实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞
一、实验目的：
1、学会如何使用显微镜观察细胞；
2、了解细胞的结构；
3、学会制作临时装片。
二、实验材料：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片
三、实验用具：  载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X）
四、方法步骤：
1、制作松针的临时切片：
（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。
（2）将土豆切成条状（截面约：0.5X0.5cm)取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。
（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。
2、观察切片：
（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。
（2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。
（3）使用5X物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X物镜，观察松针叶面横切结构。
（4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。
3、 动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）
4、 动物神经细胞永久装片的观察。
五、考点提示：
1、松针的叶面结构是什么样的？
2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？
3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？
4、如何调节焦距？
5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。
实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、实验目的： 
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜，初步掌握鉴定上述化合
物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二、实验原理：
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜反应。
1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红的Cu 2O沉淀。如：
  葡萄糖 + 2Cu2+ + 4OH—    加热    葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红）+ H 2O
即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝→棕→砖红沉淀
淀粉遇碘变蓝（直链）或紫（红）（支链）。
2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中，脂类染法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37℃-60℃）对组织切片染效果是有好处的。
脂类染，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄或橙红（或被苏丹Ⅳ染液染成红），胆脂素呈淡红，脂肪酸不着，细胞核呈蓝。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫反应。）
三、实验材料：
1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜为白的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜较浅，易于观察。）经试验比较，颜反应的明显程度依次为苹果、梨、白甘蓝叶、白萝卜。
2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。
3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。
四、实验用具：双面刀片、试管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜
五、实验试剂：
1．斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）
2．苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
3．双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）
4．体积分数为50%的酒精溶液
5．碘液
6．蒸馏水
六、方法步骤：
一、可溶性糖的鉴定
如何打分数
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
1. 制备组织样液。
（去皮、切块、研磨、过滤）
苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐，将产生的颜掩盖。
2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。
 
 
3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；
 
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~ 900C下分解成黑CuO和水；
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu OH生成。
4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜：浅蓝 → 棕 → 砖红（沉淀）
最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；
 
缩短实验时间。
二、脂肪的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染1分钟。
染时间不宜过长。
 
用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮，吸去酒精。
 
酒精用于洗去浮，不洗去浮，会影响对橘黄脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。
 
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄或红圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长，油滴会溶解在乙醇中。
三、蛋白质的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
制备组织样液。
（浸泡、去皮研磨、过滤。）
 
黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫。
A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。
 
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。
否则CuSO4的蓝会遮盖反应的真实颜。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。
附：淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜观察
七、考点提示：
1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
2、还原性糖植物组织取材条件？ 答：含糖量较高、颜为白或近于白，如：苹果、梨、白甘蓝叶、白萝卜等。
3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答：加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜变化不明显。
4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。
5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜变化的顺序为？ 答：浅蓝 棕 砖红。
6、花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是
什么？ 答：切片的厚薄不均匀。
8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮。
9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜变化？ 答：不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三：观察DNA和RNA在细胞中的分布
一、实验原理：
1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。
2、甲基绿和吡罗红两种染剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红。用甲基绿、吡罗红的混合染剂将细胞染，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
3、盐酸的作用
① 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染剂的跨膜运输；
② 盐酸使染体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染剂的结合
二、实验材料：人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞
三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、
石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜
四、方法步骤：
1、取材
① 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液；
② 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；