一、实验目的
1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作
二、实验原理
维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。
三、实验仪器和试剂：
1.仪器：
紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。
2. 试剂：421事件内容
维生素B1片、盐酸溶液（9—>1000）
四、实验内容：
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15分钟，使维生素B1溶解，加盐酸（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm处测定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数（E1%1cm）为421计算，即得。
五、实验数据记录及处理
记录项目 | |||
维生素B1质量m/g | |||
吸光度 | |||
吸收系数（E1%1cm） | |||
维生素B1的标示量/% | |||
维生素B1的标示量的平均值/% | |||
相对标准偏差/% | |||
标示量%
六、注意事项
（一） 仪器的准备
1. 开启电源，使仪器预热20分钟。
2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
（二）仪器的操作步骤
1. 设置波长（246nm）。 2. 测定。 3. 数据记录与结果处理。
（三）将比皿洗净装盒，关机
（四）填写仪器使用记录，
（五）维生素B1的紫外吸收峰随溶液pH的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH值。
七、思考题
1.单光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？
2.利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同，试做解释。
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