香水百合花瓣组织培养
TissueCultureofPetalofLily
ZHANG LiWANG Ri-ming
(Huaihua Vocational and Technical College,Huaihua Hunan 418000)
Taking the petal of perfume lily as explant for tissue culture induced on regenerative plants.The results showed that appropriate site of induced shoot clumps was at lower part of petals,the optimum culture medium was MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,its induced rate was 86.67%.The culture medium of 1/2 MS+ 0.05 mg/L NAA was suitable for induced rooting.
香水百合为东方百合杂交种系,是百合科百合属多年生草本植物,是一种广泛应用的切花材料。香水百合常采用传统的无性繁殖方法繁殖,繁殖率低,种球易退化。利用组织培养技术可对染病毒种苗进行脱毒,扩大繁殖系数。目前,对香水百合的组织培养主要是以鳞茎为外植体诱导再生植株[1-2],另外还对香水百合的叶片、花柄、花托、子房、花丝等进行了试验[3-4]。该试验以香水百合花瓣为外植体,对不同种类和浓度的激素在丛生芽和根诱导中的影响进行研究,建立稳定的快速繁殖体系,以为香水百合的遗传转化和基因工程育种提供试验材料。
1材料与方法
1.1试验材料
外植体:香水百合花瓣;6-BA、NAA、75%酒精、0.1%、无菌水、蔗糖、琼脂等。
1.2试验设计
为选择最佳的培养基体系,根据组培不同阶段设计了多种培养基配方,具体如表1、2所示。
1.3培养方法与条件
将香水百合花苞流水冲洗30 min,在超净工作台用75%酒精和0.1%分别消毒(75%酒精消毒3 min,0.1%消毒10 min),无菌水漂洗4~5次。分瓣,切割成0.5 cm×0.5 cm的小块进行试验。以MS、1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度的激素、30 g/L蔗糖、12 g/L琼脂、pH值5.8左右、温度(25±2)℃,光照强度1 500 lx,光照时间每天12 h[5-6]。
2结果与分析
2.1不同激素对小鳞茎的影响
常诚
将外植体接种在6组加入不同浓度的6-BA与NAA组合诱导培养基上,15 d左右外植体切口处膨大,部分出现黄绿小突起,28 d后外植体上长出小鳞茎或细小的绿叶片。由表3可以看出,处理A2诱导出小鳞茎的外植体数量最多,外植体数量为13个,诱导效果最好,诱导率为86.67%;在6-BA浓度不变时,NAA浓度偏低或偏高都对诱导小鳞茎不利,当6-BA、NAA浓度过
低或过高时也不利于诱导小鳞茎。由此可见,最佳小鳞茎诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA。
2.2生根培养
将诱导出的小鳞茎从基部切下,接种至4组生根培养基中,采用1/2 MS为基本培养基,其中添加不同浓度的NAA诱导生根。
10 d后,处理B2可以观察到有白的根长出,4周后观察,根长最长为10 cm。由表4可以看出,处理B2诱导生根效果最好,其他3组生根培养基有少数外植体诱导出根,诱导率低。由此可见,最佳生根培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA。
2.3移栽
将生根良好且健壮、长2 cm左右、叶片2片、高度2 cm左右的小苗移出培养室,打开培养瓶盖炼苗,1周
后将试管苗根部培养基洗净,移栽入高温灭菌处理的蛭石中,3周后将成活苗移至苗圃进行常规栽培。
3结论与讨论
综合试验研究结果可以看出,以香水百合花瓣作为外植体,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,诱导出小鳞茎的外植体数最多,诱导速度较快,诱导率为86.67%。在1/2 MS+0.05 mg/L NAA生根培养基中诱导生根快,生根数量多,诱导效果好。与目前香水百合鳞茎组织培养相比较,培养周期较长,尤其在前期采用不同浓度的6-BA与NAA对以未开放香水百合花瓣为外植体诱导小鳞茎的启动时间长。选用根部健壮、苗长2 cm左右的
试管苗,可以提高其移栽成活率。
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