGG TAG TTG CCG ACG ATG AA⁃3′RhlI F5′⁃AGC TTC TCG ATG AAG ACC TGA TG⁃3′
R5′⁃TGC TCT CTG AAT CGC TGG AA⁃3′RhlR F5′⁃TCG CTC CAG ACC ACC ATT TC⁃3′
R5′⁃CCA CAC GAT TCC CTT CAC C⁃3′
16sRNA F5′⁃TCG TGT CGG ATG TTG GGT TA⁃3′
R5′⁃GGT TTC GCT GCC CTT TGT ATT GT⁃3′1.9 QS基因单核苷酸多态性(SNP)分析 提取细菌DNA,QS基因上下游引物序列(上海英骏生物技术有限公司提供)见表2㊂PCR反应体系:10×Buffer 5.0μL,MgSO4(50mmol/L)1.0μL,dNTP(10mmol/ L)1.5μL，上下游引物各1.5μL，模板10ng1.0μL, platimum Taq Polymerase1U1.0μL,ddH2O37.5μL，共50.0μL；反应条件:(1)94℃2min,(2)94℃30s,(3)55℃45s,(4)68℃3min,(5)68℃10min,(2)(3)(4)步进行40个循环㊂按PA14标准株将测定的碱基对序列翻译成氨基酸序列㊂1.10 统计学方法 采用相关分析和秩和检验㊂2 结果
2.1 PA体行为与QS系统基因相关性分析 第1天和第14天收集菌株，泛耐药PA组与全敏感PA 组，弹性蛋白酶㊁绿脓菌素㊁BF等体行为与QS基因表达量均无相关关系(P>0.05)(见表3)㊂
泛耐药PA组弹性蛋白酶和绿脓菌素的前
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蚌埠医学院学报2018年3月第43卷第3期
表2 QS基因SPN引物
扩增基因引物序列
LasI F5′⁃ATG ATC GTA CAA ATT GGT CGG C⁃3′
R5′⁃CCA GCG TCT GGA TGT CGT TCT⁃3′LasR F5′⁃ATG GCC TTG GTT GAC GGT TTT CT⁃3′
R5′⁃TCT GCA GTG CGT AGT CCT TGA G⁃3′RhlI F5′⁃ATG ATC GAA TTG CTC TCT GAA TC⁃3′R5′⁃GCA GGC TGG ACC AGA ATA TCT T⁃3′RhlR F5′⁃ATG AGG AAT GAC GGA GGC TTT TT⁃3′R5′⁃GCT CGA AGC TGG AGA TGT TCT G⁃3′
表3 PA体行为与QS基因表达量相关系数(r)分组LasI LasR RhlI RhlR
第1天
泛耐药PA组
弹性蛋白酶0.8000.8000.4000.700 绿脓菌素0.3000.4000.1000.300 BF0.8000.7000.4000.700 全敏感PA组
弹性蛋白酶0.4000.6000.2000.100 绿脓菌素0.1000.1000.5000.100 BF-0.400-0.1000.7000.500第14天
泛耐药PA组
弹性蛋白酶0.7000.5000.6000.600 绿脓菌素0.300-0.100-0.500-0.500 BF0.200-0.600-0.400-0.400 全敏感PA组
弹性蛋白酶0.3000.1000.6000.300 绿脓菌素0.5000.7000.3000.100 BF-0.1000.800-0.300-0.600后差异与LasI表达量的差异呈正相关关系(P< 0.05)，而BF与RhlR表达量的差异呈正相关关系(P<0.05)，但泛耐药PA组PA体行为前后差异与LasR和RhlI表达量的差异无显著相关关系(P>0.05)㊂全敏感PA组体行为前后差异与QS基因表达量的差异无显著相关关系(P> 0.05)(见表4)㊂
2.2 泛耐药PA组与全敏感PA组组间比较 第1天收集样本，泛耐药PA组与全敏感PA组RhlI表达量差异有统计学意义(P<0.05)，而LasI㊁LasR和RhlR表达量差异均无统计学意义(P>0.05)；第14天收集样本，泛耐药PA组与全敏感PA组LasI和LasR表达量差异有统计学意义(P<0.05)，而RhlI 和RhlR表达量差异均无统计学意义(P>0.05)(见表5)㊂
表4 前后PA体行为差异与QS基因表达量差异相关系数(r)
分组LasI LasR RhlI RhlR
泛耐药PA组
弹性蛋白酶0.900*0.6000.1000.100 绿脓菌素0.900*0.6000.100-0.400 BF0.4000.100-0.1000.900*全敏感PA组
弹性蛋白酶0.4000.1000.5000.700 绿脓菌素0.6000.1000.8000.500 BF0.2000.800-0.300-0.600 *P<0.05
2.3 QS系统基因SNP分析 2组PA均发现不同程度的碱基突变，翻译成氨基酸序列后，仅有1例泛耐药PA菌株在后RhlI蛋白质第83位天冬氨酸突变为谷氨酸，第127位甘氨酸突变为丙氨酸，而其余菌株未发现氨基酸突变㊂
3 讨论
当一个环境中细菌的数量升高时，细菌分泌信息分子的浓度也随之升高㊂这时细菌之间就会通过QS系统来协调它们的共同行为㊂近年研究[9-10]发现，由QS基因缺失引起的PA肺炎，其致死率显著降低，提
示QS系统在PA感染中起着重要作用㊂本实验发现无论泛耐药PA组还是全敏感PA 组，第1天和第14天收集的PA,PA体行为增加或减少与QS基因表达量增加或减少均无显著相关关系㊂
弹性蛋白酶在宿主体内可以破坏肺结构；影响肺部的舒张和收缩[11]；破坏宿主呼吸系统的物理屏障；干扰宿主的免疫应答；并在BF内部形成运输孔道[12]㊂研究[13]表明PA弹性蛋白酶产生严格依赖Las系统基因㊂本文前后发现泛耐药PA组中弹性蛋白酶活力增加越多,LasI表达量也增加越多㊂绿脓菌素是PA重要的毒力因子，易进出BF，导致细胞死亡；抑制气管纤毛的功能，便于PA定植；抑制宿主特异性免疫[14]㊂本文还发现泛耐药PA组中绿脓菌素分泌量增加越多,LasI表达量也增加越多，但有研究[15-16]报道LasR和RhlR基因参与了绿脓菌素分泌，实验结果的差异需进一步研究证实㊂目前认为BF是由5个阶段周而复始动态循环过程组成[17]：可逆黏附期㊁不可逆黏附期㊁BF成熟初期㊁BF 成熟和解聚再定植㊂Rhl系统基因对BF形成起到
092J Bengbu Med Coll,March2018,Vol.43,No.3
表5 泛耐药PA组与全敏感PA组组间PA体行为与QS基因表达量比较(x±s)分组LasI LasR RhlI RhlR弹性蛋白酶绿脓菌素BF
第1天
泛耐药PA组134.34±250.4441.48±69.1730.43±27.550.26±0.20 1.42±0.040.23±0.130.73±0.43 全敏感PA组 1.39±1.91 1.15±1.43 5.28±4.290.96±1.92 1.50±0.060.08±0.090.58±0.20 t 1.270.95 1.580.630.950.950.95 P>0.05>0.05<0.05>0.05>0.05>0.05>0.05第14天
泛耐药PA组3909.93±8.331913.14±4.09423.21±809.0510.67±15.19 1.52±0.090.34±0.200.86±0.65 全敏感PA组0.52±0.550.36±0.41 1.81±1.990.18±0.13 1.45±0.030.11±0.100.45±0.13 t 1.58 1.58 1.265 1.265 1.265 1.2650.949 P<0.05<0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05
至关重要作用，而Las系统基因则决定了BF结构的差异性，并且在不可逆黏附期发挥重要作用[18]㊂有学者[19]在体内和体外实验中应用溴苯硫内酯抑制RhlR，从而抑制了BF形成㊂实验还发现BF生成量增加越多,RhlR表达量也增加越多，与上述研究结果一致㊂而在全敏感PA组中,PA体行为的增加或减少与QS基因表达量增加或减少相关性不明显㊂我们实验结果提示在泛耐药PA中,PA体行为与QS基因有一定的相关性，而在全敏感PA中，未观察到两者显著相关性㊂
泛耐药PA组与全敏感PA组比较，在泛耐药PA组，第1天RhlI表达量和第14天LasI㊁LasR表达量较高㊂前后比较,PA体行为和QS基因表达量在泛耐药PA组中有不同程度的升高，而在全敏感PA组中有不同程度的降低，同时我们发现弹性蛋白酶活力㊁BF生成量和LasI㊁LasR表达量在泛耐药PA组的升高较其在全敏感PA组的降低更明显㊂通过SNP分析，在泛耐药PA组中发现有氨基酸突变㊂这些结果表明PA
体行为和QS基因在泛耐药PA中存在高表达，提示QS基因在PA耐药机制中起到重要的作用，尤其是Las系统基因㊂如何阻断其表达为防控泛耐药PA提供一个新思路，值得深入研究㊂
与应用标准株的研究比较，本研究通过PA临床分离株探讨QS系统基因在泛耐药PA中的作用，对临床更有价值，但仍需进一步扩大样本量㊂同时QS基因氨基酸突变与PA耐药之间是否存在关联需要进一步研究㊂
[参考文献]
[1] LEE J,ZHANG L.The hierarchy quorum sensing network in
Pseudomonas aeruginosa[J].Protein Cell,2015,6(1):26. [2] WILDER CN,DIGGLE SP,SCHUSTER M.Cooperation and
cheating in Pseudomonas aeruginosa:the roles of the las,rhl and
pqs quorum⁃sensing systems[J].ISME J,2011,5(8):1332.
[3] SCHUSTER M,SEXTON DJ,DIGGLE SP,et al.Acyl⁃homoserine
lactone quorum sensing:from evolution to application[J].Annu
Rev Microbiol,2013,67:43.
[4] 李镛，刘嘉琳，瞿洪平.铜绿假单胞菌在急性下呼吸道感染患
者中生物被膜形成与体感应系统基因相关性分析[J].内
科理论与实践,2012,6(7):434.
[5] DARCH SE,WEST SA,WINZER K,et al.Density⁃dependent
fitness benefits in quorum⁃sensing bacterial populations[J].Proc
Nati Acad Sci U S A,2012,109(21):8259.
[6] IMPERI F,MASSAI F,PILLAI CR,et al.New life for an old
drug:the anthelmintic drug niclosamide inhibits Pseudomonas
aeruginosa quorum sensing[J].Antimicrob Agents Chemother,
2013,57(2):996.
[7] SMALLEY NE,AN D,PARSEK MR,et al.Quorum sensing
protects Pseudomonas aeruginosa against cheating by other species
in a laboratory coculture model[J].J Bacteriol,2015,197(19):
3154.
[8] STEWART PS,FRANKLIN MJ,WILLIAMSON KS,et al.
Contribution of stress responses to antibiotic tolerance in
Pseudomonas aeruginosa biofilms[J].Antimicrob Agents
Chemother,2015,59(7):3838.
[9] JAKOBSEN TH,BJARNSHOLT T,JENSEN PØ,et al.Targeting
quorum sensing in Pseudomonas aeruginosa biofilms:current and
emerging inhibitors[J].Future Microbiol,2013,8(7):901.
[10] YANG YX,XU ZH,ZHANG YQ,et al.A new quorum⁃sensing
inhibitor attenuates virulence and decreases antibiotic resistance
in Pseudomonas aeruginosa[J].J Microbiol,2012,50(6):987.
[11] BEAUFORT N,CORVAZIER E,MLANAOINDROU S,et al.
Disruption of the endothelial barrier by proteases from the
bacterial pathogen Pseudomonas aeruginosa:implication of
matrilysis and receptor cleavage[J].PloS One,2013,8(9):
e75708.
[12] MCCARTY SM,COCHRANE CA,CLEGG PD,et al.The role of
endogenous and exogenous enzymes in chronic wounds:a focus on
the implications of aberrant levels of both host and bacterial
proteases in wound healing[J].Wound Repair Regen,2012,20
(2):125.
(下转第295页)
可以减轻肝脏负荷，适合用于肝功能差及黄疸病人[10]㊂(3)MCT/LCT的水解和代谢明显高于LCT，不易引起高三酰甘油血症[11]㊂这也为丙泊酚MCT/ LCT能安全应用于婴幼儿提供了条件㊂
在本研究中我们选取了1个月至3岁的婴幼儿病人作为研究对象，随机分为2组，每组25例,2组以丙泊酚MCT/LCT和七氟烷分别进行诱导㊁维持麻醉，从血流动力学㊁苏醒期质量及对肝功能的影响方面探讨丙泊酚MCT/LCT用于婴幼儿麻醉的安全性㊂研究结果显示，在诱导后2组患儿心率㊁血压都有一定程度降低，但均未进行药物干预，在气管插管后自行回升㊂七氟烷停药至自主呼吸恢复较快，但差异较M组不显著㊂而丙泊酚MCT/LCT拔管时间较七氟烷短且躁动及恶心呕吐发生率低，这可能与七氟烷苏醒期烦躁有一定相关性，使患儿产生不规则呼吸的时间长，而有效自主呼吸时间短，从而延长了拔管时间㊂考虑丙泊酚MCT/LCT的代谢主要影响肝功能，因此本研究对患儿术前术后以及术后24h的肝功能指标进行检测㊂本研究结果显示丙泊酚MCT/LCT与七氟烷术毕及术后24h的ALT和AST与术前无显著差异，表明短时间的丙泊酚MCT/LCT的输注并不影响患儿的肝功能㊂
本研究考虑患儿年龄较小，不能配合，所以在建立静脉通路时统一采用右美托咪定滴鼻镇静，可能对研究结果有所影响，但综合考虑本研究对研究结果影响不大㊂综上所述，丙泊酚MCT/LCT可安全用于婴幼儿麻醉，具有苏醒期躁动及恶心呕吐发生率低等优点，且短时间内手术使用并不影响肝功能㊂
[参考文献]
[1] LAQUAY N,PRIEUR S,GREFF B,et al.Propofol infusion
syndrome[J].Ann Fr Anesth Reanim,2010,29(5):377. [2] BAJWA SA,COSTI D,CYNA AM.A comparison of emergence of
delirium scales following general anesthesia in children[J].
Pediatr Anesth,2010,20(8):704.
[3] 刘胜，李站稳，刘喆，等.3岁以下婴幼儿支气管镜诊疗的麻
醉管理体会[J].临床麻醉学,2014,30(8):806. [4] ALI MA,ABDELLATIF AA.Prevention of sevoflurane related
emergence agitationin children undergoing adenotonsillectomy:a
comparison of dexmedetomidine and propofol[J].Saudi J
Anaesth,2013,7(3):296.
[5] 周娅梅，刘媛，周根芝，等.小剂量右美托咪定滴鼻预防小儿
七氟烷麻醉苏醒期躁动60例[J].中国药业,2013,22(11):
27.
[6] VAN HOFF SL,O′NEILL ES,COHEN LC,et al.Does a
prophylactic dose of propofol reduce emergence agitation in
children receiving anesthesia:a systematic review and meta⁃
analysis[J].Paediatr Anaesth,2015,25(7):668. [7] 黄安宁，陈娜，丁莉莉，等.丙泊酚中/长链脂肪乳在小儿短小
手术的临床观察[J].解放军医学院学报,2013,34(8):833.
[8] PESSENBACHER K,GUTMANN A,EGGENREICH U,et al.
Two propofol formulations are equivalent in small children aged1
month to3years[J].Acta Anaesthesiol Scand,2002,46(2):
257.
[9] SUZUKI H,MIYAZAKI H,ANDOH T,et al.Propofol formulated
with long medium chain triglycerides reduces the pain of inject by
target controlled infusion[J].Acta Anaesthesiol Scand,2006,50
(5):568.
[10] 周汾，李肇端，张圆，等.丙泊酚中长链脂肪乳对梗阻性黄疸
病人手术时肝功能影响[J].中国中西医结合外科杂志,
2011,17(3):258.
[11] 曹冬冬，蔡丽敏，张媛，等.比较两种丙泊酚制剂对儿童肝脏
功能及甘油三酯水平的影响[J].医学研究杂志,2016,45
(2):113.
(本文编辑 刘璐)
(上接第291页)
[13] CASILAG F,LORENZ A,KRUEGER J,et al.The LasB elastase
of Pseudomonas aeruginosa acts in concert with alkaline protease
AprA to prevent flagellin⁃mediated immune recognition[J].Infect
Immun,2016,84(1):162.
[14] JAYASEELAN S,RAMASWAMY D,DHARMARAJ S.Pyocyanin:
production,applications,challenges and new insights[J].World J
Microbiol Biotechnol,2014,30(4):1159.
[15] WELSH MA,EIBERGEN NR,MOORE JD,et al.Small molecule
disruption of quorum sensing cross⁃regulation in Pseudomonas
aeruginosa causes major and unexpected alterations to virulence
phenotypes[J].J Am Chem Soc,2015,137(4):1510. [16] LONGO F,RAMPIONI G,BONDI R,et al.A new transcriptional
repressor of the Pseudomonas aeruginosa quorum sensing receptor
泛gene lasR[J].PLoS One,2013,8(7):e69554. [17] OTTO M.Staphylococcal Infections:mechansims of biofilm
maturation and detachment as critical determinants of
pathogencity[J].Annu Rev Med,2013,64:175. [18] O′MAY C,TUFENKJI N.The swarming motility of Pseudomonas
aeruginosa is blocked by cranberry proanthocyanidins and other
tannin⁃containing materials[J].Appl Environ Microbiol,2011,77
(9):3061.
[19] O′LOUGHLIN CT,MILLER LC,SIRYAPORN A,et al.A
quorum⁃sensing inhibitor blocks Pseudomonas aeruginosa
virulence and biofilm formation[J].Proc Natl Acad Sci U S A,
2013,110(44):17981.
(本文编辑 周洋)
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