HPLC法测定含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量洗葡萄的方法
目的:建立一种测定含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。方法:以我院中药制剂养肝益水颗粒为模型药物,参照2015年版《中国药典》(一部)(简称“药典”)中“黄芪”项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷高效液相谱(HPLC)含量测定方法,采用药典谱条件并在此基础上,通过增加流动相甲酸比例、延长流动相大极性段洗脱时间等方法进行优化改进,建立含黄芪中药制剂中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法,并进行方法学考察。然后用另外2种含黄芪的中药制剂对该法进行初步验证。结果:在药典谱条件下,模型药物中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷谱峰不能与基线分离;优化后,得到流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液(14 房屋结构改造加固 86,V/V),检测波长为260 nm,柱温为30 聂云竹,流速为1.0 mL/min的譜条件。优化条件下毛蕊异黄酮葡萄糖苷质量浓度线性范围为5.08~81.28 μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均97.1%);甲醇、乙腈均为谱纯,水为蒸馏水,其余试剂均为分析纯。金属的腐蚀与防护
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2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 供试品溶液的制备 取养肝益水颗粒(批号:20160711)适量,于研钵中研细,精密称取2 g药粉,加入圆底烧瓶中;再加入50 mL甲醇并称质量,于水浴锅上加热回流4 h;于室温下放冷,再称质量,并用甲醇补足减失的质量,摇匀后滤过,取续滤液25 mL,置于蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇定容至10 mL量瓶中,摇匀,即得。
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称定毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品6.35 mg,加甲醇定容至50 mL量瓶中,摇匀,即得。
2.2 优化毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定谱条件送花的含义
2.2.1 药典谱条件 参考药典“黄芪”项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定的谱条件[2]。谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);检测波长为260 nm;柱温为30 ;进样量为10 μL;流速为1.0 mL/min;乙腈为流动相A,0.2%甲酸溶液为流动相B,梯度洗脱(0~20 min,20%→40%A;20~30 min,40%A);对供试品溶液及对照品溶液进行分析。结果,供试品溶液中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷与基线不能分离,需进一步试验。谱图详见图1。