附件8：
化妆品中奎宁的检测方法
1 范围
本方法规定了采用高效液相谱法测定化妆品中奎宁（CAS：130-95-0）含量的方法。
本方法适用于淋洗型香波、驻留型护发类化妆品中奎宁含量的测定。
2 方法提要
试样采用甲醇超声提取，上清液经滤膜过滤用液相谱分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法对奎宁的检出限为0.00156μg，定量下限为0.005 μg。若取0.25g样品，本方法对奎宁的检出浓度为16.7ug/g，最低定量浓度为56ug/g。
3 试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。
1.1甲醇，谱纯。
1.2磷酸氢二铵，谱纯。
1.3奎宁，纯度≥98%。
3.4奎宁标准储备液：取奎宁约0.0500g，精确到0.0001g，置50 mL棕容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容至刻度，摇匀，配成质量浓度为1.0 g/L的标准储备溶液。
3.5奎宁标准工作溶液：精密配制浓度分别为1.0 μg/mL、10.0 μg/mL、30.0 μg/mL、80.0 μg/mL、120.0 μg/mL和200.0 μg/mL的系列奎宁标准工作溶液。
4 仪器
4.1高效液相谱仪：具有紫外检测器。
4.2微型涡旋混合仪。
4.3超声波清洗器。
4.4分析天平：感量0.0001g。
4.5微量进样器，50μL或100μL。
5 测定步骤
5.1 样品前处理
准确称取混匀的试样约0.250g ，精确至0.001g ，置于25mL 具塞刻度管中，加入20 mL 甲醇（3.1），涡旋1 min ，振摇，超声（功率：400W ）提取30 min ，取出后冷却至室温，用甲醇（3.1）定容至25 mL 刻度线，涡旋振荡摇匀，取上层液经0.45 μm 滤膜过滤，滤液作为待测样液，备用。
5.2测定
5.2.1谱条件
谱柱：C 18 柱，250 mm×4.6mm ，5 μm ；
流动相：甲醇+0.01mol/L(NH 4)2HPO 4（90+10）；
流速：1.0 mL/min ；
检测波长：328 nm ；
柱温：30℃；
进样量：20μL 。
5.2.2 测定方法
取标准工作溶液分别进样，以峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标进行线性回归，建立标准工作曲线。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样，根据测定成分的峰面积，代入标准工作曲线上得出奎宁的质量浓度。按“6计算”，计算试样中奎宁的含量。
5.3 平行实验
按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
6 计算
610010D V m ρω=
⨯⨯ 式中：ω —— 化妆品中奎宁的质量分数，单位为克每百克，%；
D —— 样品稀释倍数；
ρ —— 测定成分的峰面积代入回归方程计算所得的奎宁质量浓度，μg/
mL；
V ——样品定容体积，mL。
m ——样品取样量，g；
7 精密度与准确度
多家实验室验证的回收率为90~115%，相对标准偏差小于7%。
8 谱图
奎宁标准溶液的高效液相谱图
关于教师节的名言谱峰：奎宁（T R=4.8min）
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