凯氏定氮操作步骤
1．消化：精密称取大豆样品1.0g左右，放入干燥的250 ml消化管中，加入0.4g CuSO4、7g K2SO4、10ml H2SO4。先200℃炭化，待泡沫停止后提高温度到450℃，加热至液体沸腾，待瓶内液体呈蓝绿透明后，再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水，移入100ml 容量瓶中，用少量水洗涤消化管2～3次，洗液合并于容量瓶中定容
初三数学上册期末试卷张悬 国旗2．蒸馏：连接凯氏定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及数ml硫酸，保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以防暴沸，调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
3．吸收：向吸收瓶内加入20g/L硼酸溶液20ml及混合指示剂2滴，并使冷凝管下端插入液面以下，吸取10ml样品消化稀释液由进样口进入反应室，并以10ml水洗涤进样口使其流入反应室内，将400g/L NaOH溶液10ml倒入进样口，立即夹紧螺旋夹，并加入少量蒸馏水，密封进样口。当蒸汽通入反应室时，准确计时，反应产生的氨气通过冷凝管进入吸收瓶，蒸馏5min，移动吸收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下吸收瓶。
洗涤：停止加热，使反应室内的液体进入汽水分离器，打开进样口的螺旋夹，将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水，夹紧螺旋夹，再次进行加热至水蒸汽放出，停止加热，使反
应室内的水进入汽水分离器，进行洗涤。
4．滴定：用0.025mol/L硫酸标准溶液滴定吸收液至灰。
5．计算：
X＝2cV×14×5.71/m
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X为样品中蛋白质的含量，％；c为硫酸标准溶液的浓度，mol/L；
V为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积，ml；m为样品的质量，g。督查制度
凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定蛋白质的国标方法。2%硼酸溶液是测定方法中碱化蒸馏时所使用的吸收液，用来吸收游离出的氨，然后用盐酸或硫酸标准溶液滴定，根据混合指示剂颜变化判断终点。
1 试剂与方法
1.1  2%硼酸吸收液的配制方法 (1)将2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液混合。(2)将适量上述混合指示剂一次性加入已配制好的2%硼酸溶液中，使溶液呈蓝紫。
1.2  2%硼酸吸收液使用方法按照国标方法（GB5009.5―85）操作，在平行试验时，可将已滴定至终
点的2%硼酸吸收液重复使用。
1.3 配制方法配制2%硼酸吸收液时，混合指示剂加入量不宜过多，以透过试剂瓶观察蓝紫刚好透明为宜。若溶液偏蓝，用0.1%甲基红乙醇溶液调至蓝紫；反之若偏紫红，可用0.1%次甲基蓝乙醇溶液调至蓝紫。
1.4 配制后的2%硼酸吸收液可行预试验即取少量吸收液于试管中，加入1滴氨水（1+2）观察其颜变化是否明显与正常。
1.5 反应原理样品中的蛋白质经硫酸和催化剂消化后，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用2%硼酸溶液吸收生成硼酸铵。其反应为：2NH3+4H3BO3→（NH4）2B4O7+5H2O 使吸收液由酸性变为碱性，混合指示剂由蓝紫变为绿，然后用盐酸或硫酸标准溶液滴定，使混合指示剂再由绿返至蓝紫即为终点。重复使用时，仍可按上述原理反应。
1.6 终点颜滴定终点观察颜时，样品消化液终点与空白消化液终点应调一致。
2 结果
一次使用2%硼酸吸收液的国标方法与重复使用2%硼酸吸收液的新方法进行对照实验，经t检验，t=0.676, P＞0.05，两种使用方法差异无显著性。对照实验结果见表1。陈念北野七年后
表1 对照实验结果（略）
使命召唤4图文攻略3 讨论
用一次性加入混合指示剂的方法配制2%硼酸吸收液，将已滴定至终点的吸收液重复使用，用于平行实验。这样可简化实验操作，尤其在进行批量样品检验时，对于2%硼酸吸收液可不必逐个滴加混合指示剂，减少50%吸收次数，节约50%用量，从而提高工作效率和经济效益。