目前国内所有二级以上综合医院都具备了核酸检测能力,大部分医 院也设立了 PCR实验室,高强度的核酸检测任务己然成为了我们检验 人的工作常态,但是,如果一旦出现实验室污染,可能会造成假阳性 结果,导致结果不可信,甚至可能会危及实验室工作人员安全。 应对核酸检测实验室污染的最好办法就是防范于未然,今天就带大家 了解一下实验中我们如何避免和减少污染的产生以及处理污染。
一、污染的产生
在新冠病毒核酸检测过程中,常见以下几种污染类型:扩增片段 的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮 存液或工作液)以及样本间交叉污染。核酸检测实验室污染的主 要来源是扩增产物的污染。
实验室应通过以下途径及时发现污染:
1、    采用每次检测过程至少3个阴性对照随机置于临床样木中间参与 提取全过程。
2、    每天对实验室内空气进行采样监测。空气监测范围应至少应包括 样木制备区和扩增产物分析区。
3、    定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测。
4、阳性样本采用另外一到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测 试剂对原始样木进行复核检测。
二、污染的防控
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严格实验室功能分区
原则上新冠病毒核酸检测实验室应当设置以下区域:试剂储存和准备 区、样本制备区、扩增和产物分析区。
根据使用仪器的功能,区域可适当合并。各区域在物理空间上应当是 完全相互独立的。传递窗满足密封性要求,不能有空气的直接相通。 各项检测工作应严格按相应规定在各自的区域内进行,严禁在样本制 备区配制试剂。
各区的功能是:
1、    试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混 合液的制备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2、    样本制备区:转运箱的开启,样本的灭活(适用时),核酸提取 及其加入至扩增反应管等。
3、    扩增和产物分析区:核酸扩增和产物分析。
确保实验室人、物及空气单向流动
核酸检测实验室的人、物及空气流向按照试剂储存和准备区f样木制 备区f扩增和产物分析区,防止扩增产物随人流、物流及空气进入扩 增前的区域。空气流向应按照从试剂储存和准备区f样木制备区f扩 增区f扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。
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实验室检测安全管理
(1)基本要求
核酸检测应当在生物安全二级实验室进行,并应在生物安全风险评估 的基础上,采取适当的个体防护措施,包括手套、口罩和隔离衣等。 开展新冠病毒核酸检测的实验室应当制定实验室生物安全相关程序 文件及实验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序,并有记录。
(2)实验室前安全要求
应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌而、台面及地面消毒。消毒 液需每天新鲜配制,不超过24小时。转运至实验室的标木转运桶应 在生物安全柜内开启。转运桶开启后,使用0.2%含氯消毒剂或75% 酒精对转运桶内壁和标木采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管 后,应首先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或是否有管壁 残留物。确认无渗漏后,推荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒样 品管外表而(此处不建议使用75%酒精,以免破坏标木标识)。如发 现渗漏应立即用吸水纸覆盖,并喷洒有效氯含量为0. 55%的含氯消毒 剂进行消毒处理,不得对标本继续检测操作,做好标木不合格记录后 需立即进行密封打包,压力蒸汽灭菌处理后销毁。
如为采样管为非灭活管,实验室操作人员在进行标本热灭活时,温浴 前需旋紧标木采集管管盖,必要时可用封口膜密闭管盖;温浴过程中 可每隔10分钟将标木轻柔摇匀1次,以保证标
本均匀灭活;温浴后 标本需静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降,随后再开盖进行后续 核酸提取。
(3)核酸提取和检测安全要求
标木进行核酸提取和检测时应尽可能在生物安全柜内进行操作。如为 打开标木管盖或其他有可能产生气溶胶的操作,则必须在生物安全柜 内进行。
(4)核酸检测报告在手机上怎么查实验室结束后清洁要求。