《中国组织工程研究》Chinese Journal of Tissue Engineering Research
文章编号:2095-4344(2019)05-00803-06
803
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·研究原著·
李博鹏，女，1980年生，河北省邢台市人，汉族，2015年河北医科大学毕业，硕士，主治医师，主要从事糖尿病血管并发症的研究。
通讯作者：陈树春，博士，主任医师，教授，硕士生导师，河北省人民医院内分泌科，河北省石家庄市050057
文献标识码:B
稿件接受：2018-10-30
Li Bopeng,Master,Attending physician,Xingtai Fifth Hospital,Xingtai 054027,Hebei Province,China Corresponding author:Chen Shuchun,MD,Chief physician,Professor,Master’s supervisor,Endocrinology Department ,Hebei General Hosp
ital,Shijiazhuang 050057,Hebei Province,China
李博鹏1,2，陈树春1，唐
勇1，任路平1(1河北省人民医院内分泌科，河北省石家庄市
050057；2
邢台市第五医院，河北省邢台市054027)
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1560ORCID:0000-0002-3293-4081(李博鹏)
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文题释义：
α-硫辛酸：是一种天然的强抗氧化剂，可以清除机体生理和病理过程中的各种自由基，减轻机体氧化应激。2型糖尿病患者内皮祖细胞功能障碍主要由一氧化氮系统引起，而α-硫辛酸能够改善其抗氧化能力及一氧化氮的分泌，从而保护内皮祖细胞功能。
内皮祖细胞：是血管内皮细胞的前体细胞，在生理或病理因素刺激下，可从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复。1997年，Asahara 等首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞，并将其命名为血管内皮祖细胞。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究提供了新思路。
摘要
背景：前期研究表明，初诊2型糖尿病患者已存在血管内皮功能障碍，α-硫辛酸作为一种抗氧化剂，广泛应用于糖尿病神经病变患者，而其能否改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞的数量与功能，目前尚无这方面的研究。
目的：探讨α-硫辛酸对初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平的影响。
方法：将50例初诊2型糖尿病患者在基础的前提下，随机分为对照组20例和α-硫辛酸组30例，前和2周检测超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平及内皮祖细胞数量，分析各指标在两组间的差异及相关性。结果与结论：①与前比较，α-硫辛酸组后内皮祖细胞数量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性显著增加(P <0.05)，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著降低(P <0.05)，高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P <0.05)；②与前比较，对照组后三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著下降(P <0.05)，高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P <0.05)；③两组前后的差值比较：α-硫辛酸组较对照组内皮祖细胞数量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性显著增加(P <
0.05)，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷含量显著降低(P <0.05)；④以α-硫辛酸组前后各指标的差值进行多元线性回归分析显示，谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛是内皮祖细胞水平的影响因素；⑤结果表明，α-硫辛酸能够通过抗氧化应激增加初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平。关键词：
2型糖尿病；糖尿病血管并发症；内皮祖细胞；α-硫辛酸；氧化应激；谷胱甘肽过氧物酶；丙二醛；干细胞主题词：
糖尿病,2型；糖尿病血管病变；内皮细胞；硫辛酸；氧化性应激；组织工程中图分类号：R453
Alpha-lipoic acid increases circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetes
Li Bopeng 1,2,Chen Shuchun 1,Tang Yong 1,Ren Luping 1(1Endocrinology Department,Hebei General Hospital,Shijiazhuang 050057,Hebei Province,China;2Xingtai Fifth Hospital,Xingtai 054027,Hebei Province,China)
α-硫辛酸通过抗氧化应激改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平
对象：
(1)初诊2型糖尿病患者50例；(2)随机分为2组。
对照组：
(1)20例；
(2)给予胰岛素降糖。
α-硫辛酸组：(1)30例；
(2)在胰岛素的基础上给予600mg 硫辛酸静脉滴注，1次/d 。
观察指标：(1)外周血内皮祖细胞的数量；(2)各项生化指标水平。
结论：
(1)经α-硫辛酸后初诊2型糖尿病患者内皮祖细胞数量显著增加；
(2)超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性增加，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷含量减低；
(3)内皮祖细胞数量的增加与氧化应激相关。
2周
李博鹏，陈树春，唐勇，任路平.α-硫辛酸改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平[J].中国组织工程研究，2019，23(5):803-808.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1560
ISSN 2095-4344
CN 21-1581/R
CODEN:ZLKHAH
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Abstract
BACKGROUND:Previous studies have shown that vascular endothelial dysfunction exists in patients with newly diagnosed type 2diabetes.Alpha-lipoic acid is widely used as an antioxidant in patients with diabetic neuropathy.Can it improve the number of circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetic patients?There is no such report.
OBJECTIVE:To investigate the impact of α-lipoic acid on circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetes mellitus.METHODS:Fifty newly diagnosed type 2diabetes mellitus patients were randomly divided into control group (n =20)and alpha-lipoic acid group (n =30).Superoxide dismutase,glutathione peroxidase,malondialdehyde,8-hydroxydeoxyguanosine,triacylglycerol,total cholesterol,low-density lipoprotein cholesterol,high-density lipoprotein cholesterol levels and number of endothelial progenitor cells were detected in the two groups before and 2weeks after tr
eatment.The differences and correlations between the two groups were analyzed.
RESULTS AND CONCLUSION:In the alpha-lipoic acid group,the number of endothelial progenitor cells,superoxide dismutase,glutathione peroxidase and high-density lipoprotein cholesterol levels were significantly increased after treatment compared with the baseline (P <0.05),while the levels of malondialdehyde,8-hydroxydeoxyguanosine,triacylglycerol,total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol were significantly decreased after the treatment (P <0.05).In the control group,the levels of triacylglycerol,total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol were significantly reduced after treatment compared with the baseline (P <0.05),while the level of high-density lipoprotein cholesterol increased significantly after treatment (P <0.05).Compared with the control group,the number of endothelial
progenitor cells,superoxide dismutase and glutathione peroxidase levels were significantly increased in the alpha-lipoic acid group (P <0.05),while the levels of malondialdehyde and 8-hydroxydeoxyguanosine were decreased in the alpha-lipoic acid group (P <0.05).Multivariate linear regression analysis of the differences of the indexes before and after treatment in the alpha-lipoic acid group showed that the number of endothelial progenitor cells was correlated with the levels of glutathione peroxidase and malondialdehyde.To conclude,the treatment with α-lipoic acid increases the number of circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetes mellitus,which is associated with antioxidative stress.
Subject headings:Diabetes Mellitus,Type 2;Diabetic Angiopathies;Endothelial Cells;Thioctic Acid;Oxidative Stress;Tissue Engineering
0引言Introduction 糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病大血管及微血管并发症是糖尿病致死及致残的主要原因[1]。糖尿病血管并发症的病理基础是血管内皮功能受损。内皮祖细胞(endothelial progenitor cells ，EPCs)是血管内皮的修复因子，可分化为内皮细胞和/或促进血管生成[2-5]。内皮祖细胞功能障碍主要由氧化损伤引起，2型糖尿病患者内皮祖细胞功能障碍主要由一氧化氮系统引起，氧化应激可通过内皮祖细胞数量减少及内皮功能受损引起血管的内皮功能紊乱，进一步导致糖尿病血管并发症的发生[6]。前期研究表明，初诊的2型糖尿病患者已存在血管内皮功能障碍，外周血内皮祖细胞数量较健康人减少[7-8]。α-硫辛酸作为一种抗氧化剂，广泛应用于糖尿病神经病变患者，而其对初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平的影响如何？目前尚无这方面的研究。该研究主要观察α-硫辛酸对初诊2型糖尿病患者超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛及8-羟基脱氧鸟苷含量的影响，同时测定外周循环内皮祖细胞水平，并分析这些指标间的相互关系，为预防和糖尿病血管并发症提供理论依据。
1对象和方法
Subjects and methods
1.1设计随机对照观察试验。1.2
时间及地点
于2014年8月至2015年1月在河北省人
民医院内分泌科病区完成。1.3对象
随机选取就诊的初诊2型糖尿病患者50例，其
中男31例，女19例。采集患者性别、年龄、病程、血压、身高及体质量等一般资料。所有受试者自愿参加此项研究，并签署知情同意书。所有患者给予胰岛素降糖，待空腹血糖<7.0mmol/L 、餐后2h 血糖<10.0mmol/L ，随机分为两组：对照组20例，其中男12例，女8例，年龄(57.40±8.82)岁；α-硫辛酸组30例，其中男19例，女11例，年龄
(56.83±10.33)岁。
WHO 1999年糖尿病诊断标准：有糖尿病症状，随机血糖≥11.1mmol/L 或空腹血糖≥7.0mmol/L ，口服75g 葡萄糖耐量试验2h 血糖≥11.1mmol/L 。
纳入标准：①符合WHO 1999年糖尿病诊断标准；②新诊断的2型糖尿病患者；③未曾应用降糖药者。
排除标准：①心、肝、肾功能严重不全患者；②妊娠及哺乳期妇女；③1型糖尿病患者、2型糖尿病患者合并急性并发症、糖尿病肾病致肾功能衰竭患者、糖尿病视网膜病变增殖期患者；④酗酒、抽烟等不良嗜好者；⑤精神障碍、智力障碍、不理解试验或不同意参与试验者；⑥其他疾病引起的周围神经病变患者。1.4方法1.4.1
随机分组后，对照组给予胰岛素降糖；
α-硫辛酸组在对照组胰岛素的基础上另外给予600mg 硫辛酸(德国STADA 公司)静脉滴注，1次/d ，两组时间均为2周。
1.4.2各项生化指标的测定所有受试者血糖平稳后，经肘静脉抽取空腹血。将EDTA 抗凝的外周血2mL ，放于4℃冰箱保存，待测内皮祖细胞数量；取4mL 血液加入促凝管，摇匀，3000r/min 离心10min ，分离血清，-70℃冰箱保存，待测超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平。所有受试者2周后同上再次采集血液标本。1.4.3
流式细胞仪计数内皮祖细胞
取EDTA 抗凝静脉血
2mL ，加入FITC 标记的CD34单克隆抗体(BD 公司)，加入PE 标记的CD309(又称KDR ，VEGFR-2)单克隆抗体(BD 公司)对细胞进行标记，并设立对照管，经孵育洗涤后用流式细胞仪(FACSCanto TM ，BD)和CellQuest 软件进行检测。通过二维散点图来分析外周血中双阳性细胞，设立散点图
Li BP,Chen SC,Tang Y,Ren LP.Alpha-lipoic acid increases circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetes.
Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu.2019;23(5):803-808.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1560
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(FSC-SSC)，建立单个核细胞(MNC)区。共收集细胞1×105个，CD34和CD309双阳性(CD34+/CD309+)细胞数即为内皮祖细胞数量。1.5
主要观察指标
①两组患者外周血内皮祖细胞的数
量；②两组患者各项生化指标水平。1.6统计学分析
所有数据处理均应用SPSS 17.0软件，
正态分布的计量资料用_
x ±s 表示，非正态分布的资料用中位数表示。单样本前后的比较，符合正态分布且方差齐则采用配对t 检验，不符合正态分布或方差不齐则采用两样本相关的非参数检验(Wilcoxon 符号秩检验)，两样本的差值比较采用两独立样本非参数W
ilcoxon 符号秩检验。某变量与其影响因素的相关性用多元线性回归分析。
2结果Results
2.1参与者数量分析50例初诊2型糖尿病患者随机分为
两组：对照组20例，α-硫辛酸组30例，按意向性处理，均
进入结果分析。2.2
两组间基线资料比较
前两组患者的年龄、性
别、病程、血压、空腹血糖、糖化血红蛋白等各项指标相比，差异无显著性意义(均P >0.05)，见表1。
2.3试验流程图见图1。
2.4对照组前后相关指标比较对照组后内皮
祖细胞数量与前差异无显著性意义(P >0.05)；三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇较前显著下降(P <0.05)
，高密度脂蛋白胆固醇较前明显升高(P <0.05)；超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷与前差异无显著性意义(P >0.05)，见表2。
2.5α-硫辛酸组前后相关指标比较α-硫辛酸组治
疗后内皮祖细胞数量与前相比显著增加(P <0.05)，见图2，3；三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇较治
疗前显著下降(P <0.05)，高密度脂蛋白胆固醇较前显著升高(P <0.05)；超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性较前显著增加(P <0.05)，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平较前显著下降(P <0.05)，见表3。
表1两组患者基线资料比较
Table 1Clinical characteristics of two groups at baseline
项目
李博对照组α-硫辛酸组P 值病例数(男/女，n )20(12/8)30(19/11)0.812年龄(_
x ±s ，岁)57.40±8.8256.83±10.330.851病程(_x ±s ，年)8.2±4.18.8±3.60.416收缩压(_x ±s ，mm Hg)117.52±8.23121.42±9.040.653舒张压(_x ±s ，mm Hg)73.78±7.0772.48±8.210.816空腹血糖(_x ±s ，mmol/L) 5.34±1.02 5.48±0.950.341糖化血红蛋白(_
x ±s ，%) 6.59±0.47 6.68±0.430.522总胆固醇(_
x ±s ，mmol/L) 2.63±0.74
2.31±0.610.120三酰甘油[M(25，75)，mmol/L]
1.56(1.27，1.94) 1.74(1.27，
2.49)0.501
高密度脂蛋白胆固醇(_x ±s ，mmol/L) 2.30±0.82 2.13±0.840.29低密度脂蛋白胆固醇(_
x ±s ，mmol/L) 3.09±0.91 3.02±0.830.49超氧化物歧化酶(_
x ±s ，U/mL)8.55±2.768.35±2.930.83谷胱甘肽过氧物酶(_x ±s ，U)53.06±16.5253.13±16.310.75丙二醛(_
x ±s ，μmol/L)7.06±0.787.02±0.740.608-羟基脱氧鸟苷(_
x ±s ，ng/L)271.24±91.12267.33±67.080.31内皮祖细胞(_
x ±s )
16.82±4.06
17.54±4.18
0.19
初诊2型
糖尿病患者50例，随机分为2组。
对照组20例：
给予胰岛素降糖2周。α-硫辛酸组30例：
在对照组胰岛素的基础上给予600mg 硫辛酸静脉滴注，1次/d ，2周。
对照组20例全部进入结果分析，无脱落。α-硫辛酸组30例全部进入结果分析，无脱落。
图1患者分组流程图Figure 1Trial flow chart
表2对照组前后相关指标比较(n =20)
Table 2Comparison of clinical indexes before and after treatment in control group
指标
前后P 值内皮祖细胞(_
x ±s )
16.82±4.0618.95±3.960.08三酰甘油[M(25，75)，mmol/L] 1.56(1.27，1.94) 1.22(1.03，1.72)0.001
总胆固醇(_
x ±s ，mmol/L)
2.63±0.74
2.15±0.70a 0.000高密度脂蛋白胆固醇(_x ±
s ，
mmol/L) 2.30±0.82 3.67±1.04a 0.000低密度脂蛋白胆固醇(_
x ±s ，mmol/L) 3.09±0.91 2.46±0.68
a
0.000超氧化物歧化酶(_
x ±s ，U/mL)8.55±2.7610.16±2.770.219谷胱甘肽过氧物酶(_x ±s ，U)53.06±16.5255.54±15.960.543丙二醛(_
x ±s ，μmol/L)
7.06±0.787.18±0.750.1828-羟基脱氧鸟苷(_
x ±s ，ng/L)271.24±91.12
259.10±90.25
0.06
图注：Q2象限为CD34、CD309双阳性细胞。图2前内皮祖细胞的流式细胞仪计数
Figure 2Number of circulating endothelial progenitor cells determined by flow cytometry before treatment
表注：与前相比较，a P <0.05。
表注：1mm Hg=0.133kPa 。
李博鹏，陈树春，唐勇，任路平.α-硫辛酸改善初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平[J].中国组织工程研究，2019，23(5):803-808.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1560
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2.6两组间各指标前后差值的比较α-硫辛酸组治
疗前后内皮祖细胞数量差值与对照组比较显著增加(P <0.05)；α-硫辛酸组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性差值较对照组显著增加(P <0.05)，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷显著下降(P <0.05)，见表4。2.7
内皮祖细胞数量与相关参数的相关性
以α-硫辛酸
组前后内皮祖细胞数量的差值作为因变量，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖的差值为自变量进行多元线性回归分析，最优回归方程为：Y =6.349+0.195X 2-3.335X 3，X 2代
表谷胱甘肽过氧物酶差值(P =0.01)，X 3代表丙二醛差值(P =0.041)，结果表明：内皮祖细胞数量与谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛有线性回归关系，谷胱甘肽过氧物酶与内皮祖细胞数量呈正相关，丙二醛与内皮祖细胞数量呈负相关。
3讨论Discussion
1997年Asahara 等[9]在循环外周血中发现了内皮祖细胞，其参与胚胎血管及新生血管的形成[10]，对维持血管内皮细胞的完整性发挥着重要作用[11]。当前最被广泛接受的表面标志物包括CD34、CD133及VEGFR2[12]。该研究通过流式细胞仪检测CD34+/VEGFR2+双阳性的细胞数为内皮祖细胞。内皮祖细胞不仅参与生理性新生血管的形成，而且参与病理条件下的伤口愈合和组织再生(如高血糖、高血脂、高血压、心肌缺血等)[13]。在组织缺血或血管损伤的情况下，骨髓中内皮祖细胞发生增殖、分化并动员至外周血液循环，特异性集中在损伤或缺血部位，增殖、分化为内皮细胞，参与受损部位的新生血管形成和再内皮化[14]。因此，内皮祖细胞可以修复受损的血管内皮功能，并延缓血管内皮损伤的进展[15]。作者先前的研究发现，2型糖尿病、
非糖尿病糖耐量正常的一级亲属及肥胖者存在氧化应激相关的循环内皮祖细胞水平降低及血管内皮功能障碍[16-17]。
作者前期研究表明，在氧化应激状态下，机体氧化酶表达明显增加，促进内皮祖细胞的凋亡而影响其功能及数量，故氧化应激是内皮祖细胞数量改变及功能受损的影响因素[18]。还有研究发现，NADPH 氧化酶(NOX)介导的氧化应激在心血管疾病内皮祖细胞功能障碍中起着关键的作用，而抑制NADPH 氧化酶可以改善内皮祖细胞的功能[19]，可见机体氧化应激导致内皮祖细胞的数量及功能明显受损。因此，该研究观察能否通过抗氧化作用改善糖尿病患
者内皮祖细胞的数量，从而为糖尿病血管并发症的预防及
图注：Q2象限为CD34、CD309双阳性细胞。
图3α-硫辛酸组后内皮祖细胞的流式细胞仪计数
Figure 3Number of circulating endothelial progenitor cells with flow cytometry after treatment in the alpha-lipoic acid group
表3α-硫辛酸组前后相关指标比较(n =30)Table 3Comparison of clinical indexes before and after treatment in the alpha-lipoic acid group
指标
前后P 值内皮祖细胞(_
x ±s )
17.54±4.1838.94±5.50a 0.000三酰甘油[M(25，75)，mmol/L] 1.74(1.27，2.49) 1.25(0.98，1.58)a 0.000
总胆固醇(_
x ±s ，mmol/L) 2.31±0.61 1.87±0.48a 0.008高密度脂蛋白胆固醇(_
x ±s ，mmol/L) 2.13±0.84 3.63±1.42a
0.000低密度脂蛋白胆固醇(_x ±s ，mmol/L)
3.02±0.83 2.46±0.68
a
0.000超氧化物歧化酶(_
x ±s ，U/mL)8.35±2.9315.60±2.74a 0.000谷胱甘肽过氧物酶(_
x ±s ，U)53.13±16.31104.7±18.05a 0.000丙二醛(_
x ±s ，μmol/L)7.02±0.74 5.52±0.71
a
0.0008-羟基脱氧鸟苷(_
x ±s ，ng/L)
267.33±67.08
148.14±50.85a
0.000
表注：与前相比较，a P <0.05。
表4两组各指标前后差值的比较[M(25，75)]Table 4Comparison of the differences before and after treatment between two groups
指标对照组差值α-硫辛酸组差值Z 值
P 值
内皮祖细胞 1.93(1.35，3.08)21.28(17.52，25.50)a -5.9410.000总胆固醇(mmol/L)-0.42
(-0.74，-0.18)-0.41(-0.96，0.22)
-0.3760.707
三酰甘油(mmol/L)-0.18
(-0.51，-0.10)-0.26(-1.18，-0.58)
-0.9210.357
高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L) 1.34(0.84，1.91)
1.16(0.64，1.88)
-0.3070.759
低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)-0.55
(-0.91，-0.31)-0.47(-0.88，-0.15)
-0.3760.707
超氧化物歧化酶(U/mL) 1.92(0.21，2.56)
6.87(6.05，8.50)a
-
5.9420.000
谷胱甘肽过氧物酶(U)
2.48(1.24，
3.79)
51.67(43.34，61.42)a
-5.9430.000丙二醛(μmol/L)0.15(-0.18，0.31)-1.49(-1.71，-1.29)a -5.8820.0008-羟基脱氧鸟苷(ng/L)
-10.67
(-16.99，-3.82)
-117.32
(-132.08，-106.00)a
-5.9410.000
表注：与对照组相比，a P <0.05。
Li BP,Chen SC,Tang Y,Ren LP.Alpha-lipoic acid increases circulating endothelial progenitor cells in newly diagnosed type 2diabetes.
Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu.2019;23(5):803-808.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1560
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提供理论依据。
人体细胞的正常代谢可产生活性氧自由基，但过量的活性氧自由基则会影响核酸结构和代谢，导致DNA 的损伤[20]。超氧化物歧化酶活力可反映机体清除自由基的能力，能清除超氧阴离子保护细胞免受损伤，谷胱甘肽过氧物酶是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶，可还原有毒的过氧化物，分解H 2O 2，二者对机体氧化与抗氧化的平衡起着至关
重要的作用，该研究结果发现，应用α-硫辛酸的糖尿病患者内皮祖细胞数量、抗氧化酶的活性较前明显增加，三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平显著下降，高密度脂蛋白胆固醇水平升高。8-羟基脱氧鸟苷是目前公认的衡量氧化应激及DNA 氧化损伤的高效指标[21]，是评价糖尿病患者mtDNA 氧化损伤的生物标志物。丙二醛是脂质过氧化产物，可反映体内脂质过氧化的程度，该研究发现经α-硫辛酸后丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平显著减低。α-硫辛酸在减轻氧化应激状态的同时，具有恢复机体抗氧化能力的作用。该研究对两组患者各参数前后的差值进行比较，应用α-硫辛酸前后糖尿病患者内皮祖细胞数量差值较对照组显著增加，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶活性的差值较对照组显著增加，丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷的差值显著下降，表明糖尿病患者通过α-硫辛酸抗氧化，其循环内皮祖细胞水平明显升高。
内皮祖细胞对于血管的稳态起着关键作用，内皮祖细胞的功能失调与受损是形成动脉粥样硬化的始发因素[22-23]。氧化应激的增强可导致循环内皮祖细胞数量减少及功能受损，从而影响血管稳态
[24]
，氧化型低密度脂蛋白促进了动
脉粥样硬化的发生发展，加速内皮祖细胞的凋亡[25]。氧化应激是引起2型糖尿病并发症发生和持续细胞损伤的重要危险因素[26-27]，通过线粒体电子传递链、葡萄糖自氧化及多元醇通路等途径[28]，增加机体内的活性氧与活性氮含量，使血管内皮功能受损及一氧化氮产生减少，导致糖尿病相关性动脉粥样硬化及其内皮功能障碍、糖尿病肾病、糖尿病视网膜
病变、糖尿病神经病变等多种并发症的发生[29]。α-硫辛酸是一种天然的强抗氧化剂，可以清除机体生理和病理过程中的各种自由基[30]，减轻机体氧化应激，2型糖尿病患者内皮祖细胞功能障碍主要由一氧化氮系统引起，而α-硫辛酸能够改善其抗氧化能力及一氧化氮的分泌，从而保护内皮祖细胞功能[31-32]。动物实验亦表明，α-硫辛酸通过内皮型一氧化氮合酶的高表达及提高一氧化氮生物利用度来改善高脂喂养糖尿病大鼠血管内皮功能及机体的氧化应激水平[33]。
目前国内外关于α-硫辛酸对内皮祖细胞改善的临床研究尚无报道，为进一步了解α-硫辛酸对内皮祖细胞数量改变与氧化应激是否相关，该研究以α-硫辛酸组内皮祖细胞数量的差值作为因变量，以超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷、三酰甘油、总胆固醇、
低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖的差值为自变量进行多元线性逐步回归分析，结果表明内皮祖细胞数量与谷胱甘肽过氧物酶、丙二醛有线性回归关系，谷胱甘肽过氧物酶与内皮祖细胞数量呈正相关，丙二醛与内皮祖细胞数量呈负相关，因此，内皮祖细胞数量与氧化应激之间存在相关性，说明α-硫辛酸的抗氧化作用可以通过减轻初诊2型糖尿病患者氧化应激水平，增加循环内皮祖细胞水平。该试验结果尚需大样本的研究进一步证实。
总之，α-硫辛酸通过抗氧化应激增加初诊2型糖尿病患者循环内皮祖细胞水平，对预防、延缓及糖尿病血管并发症具有重要意义。
作者贡献：陈树春指导试验设计及论文修改，李博鹏参与试验实施，任路平负责试验评估，唐勇负责资料收集。
经费支持：该文章没有接受任何经费支持。
利益冲突：文章的全部作者声明，在课题研究和文章撰写过程中不存在利益冲突。
机构伦理问题：该临床研究的实施符合《赫尔辛基宣言》和河北省人民医院对研究的相关伦理要求。
知情同意问题：参与试验的患病个体及其家属为自愿参加，所有患者均对试验过程完全知情同意，在充分了解本方案的前提下签署了“知情同意书。
写作指南：该研究遵守国际医学期刊编辑委员会《学术研究实验与报告和医学期刊编辑与发表的推荐规范》。
文章查重：文章出版前已经过专业反剽窃文献检测系统进行3次查重。
文章外审：文章经小同行外审专家双盲外审，同行评议认为文章符合期刊发稿宗旨。
生物统计学声明：文章统计学方法已经通过河北省人民医院生物统计学专家审核。
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