第48卷第3期第287页2019年6月㊀㊀㊀㊀华中科技大学学报(医学版)A c t aM e dU n i vS c iT e c h n o lH u a z h o n g
㊀㊀㊀㊀V o l .48㊀N o .3㊀P .287J u n .㊀2019∗国家自然科学基金资助项目(N o .81201816)苏㊀红，女,1973年生，讲师,E -m a i l :s u u h o n g @163.c o m ә通讯作者,C o r r e s p o n d i n g a u t h o r ,E -m a i l :w l y 0410@163.c o m 羟基氯喹对小鼠结直肠癌细胞增殖㊁凋亡㊁迁移㊁
超微结构及相关炎性因子表达的影响∗
苏㊀红1,㊀张晨光2,㊀王俐勇3ә
1
陕西省宝鸡职业技术学院医学院，宝鸡㊀721013
首都医科大学2基础医学院3中心实验室，北京㊀100069
张晨光摘要：目的㊀探究羟基氯喹对小鼠结直肠癌细胞增殖㊁凋亡㊁迁移㊁超微结构及相关炎性因子表达的影响㊂方法㊀建立A OM /D S S 诱导的小鼠结直肠癌模型，采用苏木精-伊红(H E )染观察正常组㊁结直肠癌模型组㊁羟基氯喹干预组小鼠结直肠组织病理学变化㊂原代分离各组结直肠细胞,C C K 8法检测细胞增殖,
流式细胞术检测细胞周期与凋亡，电镜观察细胞超微结构,O r i s T M 细胞接种限位法检测细胞迁移,E L I S A 方法检测炎性因子T o l l 样受体4(T L R 4)
㊁白细胞介素(I L )-1β㊁I L -18㊁肿瘤坏死因子-α(T N F -α)㊁β干扰素(I N F -β)表达㊂结果㊀成功构建A OM /D S S 诱导的小鼠结直肠癌模型，相对结直肠癌模型组肠腺体结构不规则㊁杯状细胞减少㊁溃疡形成等病理学表现，羟基氯喹明显改善模型小鼠肠道组织病理情况㊂细胞实验结果表明：羟基氯喹干预可以显著抑制肿瘤细胞增殖活力，且通过发生S 期阻滞,D N A 合成受阻影响细胞周期；促进肿瘤细胞凋亡，降低肿瘤细胞迁移能力，在一定程度上改善结直肠肿瘤细胞超微结构，显著降低
T L R 4㊁I L -1β㊁I L -18㊁T N F -α㊁I N F -β等炎性因子的表达㊂结论㊀羟基氯喹可以通过抗肿瘤和抗炎双重作用对小鼠结直肠
癌起作用，为将来临床靶向提供了新的思路和理论依据㊂
关键词：羟基氯喹;㊀小鼠结直肠癌;㊀增殖;㊀凋亡;㊀迁移;㊀细胞超微结构;㊀炎性因子
中图分类号:R 735.35㊀㊀D O I :10.3870/j .i s s n .1672-0741.2019.03.007E f f e c t s o fH y d r o x y c h l o r o q u i n e o n t h eP r o l i f e r a t i o n ,A p o p t o s i s ,M i g r a t i o n ,U l t r a s t r u c t u r e o fM o u s eC o l o r e c t a l C a n c e rC e l l s a n dR e l a t e d I n f l a m m a t o r y F a c t o r sE x p
r e s s i o n S uH o n g 1,Z h a n g C h e n g u a n g 2,W a n g L i y o n g
3ә1B a o j iV o c a t i o n a lT e c h n o l o g y C o l l e g eM e d i c a lB r a n c h ,B a o j i 721013,C h i n a 2B a s i cM e d i c a lS c h o o l ,3C e n t r a lL a b o r a t o r y ,C a p i t a lM e d i c a lU n i v e r s i t y ,B e i j i n g ,100069,C h i n a A b s t r a c t ㊀O b j e c t i v e ㊀T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o f h y d r o x y c h l o r o q u i n e o n t h e p r o l i f e r a t i o n ,a p o p t o s i s ,m i g r a t i o n ,u l t r a s t r u c -t u r e o fm o u s ec o l o r e c t a l c a n c e rc e l l sa n dr e l a t e di n f l a m m a t o r y f a c t o r se x p r e s s i o n .M e t h o d s ㊀W ee s t a b l i s h e dc o l o r e c t a l c a n c e r m o d e l i n d u c e db y A OM /D S Sa n do b s e r v e dt h e p a t h o l o g i c a lc h a n g e so ft u m o rt i s s u e sb y H Es t a i n i n g t e c h n i q u e si nn o r m a l g r o u p ,c o l o r e c t a l c a n c e rm o d e l g r o u p a n dh y d r o x y c h l o r o q u i n e i n t e r v e n t i o n g r o u p .A f t e r p r i m a r y s e p a r a t i o n o f c o l o r e c t a l c e l l s ,w e d e t e c t e dc e l l p r o l i f e r a t i o n b y C C K 8m e t h o d ,m e a s u r e d c e l l c y c l e a n d a p o p t o s i s b y f l o wc y t o m e t r y t e c h n o l o g y ,o b s e r v e d c e l l u l t r a -s t r u c t u r eb y e l e c t r o nm i c r o s c o p e ,d e t e c t e d c e l lm i g r a t i o nb y O r i s T M p r o j e c t i n o c u l a t i o n l i m i tm e t h o d ,a n dm e a s u r e dT L R 4,I L -1β,I L -18,T N F -α,a n d I N F -βe x p r e s s i o nb y E L I S A m e t h o d .R e s u l t s ㊀I n c o l o r e c t a l c a n c e rm o u s em o d e l ,w e f o u n d t h a t h y d r o x y c h l o -r o q u i n e s i g n i f i c a n t l y i
m p r o v e d t h e i n t e s t i n a l t i s s u e p a t h o l o g i c a l c h a n g e s ,w h i c hw a s c h a r a c t e r i z e db y i r r e g u l a r s t r u c t u r e ,r e d u c e d g o b l e t c e l l s ,a n du l c e r a t i o n .T h e r e s u l t s o f c e l l e x p e r i m e n t s s h o w e d t h a t i n t e r v e n t i o no f h y d r o x y c h l o r o q u i n e s i g n i f i c a n t l y i n h i b i -t e d t h e p r o l i f e r a t i o na c t i v i t y o f t u m o r c e l l s ,a n da f f e c t e dc e l l c y c l eb y b l o c k i n g c e l l c y c l e p r o g r e s s i o nt h r o u g ht h eS p h a s ea n d D N As y n t h e s i s ,p r o m o t e d t u m o r c e l l a p o p t o s i s a n dr e d u c e d t u m o r c e l lm i g r a t i o na b i l i t y ,i m p r o v e d t h e c o l o r e c t a l t u m o r c e l l u l -t r a s t r u c t u r e t o a c e r t a i ne x t e n t a n ds i g n i f i c a n t l y r e d u c e d i n f l a m m a t o r y f a c t o r sT L R 4,I L -1β,I L -18,T N F -α,a n dI N F -βe x p r e s -s i o n .C o n c l u s i o n ㊀H y d r o x y c h l o r o q u i n e p l a y s a r o l e i n t h e p r e v e n t i o na n d c o n t r o l o f c o l o r e c t a l c a n c e rb y a n t i -t u m o r a n da n t i -i n -f l a m m a t i o n ,a n d p r o v i d e sn e wi d e a s a n d t h e o r e t i c a l b a s i s f o r f u t u r e c l i n i c a l t a r g e t i n g t h e r a p y .K e y w o r d s ㊀h y d r o x y c h l o r o q u i n e ;㊀m o u s ec o l o r e c t a l c a n c e r ;㊀p r o l i f e r a t i o n ;㊀a p o p t o s i s ;㊀m i g r a t i o n ;㊀u l t r a s t r u c t u r eo f c e l l s ;㊀i n f l a m m a t o r y f
a c t o r s ㊀㊀结直肠癌是全世界发病率㊁
死亡率位居前列的消化道恶性肿瘤之一，它严重威胁人类的生命与健
康㊂根据世界卫生组织(W o r l d H e a l t h O r g a n i z a -t i o n ,WH O )国际癌症研究机构I A R C 最新公布的全球统计资料结果显示：世界新发恶性肿瘤约1410万例，死亡人数约820万；其中结直肠癌新发病例约140万例，死亡人数约69.4万；发病率(10%)和死