外植体消毒方法
第一篇：外植体消毒方法
外植体消毒、材料：油菜、番茄、芝麻等种子或其他培养材料。、仪器：超净工作台，含 MS 培养基的培养瓶，镊子，培养皿，酒精灯，接种器械（解剖刀、剪子、镊子等）。、试剂： 70% 酒精，95% 酒精，0.1% 或漂白粉、无菌水等。方法步骤 1、用水和肥皂洗净双手，穿上灭过菌的专用实验服、帽子与鞋子，进入接种室。2、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯，照射 20 分钟。、上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，然后用 70% 酒精喷雾降尘，并擦拭工作台面。、先用酒精棉球擦拭接种工具，再将镊子和剪子蘸 95% 酒精在酒精灯火焰上灼烧，放置冷却。、修整接种材料，除去不用的部分，然后进行外植体消毒：（1）水洗，滤纸吸干。
（2）70% 酒精中浸泡约 30-60 秒（注意：酒精穿透力很强，时间不宜过长，以免损伤材料组织细胞）。（3）在 0.1% 中浸泡 10 分钟；或在 10% 漂白粉上清夜中泡 10-15 分钟；（4）无菌水冲洗 3-5 次。、接种：将种子或其他培养材料放到培养基上。
（1）先解开包口纸，将试管或培养瓶拿成斜角，使瓶口在酒精灯火焰上方灼烧数秒钟。
（2）用灼烧过的冷却的镊子取外植体材料转接到试管或培养瓶中，轻轻插入或放在培养基表面。
（3）接种完毕后，将瓶口在火焰上转动灼烧，封口。（4）操作期间应经常用 70% 酒精擦拭工作台和双手；接种器械应反复在 95% 酒精中浸泡和火焰上灼烧灭菌。注意：双手不能离开工作台，不能说话、走动或咳嗽等。、接种结束后，清理和关闭超净工作台，并用 70% 酒精擦拭工作台面。
第二篇：外植体灭菌
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外植体灭菌
对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、无菌水、手表等。用酒精浸10-30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用酒精处理稍长的时间。
是由重金属离子汞来达到灭菌的，一般处理5-8min，用无菌水冲3-10次。
吐温是表面活性剂，主要作用使药剂更容易展布，更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材料的伤害也在增加，应注意吐温的用量和灭菌时间。处理完的材料在无菌条件下，取用内部材料。
第三篇：植物组培外植体消毒详解
植物组培外植体消毒详解
外植体的消毒
植物组织培养用的外植体大部分取自田间，表面上附着大量的微生物，这是组织培养的一大障碍。因此在材料接种培养前必须要消毒处理，消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。
（1）常用的消毒剂
常用的消毒剂如下表所示。理想的消毒剂应具有消毒效果好，易被无菌水冲洗掉或能自行分解，对材料损伤小，对人体及其他生物无害，来源广泛，价格低廉。
常用消毒剂的使用方法及效果
①酒精
酒精是最常用的表面消毒剂，以70%~75%酒精杀菌效果最好，95%或无水酒精会使菌体表面蛋白质快速脱水凝固，形成一层干燥膜，阻止了酒精的继续渗入，杀菌效果大大降低。
酒精具有较强的穿透力，使菌体蛋白质变性，杀菌效果好。同时它还具有较强的湿润作用，可排除材料上的空气，利于其他消毒剂的渗入。但酒精对植物材料的杀伤作用也很大，浸泡时间过长，植物材料的生长将会受到影响，甚至被酒精杀死，使用时应严格控制时间。但酒精不能彻底消毒，一般不单独使用，多与其他消毒剂配合使用。
②
又称，Hg2+可以与带负电荷的蛋白质结合，使蛋白质变性，从而杀死菌体。的
消毒效果极佳，但易在植物材料上残留，消毒后需用无菌水反复多次冲洗。对环境危害大，对人畜的毒性极强，使用后应做好回收工作。
③次氯酸钠
次氯酸钠是一种较好的消毒剂，它可以释放出活性氯离子，从而杀死菌体。其消毒能力很强，不易残留，对环境无害。但次氯酸钠溶液碱性很强，对植物材料也有一定的破坏作用。河正宇父亲
林宥嘉求婚④漂白粉
漂白粉的有效成分是次氯酸钙[Ca(ClO)2]，消毒效果很好，对环境无害。它易吸潮散失有效氯而失效，故要密封保藏。
⑤过氧化氢
也称双氧水，消毒效果好，易清除，又不会损伤外植体，常用于叶片的消毒。
⑥新洁尔灭
这是一种广普表面活性消毒剂，对绝大多数植物外植体伤害很小，杀菌效果好。
（2）消毒方法
①茎尖、茎段及叶片等的消毒
消毒前先对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，然后用自来水冲洗。对于一些表面不光滑或长有绒毛的材料，可用洗涤剂清洗，必要时用毛刷充分刷洗，硬质材料可用刀刮。消毒时在超净台上操作，先用70%酒精浸泡10~30s，以无菌水冲洗2~3次，然后按材料的老、嫩和枝条的坚实程度，分别采用2%次氯酸钠浸泡10~15min或用0.1%浸5~10min。消毒时要不断搅动，使植物材料与消毒剂充分地接触。若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴Tween-20，最后用无菌水冲洗3~5次。
②果实及种子的消毒
先用自来水冲洗10~20min，再用酒精迅速漂洗一下。果实用2%次氯酸钠浸10min，后用无菌水冲洗2~3次。种子则先用10%次氯酸钠浸泡20~30min，难以消毒的可用0.1%消毒5~10min。对于种皮太硬的种子，也可预先去掉种皮，再用4%次氯酸钠浸泡8~10min。
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③花药的消毒
用于组织培养的花药多未成熟，其外面有花萼、花瓣或颖片保护，处于无菌状态。消毒时将整个花蕾或幼穗用70%酒精浸泡数秒钟，然后用无菌水冲洗2~3次，再在漂白粉中浸泡10min，最后用无菌水冲洗2~3次。
④根及底下部器官的消毒
由于这类材料生长于土壤中，表面带菌量大，消毒较为困难。可先用自来水冲洗，软毛刷刷洗，用刀切去损伤及污染严重部位，再用酒精漂洗后，置于0.1%中浸5~10min或2%次氯酸钠中浸10~15min，最后用无菌水冲洗3次。
在操作时要根据材料的大小、幼嫩、质地等差异做出判断后，再选择适宜的消毒剂种类、浓度和消毒时间，切不可生搬硬套。消毒的最佳效果应以最大限度地杀死材料上的微生物，而又对材料的损伤最小为好。
第四篇：无菌室消毒方法
无菌室的消毒灭菌
无菌室的消毒灭菌，可采取以下几种方法：
l．用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升，进行熏蒸。使用时，先密闭门窗，量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾，人员随之离开接种室，关紧房门，熏蒸20—30分钟即可。王大山是什么电视剧
2．0.1％水消毒：用0.1％水浸过的纱布或海绵进行指擦，或用喷雾器喷雾灭菌，使箱内的上下左右都沾上水，手也可用水消毒，并把袖子卷起来。喷雾后 20～30分钟，箱内的杂菌和雾滴一起落到箱底被杀死，内部的空气就变得很清洁。
3．紫外线照射灭菌：在无菌箱中装一支200伏、3O瓦的紫外线灯管；每次开20～30分钟，就能达到空间杀菌的 目的。照射结束后，罩黑布半小时，以增强杀菌效果。
4．石炭酸喷雾：在每次接种之前，用5％石炭酸溶液喷雾，可促使空气中的微粒和杂菌沉降，防止桌面微尘飞扬，并有杀菌作用。
5．石灰揩擦：经常用药物熏蒸，易造成酸性环境，特别用甲醛和高锰酸钾熏蒸长久，污染往往越来越严重，预防办法可把各种药品交替使用，过一段时间（约五周）用石灰擦洗一
遍。实践证明，这样做效果很好。
李宇春主演的电影第五篇：幼儿园消毒方法
幼儿园常用消毒的方法
物理消毒：①开窗通风：每天通风2-3次，并且在30分钟以上。特别是白天开空调的时候。
②紫外线消毒：每次消毒30分钟以上，必须在无人的情况下，避免紫外线对人眼睛和皮肤的灼伤，消毒后要开窗通风，驱散残留臭氧后才可进入室内。
化学消毒：含氯消毒剂（消毒片），小桶和大桶都贴有标识，先放入清水到标识处，早上来园小桶放入半片消毒片，依次擦拭茶杯架、桌、椅、柜子、窗、墙壁。大桶泡放2.5片消毒片，消毒拖把，拖走廊、教室、厕所。注意：消毒片充分溶化并搅拌后才可使用。
玩具消毒方法：塑料玩具清洗干净后用消毒液浸泡30分钟，再用流动水清洗干净，晾干。玩具一般每周消毒一次。
席子消毒方法：每天用温水擦试。每周1-2次用消毒液擦，过20分钟后再用清水擦一遍，晾
干，以免幼儿皮肤受损。发生传染病的班级每天都必须消毒一次。