用液体石蜡保存菌种的新方法
关键词:菌种保存;液体石蜡
2 保存菌种的效果见表to
在临床细菌学工作中,常将液体石蜡加于高层琼脂表面或半固体琼脂斜面,以延长细菌的生命。有鉴于此,笔者尝 如何设置u盘启动
表1
赵本山和于月仙
三种方法保存菌种的效果
试了几种保存菌种的新方法,现简介如下。
存活时间(4℃)
方法菌种举例
1 方法
王洋王煜剧中接吻
金黄葡萄球菌普通变形杆菌6个月以上
琼脂切块法
1. 1 琼脂切块保存法取12 mm x 100 mm试管数支,每管福氏志贺菌伤寒沙门菌3个月以上
加液体石蜡(医用或化学纯)约2 ml,试管口加上透气塞干烤同上2个月以上
挖沟“孤岛”法
(150℃x 1 h)灭菌,待冷后换上消毒的(100℃煮15 min)胶
福氏志贺菌伤寒沙门菌2个月以上
微量生化鉴定管法
塞,置4℃冰箱备用。
用接种环将待保存的细菌菌落连同局部的琼脂(普通琼
3 讨论
脂培养基)切割成约8 mm x 8 mm x 8 mm的小块,置于上述上述三法都只适用于临时性的保存菌种,主要优点是便试管中,菌落面勿贴管壁。盖紧胶塞,置4℃冰箱保存。捷。市售化学纯液体石蜡是无油状混合物,冷凝点在
1.2 挖沟“孤岛”保存法在分离培养之可疑菌落局部或纯
一17.7℃一4.4℃之间。笔者采用的是武汉江北化学试剂
培养(普通琼脂培养基)菌苔局部或“药敏”平板(M-H琼脂
厂的产品(批号:916023等),在一5℃环境中不结冰。将普
培养基)菌苔局部的外周挖沟,以形成“孤岛”,然后将灭菌通变形杆菌、金黄葡萄球菌用琼脂切块法保存于这一环境液体石蜡注满小沟并覆盖至“孤岛”之菌落表面上,盖上皿中,维持活力分别在12个月以上及10个月以上。若液体石盖,不可倒置,放4℃冰箱保存。
蜡结冰,细菌便很快死亡。
1.3 微量生化鉴定管保存法用无菌毛细吸管取无菌液体
(收稿日期:2004-12-28,修回日期:2005-05-23 石蜡,插人到微量细菌生化鉴定管(已报告结果),在近液面(本文编辑:杨林)
处加液体石蜡,边加边外移毛细吸管。再轻甩以排出管中之气泡,置4℃冰箱保存。临床检验杂志2005年第23卷第5期
贴壁细胞在载玻片上爬片的新方法.中国应用生理学杂志,2009,25(2):283-284.
贴壁细胞在载玻片爬片的新方法
徐洪1,宋旭东1△,李莹2,代健1
(1.华北煤炭医学院病理学教研室,2.血液内科教研室,河北唐山063000)
摘要目的:对传统细胞爬片方法进行改良。方法:利用1ml蓝头和载玻片制作,在载玻片上种植细胞制成细胞爬片,进行后续染。结果:细胞直接爬于载玻片上,未发现细胞污染和增殖受限。与传统爬片相比细胞脱落少。结论:与传统爬片染方法相比具有用材简单、价格低廉、爬片效果好、操作方便等优点。
关键词:细胞爬片;细胞培养
中图分类号:R36 文献标识码:A 文章编号:1000-6834(2009) 01-
The New Method of Cells Growing on the Glass Slide
Xu Hong1 , Song Xudong 1, Li ying2 , Dai Jian1
( 1. Department of pathology , North China Coal Medical University , 2. Department of Blood
Internal Medicine, Heibei province , Tangshan 063000 , China )
ABSTRACT
里怎么拍一拍Aim : To improved the method of cell growing on the slide . Methods : Cells were planted in a system making by 1 ml tips and slide . Result : Cells grow on the slide directly , no pollution and well proliferation , was fewer dropped off the slide than the traditionary method . Conclusion : The improved method had the advantages including easy-material ,
洛克人x8图文攻略 low-price , well-effect and convenient-operation , prior to the traditionary method .
KEY : cell growing on the glass slide ; cell culture
在细胞培养中观察细胞形态时,除了使用倒置相差显微镜以外,还需要进行普通或者特殊染,这时候就需要制作细胞爬片。常规的制作贴壁细胞爬片的方法,经常是在装有盖玻片或专用细胞爬片上种植爬片,在染过程中操作起来比较繁琐。经过多次实践,对传统爬片方法进行改良,研究了一种在载玻片上直接进行爬片的方法,与市售Lab-Tek腔室玻片原理相同,现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 材料
普通载玻片和1ml tips若干。细胞:Eca-109食管癌细胞株(华北煤炭医学院中心实验室保存)。
梦幻西游怎么赚钱最快1.2 方法
取1000μl tips若干,在其尾端剪下12mm长的筒管一个,重复制作得到若干筒管备用。2)将得到的筒管用适量中性树胶粘贴到载玻片上,方向为原tips尾端(直径为8mm)朝下,断端朝上,在载玻片中下2/3的位置,成对称双行排列,同时粘贴4-6个筒管(见图1)。中上1/3位置为书写标记区域。干燥固定后放入饭盒内进行高压灭菌消毒。超净台内制备细胞悬液,每孔放置细胞悬液400 ul。置入无菌饭盒中,放入37℃、5%CO2饱和湿度培养箱孵育24h或按照实验设计的时间孵育。待细胞贴壁后去除筒管,用4%多聚甲醛将载玻片固定30分钟。HE染,镜下观察。同时用传统方法进行爬片,镜下观察并比较。
2 结果
用此种方法爬片,细胞直接爬于载玻片上,未发现细胞污染和增殖受限,细胞生长状态良好、分布均匀,无明显脱片现象(图2)。图3为传统爬片,可见部分细胞脱落。与传统爬片方法相比,具有用材简单、价格低廉、爬片效果好、操作方便等优点。
3 讨论
在实验过程中,根据细胞爬片的基本原理,通过实际操作,摸索并总结经验,对传统的爬片模式
进行了改良。对于贴壁细胞来讲,提供一个合适的培养环境即可在平面(玻璃、塑料等)上贴壁生长。细胞如果能在盖玻片上贴壁生长,在载玻片上也一样可以贴壁生长的。