CNAS-GL038
临床免疫学定性检验程序性能验证指南Guidance of Verification of Qualitative Measurement Procedures used in the Clinical Immunology
中国合格评定国家认可委员会
前言
本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》和 CNAS-CL02-A004：2018《医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学定性检验领域的应用说明》中有关临床免疫学定性检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。
本文件为首次发布。
临床免疫学定性检验程序性能验证指南
1 范围
本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床免疫学（定性）检验程序进行性能验证实验活动，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。
本指南主要适用于医学实验室使用的临床免疫学定性检验方法，其他专业领域使用的定性检验程序/方法可参考使用。
临床免疫学定性检验程序，也称临床免疫学定性检验方法，在本指南中统一称为临床免疫学定性检验程序（以下简称“检验程序”），包括纯定性免疫检验、半定量（滴度）的免疫检验和以定量方式报定性结果的免疫检验等各项检验活动。
本文件适用于医学实验室采用的经确认的检验程序。
2 规范性引用文件GL甜文推荐
下列文件对于本指南的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。
WS/T 416-2013《干扰实验指南》
WS/T 494-2017《临床定性免疫检验重要常规项目分析质量要求》
WS/T 505-2017《定性测定性能评价指南》
WS/T 514-2017《临床检验方法检出能力的确立和验证》
3 术语和定义
对于本标准，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。下列术语和定义适用于本指南。
3.1 5%～95%浓度区间 C
5～C
95
interval
临界值附近的分析物浓度，在此区间之外的检测到的浓度结果始终为阴性
（浓度<C
5）或始终为阳性（浓度>C
95
）。
注：C5即仅有5%被检样本可被判断为阳性时的分析物浓度，C95即有95%被检样本可被判断为阳性时的分析物浓度。
3.2诊断准确度标准 diagnostic accuracy criteria
使用单一方法或方法组合（包括实验室检查、影像学检测、病理学和随访信息在内的临床信息），来判断待研究特性存在与否的当前最佳可用标准。随着分析系统的发展，诊断准确度标准会随着改变。诊断准确度标准不考虑候选方法的结果（评估中的新程序）。诊断准确度标准可以评估指定选择的方法组合的综合积分来进行最终的阳性/阴性分类。
4 总则
4.1性能验证的时机
4.1.1新检验程序常规应用前。
4.1.2任何严重影响检验程序分析性能的情况发生后，应在检验程序重新启用前对受影响的性能进行验证。影响检验程序分析性能的情况包括但不限于：仪器主要部件故障、仪器搬迁、设施（如纯水系统）和环境的严重失控等。
4.1.3 常规使用期间，实验室可基于检验程序的稳定性，利用日常工作产生的检验和质控数据，定期对检验程序的分析性能进行评审，应能满足检验结果预期用途的要求。现用检验程序的任一要素（仪器、试剂、校准品等）变更，如试剂升级、仪器更新、校准品溯源性改变等，应重新进行验证。
4.2性能验证的参数
性能验证指标的选择应满足该项目的预期用途，临床免疫学定性检验程序的分析性能参数一般包括：符合率、精密度（重复性）、检出限、临界值、抗干扰能力、血清与血浆结果一致性等。实验室应根据不同检验项目的预期用途，选择对检验结果质量有重要影响的参数进行验证。
5 实验前准备
5.1 实验操作人员应熟悉方法原理与操作，能对样本进行正确处理。
5.2 实验室设施及环境符合检验程序工作要求。
5.3 仪器经过校准，其各项性能指标合格。
5.4 试剂及校准品满足检验程序要求。
6 性能验证要求
6.1 符合率验证
6.1.1诊断符合率验证
临床免疫学定性检验程序可根据诊断准确度标准是否明确来验证诊断符合率。
6.1.1.1 验证要求
当诊断和被检测物的结果明确，即用金标准进行检测，且满足诊断准确度标准时，可采用评估诊断灵敏度和诊断特异性的方法来验证诊断符合率。
6.1.1.2 验证方案
a）当诊断和被检测物的结果明确时，选取阴性样本20份（包含至少10份其他标志物阳性的样本）、阳性样本20份（包含至少10份浓度在cut-off值和2-4倍cut-off值之间的弱阳性样本，1份极高值阳性样本），随机盲号法重新分号，检测样本，将所有检测结果按表1汇总填表。
表1 诊断符合率验证
候选实验
金标准（诊断准确度标准）
疾病非疾病
a（+，阳性）b（+，阳性）a+b c（-，阴性）d（-，阴性）c+d n1 n2 n
b）诊断符合率计算
诊断灵敏度=[a/n1]  × 100%
诊断特异性=[d/n2]  × 100%
诊断符合率=[（a+d）/n] × 100%
6.1.1.3 可接受标准
如果实验室计算得出的诊断灵敏度、诊断特异性和诊断符合率不低于厂商检验方法声明，则通过验证；如果低于厂商检验方法声明，则未通过验证，应寻原因或更换检验方法。
6.1.2 方法符合率验证
临床免疫学定性检验程序当诊断准确度标准不明确时，可采用评估方法符合率的方式来实现符合率的验证，包括用候选方法评估已知能力验证或室间质评的样本以及不同方法学或/和相同方法学在不同实验室之间的比对。